[發(fā)明專利]一種控制黃鱔受精卵第一次卵裂的方法及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201711265194.8
• 申請(qǐng)日: 2017-12-05
• 公開（公告）號(hào): CN107916250B
• 公開（公告）日: 2020-09-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 胡煒;羅紅瑞;馮科;蔣謀炎;侯明喜;朱作言
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院水生生物研究所
• 主分類號(hào): C12N5/073
• 分類號(hào): C12N5/073;A01K61/17
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務(wù)所 42001
• 代理人: 龔瑩瑩

本發(fā)明公開了一種控制黃鱔受精卵第一次卵裂的方法及其應(yīng)用，該方法是將受精后102~127min內(nèi)的黃鱔受精卵置于40?42℃水浴中熱休克處理3?5min以抑制第一次卵裂，從而用于制備四倍體的黃鱔或者人工誘導(dǎo)雌核發(fā)育的二倍體黃鱔。本發(fā)明針對(duì)養(yǎng)殖黃鱔沒有品種，種質(zhì)完全依賴于野生資源的問題，提供了一種控制黃鱔受精卵第一次卵裂的方法，為培育出黃鱔優(yōu)良養(yǎng)殖品種和品系提供了強(qiáng)有力的技術(shù)手段。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及水產(chǎn)動(dòng)物遺傳育種技術(shù)領(lǐng)域，更具體涉及一種控制黃鱔受精卵第一次卵裂的方法，采用該方法可以創(chuàng)制出四倍體的黃鱔，還可以培育出人工誘導(dǎo)雌核發(fā)育的二倍體黃鱔，為培育出具有優(yōu)良性狀的黃鱔養(yǎng)殖品種、快速獲得養(yǎng)殖黃鱔純系提供了強(qiáng)有力的技術(shù)支持。

背景技術(shù)

黃鱔(Monopterusalbus)為合鰓魚目、合鰓魚科、黃鱔屬，具有雌雄同體、先雌后雄的性反轉(zhuǎn)生物學(xué)特性，其性腺發(fā)育在生命過程中經(jīng)歷雌性、間性和雄性三種性腺分化。黃鱔是開展魚類性別分化和生殖發(fā)育機(jī)制研究的理想試驗(yàn)材料。不僅如此，黃鱔肉味鮮美，含有豐富的多不飽和脂肪酸，如DHA(二十二碳六烯酸，DocosahexaenoicAcid)、EPA(二十碳五烯酸，Eicosapentaenoic Acid)和卵磷脂，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，是我國(guó)重要的名特優(yōu)水產(chǎn)養(yǎng)殖對(duì)象。

統(tǒng)計(jì)資料表明，黃鱔在國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)的年需求量為300萬噸左右，但目前年產(chǎn)量不到40萬噸，全國(guó)黃鱔苗種缺口至少在200億尾以上，其原因在于黃鱔雌雄同體、先雌后雄的天然性反轉(zhuǎn)特性，既導(dǎo)致雌性親鱔因個(gè)體小而懷卵量少，又造成雌親鱔與雄親鱔發(fā)育不同步，生產(chǎn)中無法獲得穩(wěn)定的雌雄親本群體，尤其是雄性性成熟親本奇缺。因此，黃鱔的規(guī)模化人工繁殖難以進(jìn)行，養(yǎng)殖黃鱔所需要的苗種幾乎全部來自于捕撈野生鱔苗。黃鱔養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展亟需培育出性狀穩(wěn)定的優(yōu)良養(yǎng)殖品種和品系。

染色體倍性操作技術(shù)在魚類優(yōu)良品種培育方面發(fā)揮了巨大作用。不育的三倍體魚將性腺發(fā)育所需的繁殖能用于生長(zhǎng)，因此三倍體魚通常具有高產(chǎn)的特性。三倍體魚的培育通常采用溫度休克或秋水仙素處理等物理或化學(xué)方法直接誘導(dǎo)，但無論是物理方法還是化學(xué)方法，都無法獲得100％的三倍體魚。通過制備出四倍體魚后，再與二倍體魚進(jìn)行倍間雜交，則可以培育出100％的三倍體魚。目前已經(jīng)建立了虹鱒、羅非魚和團(tuán)頭魴等人工同源四倍體魚的培育方法，以及鯽鯉、鯽魴等通過遠(yuǎn)源雜交染色體倍性操作產(chǎn)生的異源四倍體魚的培育方法(徐康，段巍，肖軍，陶敏，張純，劉筠，劉少軍，魚類遺傳育種中生物學(xué)方法的應(yīng)用及研究進(jìn)展。中國(guó)科學(xué)：生命科學(xué)，2014，44(12)：1272-1288.)。但是，目前僅有1篇熱休克人工誘導(dǎo)三倍體黃鱔的研究報(bào)道(常重杰，杜啟艷，盧龍斗，路淑霞，李慧.熱休克誘導(dǎo)三倍體黃鱔的研究，河南師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)，1997，25(2):60-63.)，迄今沒有四倍體黃鱔的培育技術(shù)。

連續(xù)近親交配是獲得養(yǎng)殖魚類純系的經(jīng)典方法，但這種方法通常需要8-10代同胞兄妹的交配才可能獲得純系。人工誘導(dǎo)雌核發(fā)育則可以快速增加魚類遺傳的同質(zhì)性，是迅速建立養(yǎng)殖魚類純系的有效方法。抑制受精卵第一次卵裂雌核發(fā)育的純合度相當(dāng)于連續(xù)4代的同胞兄妹交配，極大地提高了養(yǎng)殖魚類純系培育的效率。人工誘導(dǎo)雌核發(fā)育技術(shù)已經(jīng)成功應(yīng)用于鯉、鯽、草魚、團(tuán)頭魴、羅非魚、牙鲆、虹鱒等重要養(yǎng)殖魚類(Komen H,ThorgaardG H.Androgenesis,gynogenesis and the production of clones in fishes:areview.Aquaculture,2007,269(1-4):150–173.Felip A,Zanuy S,Carrillo M,PiferrerF.Induction of triploidy and gynogenesis in teleost fish with emphasis onmarine species.Genetica,2001,111(1-3):175–195.)，但是，迄今尚沒有建立黃鱔的人工誘導(dǎo)雌核發(fā)育技術(shù)。