[發明專利]RAA熒光法檢測布魯氏桿菌的探針及試劑盒在審
| 申請號: | 201711294177.7 | 申請日: | 2017-12-08 |
| 公開(公告)號: | CN108048584A | 公開(公告)日: | 2018-05-18 |
| 發明(設計)人: | 吳斌;蘇立明;張琳;馬嗣同;郭利川;王智宏;應清界 | 申請(專利權)人: | 吳斌;江蘇奇天基因生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/689 | 分類號: | C12Q1/689;C12Q1/6844;C12Q1/04;C12N15/11;G01N21/64;C12R1/01 |
| 代理公司: | 大連東方專利代理有限責任公司 21212 | 代理人: | 劉慧娟;李馨 |
| 地址: | 116000 遼*** | 國省代碼: | 遼寧;21 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | raa 熒光 檢測 布魯氏 桿菌 探針 試劑盒 | ||
1.RAA熒光法檢測布魯氏桿菌的探針,其特征在于,
所述探針為5’端序列/熒光報告基團//idSp//淬滅基團/3’端序列;其中:
所述5’端序列的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;
所述3’端序列的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示;
所述idSp為1個堿基空位;
所述熒光報告基團選自FAM、HEX、TET、JOE、VIC、ROX、Cy3或Cy5中的任一種;
所述淬滅基團選自TAMRA、Eclipse、BHQ1、BHQ2、BHQ3或DABCYL中的任一種。
2.一種布魯氏桿菌RAA熒光法檢測試劑盒,其特征在于,所述試劑盒包括權利要求1所述的探針以及下述引物:上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示;下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。
3.根據權利要求2所述的布魯氏桿菌RAA熒光法檢測試劑盒,其特征在于,所述的探針終濃度為0.02-0.05mM,所述上游引物及下游引物終濃度為0.05-0.1mM。
4.根據權利要求2所述的布魯氏桿菌RAA熒光法檢測試劑盒,其特征在于,所述試劑盒還包括試劑RAA基礎熒光通用反應試劑和反應緩沖液。
5.根據權利要求4所述的布魯氏桿菌RAA熒光法檢測試劑盒,其特征在于,所述反應緩沖液包括:使用濃度為450mM的Tris-HCl Buffer;260mM的MgAc;20%W/V的PEG 10000。
6.根據權利要求2所述的布魯氏桿菌RAA熒光法檢測試劑盒,其特征在于,所述試劑盒還包括如下試劑:陰性質控品、陽性質控品和/或臨界陽性質控品;
所述陽性質控品含為布魯氏桿菌的基因組DNA片段,使用濃度為1.0×10
所述臨界陽性質控品為含布魯氏桿菌的基因組DNA片段,使用濃度為1.0×10
所述陰性質控品為不含有布魯氏桿菌的基因組片段的試劑。
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