[發明專利]水稻抽穗揚花期耐熱主效QTL位點qHTF-1的分子標記方法及應用

有效

• 申請號: 201711293242.4
• 申請日: 2017-12-08
• 公開（公告）號: CN107937588B
• 公開（公告）日: 2021-01-05
• 發明（設計）人: 雷東陽;曠浩源
• 申請（專利權）人: 湖南農業大學
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895
• 代理公司: 長沙正奇專利事務所有限責任公司 43113
• 代理人: 何為;袁穎華

一種水稻抽穗揚花期耐熱主效QTL位點qHTF?1的分子標記方法，該方法利用分子標記RM23的引物對或分子標記RM562的引物對中的一對或兩對引物，對待鑒定水稻材料DNA進行PCR擴增，若擴增出對應大小的DNA片段，則標志耐熱主效QTL qHTF?1存在。本方法通過應用篩選到的與在耐熱水稻品種特青第1染色體上定位到的抽穗揚花期耐熱主效QTL qHTF?1緊密連鎖的2個SSR標記，預測水稻材料的高溫耐性，有利于耐熱抗逆水稻新品種的選育，加快了耐熱水稻品種的選擇進度。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及稻米重要抗逆性狀耐熱主效QTL位點qHTF-1的分子標記方法，同時還涉及該分子標記方法在選育耐熱抗逆水稻品種中的應用。

背景技術

全球氣候持續變暖，給中國水稻生產帶來了非常嚴重的影響。水稻對溫度最敏感的時期為抽穗揚花期，此時期如遇日平均氣溫高于35℃的高溫，易誘發小花不育，造成受精障礙，導致不能結實而降低產量。抽穗揚花期遭遇高溫熱害造成結實率大幅度下降而減產，如2003年夏，南方部分稻區38℃以上高溫持續20多天，僅湖北、安徽兩省受災面積80多萬公頃，損失產量10億公斤以上；2006年，川渝地區發生特大高溫災害，導致當年水稻減產25％以上；2013年、2016年和2017年，中國長江流域的重慶、湖北、湖南、安徽和浙江等省區多次遭受大范圍持續38℃以上的高溫危害，導致水稻等糧食作物大面積減產，嚴重的結實率下降50％。因此，高溫熱害是影響我國水稻安全生產的最主要氣象災害，如何快速、準確選育耐熱的水稻品種是當前育種家的主要目標。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是：針對上述現有技術的不足，提供一種水稻抽穗揚花期耐熱主效QTL位點qHTF-1的分子標記方法，同時還提供該方法在選育耐熱抗逆水稻品種中的應用。

為了解決上述技術問題，本發明所采用的技術方案是：一種水稻抽穗揚花期耐熱主效QTL位點qHTF-1的分子標記方法，該方法是利用分子標記RM23的引物對或分子標記RM562的引物對中的一對或兩對引物，對待鑒定水稻材料的DNA進行PCR擴增，如擴增出對應大小的DNA片段，則標志著水稻抽穗揚花期耐熱主效QTL qHTF-1存在；

其中，上述分子標記RM23的引物對序列為：上游引物5’-CATTGGAGTGGAGGCTGG-3’(SEQ ID No.1)、下游引物5’-GTCAGGCTTCTGCCATTCTC-3’(SEQ ID No.2)，進行PCR擴增后，電泳能檢測到與水稻品種特青相同位置的條帶，擴增產物大小為140-150bp；

上述分子標記RM562的引物對序列為：上游引物5’-CACAACCCACAAACAGCAAG(SEQID No.3)、下游引物5’-CTTCCCCCAAAGTTTTAGCC-3’(SEQ ID No.4)，進行PCR擴增后，電泳能檢測到與水稻品種特青相同位置的條帶，擴增產物大小為185-195bp。

上述提及的PCR擴增時的反應體系組成：2μmol/L引物0.4μL、DNA模板1.0μL、2×Easy Taq Super Mix 5.0μL以及ddH₂O 3.6μl，共10μL；反應條件為：94℃預變性5min后進行35個循環擴增，循環條件為94℃變性30s，58℃復性30s，72℃延伸1min，最后在72℃終延伸5min。

本發明同時提供所述的水稻抽穗揚花期耐熱主效QTL位點qHTF-1的分子標記方法在選育耐熱抗逆水稻品種中的應用。

本發明采用QTL位點的分子標記方法，是應用篩選到的與在耐熱水稻品種特青第1染色體上定位到的抽穗揚花期耐熱主效QTL qHTF-1緊密連鎖的2個SSR標記，預測水稻材料的高溫耐性，加快耐熱水稻品種的選擇進度。

附圖說明