[發明專利]一種尿促卵泡素精品的制造方法

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• 申請號: 201711274325.9
• 申請日: 2017-12-06
• 公開（公告）號: CN109879952A
• 公開（公告）日: 2019-06-14
• 發明（設計）人: 劉乃山;夏襯來;王林鵬
• 申請（專利權）人: 青島康原藥業有限公司
• 主分類號: C07K14/59
• 分類號: C07K14/59;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種尿促卵泡素精品的制造方法，其特征在于，包括以下步驟：溶解、上樣、洗滌、洗脫、超濾、沉淀、離心脫水、干燥。

2.根據權利要求1所述的尿促卵泡素精品的制造方法，其特征在于,所述的溶解步驟是：用pH值7.0的緩沖液A（0.05mol/lNa₂HPO₄ ，0.05mol/L NaH₂PO₄）溶解尿促卵泡素粗品，比例為每10g尿促卵泡素粗品加入1L pH值7.0的緩沖液A（0.05mol/lNa₂HPO₄ ，0.05mol/LNaH₂PO₄），攪拌15-30分鐘，得到尿促卵泡素料液。

3.根據權利要求1所述的尿促卵泡素精品的制造方法，其特征在于,所述的上樣步驟是：將尿促卵泡素料液以1L/min流速進行上樣。

4.根據權利要求1所述的尿促卵泡素精品的制造方法，其特征在于,所述的洗滌步驟是：上樣結束后，用pH值7.0的緩沖液A（0.05mol/lNa₂HPO₄ ，0.05mol/L NaH₂PO₄）洗滌至流出液280nm處OD值在0.25以下，流速控制在1L/min。

5.根據權利要求1所述的尿促卵泡素精品的制造方法，其特征在于,所述的洗脫步驟是：用pH7.0的緩沖液B（0.05mol/lNa₂HPO₄ ，0.05mol/L NaH₂PO₄，0.1mol/L NaCl）洗脫，流速控制在1L/min，洗脫至洗脫液280nm處OD值在0.35以上，滴加乙醇變渾濁后，開始收集洗脫液，直到280nm處OD值在0.35以下，停止收集洗脫液。

6.根據權利要求1所述的尿促卵泡素精品的制造方法，其特征在于,所述的超濾步驟是：計量收集的洗脫液體積，轉入不銹鋼桶內，加入pH7.0的0.1mol/lNaCOOH₃溶液，比例為每L洗脫液加入2L pH7.0的0.1mol/lNaCOOH₃溶液，然后用10KD的超濾膜超濾，超濾液體積為原體積的15-20%。

7.根據權利要求1所述的尿促卵泡素精品的制造方法，其特征在于,所述的沉淀步驟是：計量收集的超濾液體積，轉入不銹鋼桶內，加入溫度≤-20℃的95%冷乙醇，比例為每L流出收集液加入5L溫度≤-20℃的95%冷乙醇，用攪拌棒攪拌均勻，然后靜置沉淀12-16h。

8.根據權利要求1所述的尿促卵泡素精品的制造方法，其特征在于,所述的離心脫水步驟是：虹吸去上清液，下層沉淀物置入冷凍離心機中，離心轉速為3500rpm，離心30分鐘，棄去上清液，用無水乙醇離心脫水2次，棄去上清液，得到沉淀物。

9.根據權利要求1所述的尿促卵泡素精品的制造方法，其特征在于,所述的干燥步驟是：沉淀物置于五氧化二磷做干燥劑的真空干燥箱內真空干燥，干燥后得尿促卵泡素精制品。

10.根據權利要求1所述的尿促卵泡素精品的制造方法，其特征在于,所述制得的尿促卵泡素精品：收率≥80%，效價≥500IU/mg，25℃溫度條件下存放6個月效價降低≤5%。