[發明專利]一種鹽酸纈更昔洛韋中間體水解物異構體的HPLC檢測方法

有效

• 申請號: 201711267489.9
• 申請日: 2017-12-05
• 公開（公告）號: CN108267519B
• 公開（公告）日: 2021-02-12
• 發明（設計）人: 柳旭;余再丹;劉俊;鄧亞萍;邵振;周震;劉欣
• 申請（專利權）人: 湖北麗益醫藥科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 武漢開元知識產權代理有限公司 42104
• 代理人: 徐紹新

本發明屬于藥物分析領域，具體公開了一種鹽酸纈更昔洛韋中間體水解物對映異構體的HPLC檢測方法，該方法使用以纖維素?三(3,5?二氯苯基氨基甲酸酯)鍵合硅膠為填充劑的手性色譜柱，并以烷烴和醇類混合溶液作為流動相，柱溫為20～40℃，流速為1.0～1.5ml/min，波長為250～260nm。本發明實現了對鹽酸纈更昔洛韋中間體水解物四種異構體的有效分離，檢測結果準確性好、靈敏度高、操作簡便、成本低，分析時間短，為鹽酸纈更昔洛韋中間體水解物的質量控制提供了保障。

技術領域

本發明屬于藥物分析領域，具體涉及一種鹽酸纈更昔洛韋中間體水解物異構體的HPLC檢測方法。

背景技術

鹽酸纈更昔洛韋是一種皰疹病毒DNA的合成抑制劑，由瑞士Roche公司研發，2010年在瑞典和芬蘭作為處方藥首次上市，用于治療獲得性免疫缺陷綜合癥(AIDS)患者的巨細胞病毒(CMV)視網膜炎及預防高危實體器官移植患者的CMV感染。2001年3月獲準美國FDA許可，2001年5月首次在美國上市銷售。國內外的多項研究顯示，鹽酸纈更昔洛韋片藥理作用明顯，作用機制較新穎，毒性低，不良反應少，臨床療效顯著，患者順應性高，應用安全。

中間體水解物是鹽酸纈更昔洛韋合成過程中的關鍵中間體，化學名稱為(S)-2-芐氧羰氨基-3-甲基丁酸(R,S)-2-[(2-氨基-6-氧代-1,6-二氫-9H-嘌呤-9-基)甲氧基]-3-羥基丙酯，分子量為287.2，結構式見表1。它經過氫化成鹽后即可得到鹽酸纈更昔洛韋，對于鹽酸纈更昔洛韋，目前進口注冊標準中規定其非對映異構體比例范圍為45:55～55:45，其對映異構體的含量不得超過3.0％，所以在合成過程中，開發具有專屬性的方法來檢測中間體水解物四種異構體構型的純度，并制定合理可行的非對映異構體比例范圍和對映異構體雜質限度，是中間體水解物質量控制的重要部分，也是保證鹽酸纈更昔洛韋及其制劑產品質量的重要部分。

表1中間體水解物及其對映異構體結構式：

通過查閱大量中外文獻及專利，目前還沒有通過高效液相色譜的方法來檢測中間體水解物四種異構體純度的文獻報道，不利于企業對產品質量的把控。

發明內容

為了解決目前技術問題，本發明通過大量實驗探索提供了一種分離分析鹽酸纈更昔洛韋中間體水解物四種手性構型的方法，從而更好地控制鹽酸纈更昔洛韋產品質量。

本發明提供的技術方案是：

一種鹽酸纈更昔洛韋中間體水解物異構體的HPLC檢測方法：采用以纖維素-三(3,5-二氯苯基氨基甲酸酯)鍵合硅膠為填充劑的手性色譜柱，以烷烴和醇的混合溶液為流動相對鹽酸纈更昔洛韋中間體水解物四種手性構型進行分離測定，所述HPLC檢測采用如下任選的色譜條件：

流動相流速為1.0～1.5ml/min，

色譜柱溫度為20～40℃，

檢測器采用紫外檢測器，檢測波長為250～260nm。

優選地，所述流動相中，烷烴占流動相總體積的50～75％，最佳為70％。

優選地，所述烷烴為正己烷和/或正庚烷；所述醇為乙醇和/或異丙醇。

進一步優選地，所述烷烴為正己烷；所述醇為乙醇。

優選地，所述色譜柱溫度為35℃。

優選地，所述檢測波長為254nm。

本發明與現有技術相比具有以下優點和積極效果：

1.本發明的方法實現了對鹽酸纈更昔洛韋中間體水解物四種異構體的有效分離和檢測，因此本發明能夠更好的實現對中間體水解物和成品鹽酸纈更昔洛韋的質量控制，提高最終產品的品質，保證了其臨床用藥的安全有效。