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[發明專利]RAA熒光法檢測布魯氏桿菌的探針及試劑盒在審

專利信息
申請號: 201711294177.7 申請日: 2017-12-08
公開(公告)號: CN108048584A 公開(公告)日: 2018-05-18
發明(設計)人: 吳斌;蘇立明;張琳;馬嗣同;郭利川;王智宏;應清界 申請(專利權)人: 吳斌;江蘇奇天基因生物科技有限公司
主分類號: C12Q1/689 分類號: C12Q1/689;C12Q1/6844;C12Q1/04;C12N15/11;G01N21/64;C12R1/01
代理公司: 大連東方專利代理有限責任公司 21212 代理人: 劉慧娟;李馨
地址: 116000 遼*** 國省代碼: 遼寧;21
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摘要:
搜索關鍵詞: raa 熒光 檢測 布魯氏 桿菌 探針 試劑盒
【權利要求書】:

1.RAA熒光法檢測布魯氏桿菌的探針,其特征在于,

所述探針為5’端序列/熒光報告基團//idSp//淬滅基團/3’端序列;其中:

所述5’端序列的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;

所述3’端序列的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示;

所述idSp為1個堿基空位;

所述熒光報告基團選自FAM、HEX、TET、JOE、VIC、ROX、Cy3或Cy5中的任一種;

所述淬滅基團選自TAMRA、Eclipse、BHQ1、BHQ2、BHQ3或DABCYL中的任一種。

2.一種布魯氏桿菌RAA熒光法檢測試劑盒,其特征在于,所述試劑盒包括權利要求1所述的探針以及下述引物:上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示;下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。

3.根據權利要求2所述的布魯氏桿菌RAA熒光法檢測試劑盒,其特征在于,所述的探針終濃度為0.02-0.05mM,所述上游引物及下游引物終濃度為0.05-0.1mM。

4.根據權利要求2所述的布魯氏桿菌RAA熒光法檢測試劑盒,其特征在于,所述試劑盒還包括試劑RAA基礎熒光通用反應試劑和反應緩沖液。

5.根據權利要求4所述的布魯氏桿菌RAA熒光法檢測試劑盒,其特征在于,所述反應緩沖液包括:使用濃度為450mM的Tris-HCl Buffer;260mM的MgAc;20%W/V的PEG 10000。

6.根據權利要求2所述的布魯氏桿菌RAA熒光法檢測試劑盒,其特征在于,所述試劑盒還包括如下試劑:陰性質控品、陽性質控品和/或臨界陽性質控品;

所述陽性質控品含為布魯氏桿菌的基因組DNA片段,使用濃度為1.0×104IU/mL;

所述臨界陽性質控品為含布魯氏桿菌的基因組DNA片段,使用濃度為1.0×103IU/mL;

所述陰性質控品為不含有布魯氏桿菌的基因組片段的試劑。

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