[發明專利]一種特異性長效siRNA及其在治療腎纖維化中的應用

在審

• 申請號: 201711303524.8
• 申請日: 2017-12-11
• 公開（公告）號: CN108060163A
• 公開（公告）日: 2018-05-22
• 發明（設計）人: 張宏權;戰軍;宋佳桂
• 申請（專利權）人: 北京大學
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;A61K31/7088;A61P13/12
• 代理公司: 北京國林貿知識產權代理有限公司 11001
• 代理人: 鄭俊彥;許文娟

本發明公開了一種特異性長效siRNA及其在治療腎纖維化中的應用。所述特異性長效siRNA特異靶向整合素相互作用蛋白Kindlin?2，能夠有效降低腎臟Kindlin?2蛋白的表達水平，可以有效激活腎臟中的TGFβ和Wnt信號通路，抑制Hippo信號通路，從而治療、延緩腎纖維化的發生；進一步通過動物實驗驗證，UUO導致纖維化發生后給予本發明所述的特異性長效siRNA尾靜脈注射可有效抑制纖維化進程，緩解纖維化程度，并且早期用藥效果好。

技術領域

本發明屬于RNA干擾技術領域，特別涉及一種特異性長效siRNA及其在治療腎纖維化中的應用。

背景技術

腎臟纖維化是一種病理生理改變，是腎臟的功能由健康到損傷，再到損壞，直至功能喪失的漸進過程。腎纖維化是多條信號通路參與的復雜病理過程，到目前為止沒有有效的治療手段。尋找有效的治療靶點，達到阻斷多條致病信號通路、阻斷或延緩纖維化進程將是急、慢性腎病患者的福音。目前已經報道的Kindlin-2可通過激活TGF信號通路參與腎纖維化，然而，Kindlin-2對其他信號通路的調節，能否作為抑制腎纖維化的靶點，在纖維化發生后靶向治療的效果如何并不知曉。

發明內容

本發明的目的是提供一種特異性長效siRNA及其在治療腎纖維化中的應用，所述siRNA特異靶向整合素相互作用蛋白Kindlin-2，能夠有效降低腎臟Kindlin-2蛋白的表達水平，可以有效激活腎臟中的TGFβ和Wnt信號通路，抑制Hippo信號通路，從而治療、延緩腎纖維化的發生。

本發明的目的是通過以下技術方案實現的：

一種特異性長效siRNA（Kindlin-2 siRNA），其序列為5′-CAGCGAGAAUCUUGGAGGC-3′。

進一步的，所述siRNA經2'OMe修飾和5’Chol修飾。

進一步的，所述的特異性長效siRNA可應用于制備治療或緩解腎纖維化藥物。

進一步的，所述的特異性長效siRNA可應用于制備預防腎纖維化保健品、藥物。

一種治療或緩解腎纖維化的藥物組合物，所述藥物組合物中含所述的特異性長效siRNA。

進一步的，所述藥物組合物為靜脈注射劑。

進一步的，所述特異性長效siRNA的用量為1~10nmol/20g體重，優選用量為5nmol/20g體重。

本研究發現Kindlin-2與Hippo信號通路關鍵分子LATS1和YAP相互作用形成三分子復合物，并通過阻礙二者相互結合抑制YAPKindlin-2受YAP的負反饋調節。在臨床腎纖維化患者腎組織中我們發現Hippo信號通路分子表達上調的同時，其中保護機制p-YAP的表達水平與Kindlin-2的表達呈負相關。采用長效Kindlin-2siRNA尾靜脈注射治療UUO過程中的腎纖維化形成，我們發現靶向Kindlin-2的siRNA可有效緩解腎纖維化的發生，并且越早用藥效果越好。總之，我們發現Kindlin-2可調節腎纖維化過程中的三大信號通路，敲低Kindlin-2的表達可緩解腎纖維化的發生。纖維化發生后給予Kindlin-2siRNA尾靜脈注射可有效抑制纖維化進程，緩解纖維化程度，并且越早用藥效果越好。

本發明相比現有技術的有益效果為：

1、本發明揭示了敲低Kindlin-2蛋白表達緩解腎纖維化發生的具體分子機制，發現Kindlin-2可同時調節腎纖維化發生過程中的三大信號通路，激活TGFβ和Wnt信號通路，抑制Hippo信號通路；

2、本發明所述的特異性長效siRNA，特異靶向整合素相互作用蛋白Kindlin-2，能夠有效降低腎臟Kindlin-2蛋白的表達水平，可以有效激活腎臟中的TGFβ和Wnt信號通路，抑制Hippo信號通路，從而治療、延緩腎纖維化的發生；