[發明專利]適于中溫好氧生物堆系統中深度修復石油烴污染土壤的混合菌劑及其制備和應用

在審

• 申請號: 201711261825.9
• 申請日: 2017-12-04
• 公開（公告）號: CN108004163A
• 公開（公告）日: 2018-05-08
• 發明（設計）人: 郭書海;王卅;李鳳梅;張凱
• 申請（專利權）人: 中國科學院沈陽應用生態研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;B09C1/10;C12R1/10;C12R1/085
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標代理有限公司 21002
• 代理人: 李穎;周秀梅

1.一種適于中溫好氧生物堆系統中深度修復石油烴污染土壤的混合菌劑，其特征在于：混合菌劑由地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)與蠟樣芽孢桿菌(Bacilluscereus)兩種石油烴組分功能降解菌混合并固定化制成，其中，地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis)已于2011年7月22日保藏于中國典型培養物保藏中心，地址為武漢市武昌珞珈山，保藏登記號為CCTCC NO：M 2011261；蠟樣芽孢桿菌(Bacillus cereus)已于2015年12月3日保藏于中國典型培養物保藏中心，地址為武漢市武昌珞珈山，保藏登記號為CCTCCNO：M 2015705。

2.按權利要求1所述的適于中溫好氧生物堆系統中深度修復石油烴污染土壤的混合菌劑，其特征在于：所述兩種石油烴組分功能降解菌按6:1～10:1(V:V)和1:3～1:5(V:V)的比例制成混合菌液A和混合菌液B，混合菌液分別經碳化稻殼固定化，即得混合菌劑A和混合菌劑B。

3.按權利要求1所述的適于中溫好氧生物堆系統中深度修復石油烴污染土壤的混合菌劑，其特征在于：所述碳化稻殼固定化為將碳化稻殼與混合菌劑按7:1～9:1(w/w，g/g)的比例混合，放置12～16h后離心收集固定化菌劑。

4.一種權利要求1所述的適于中溫好氧生物堆系統中深度修復石油烴污染土壤的混合菌劑的制備，其特征在于：混合菌劑由地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)與蠟樣芽孢桿菌(Bacillus cereus)兩種石油烴組分功能降解菌混合并固定化制成。

5.按權利要求4所述的適于中溫好氧生物堆系統中深度修復石油烴污染土壤的混合菌劑的制備，其特征在于：所述兩種石油烴組分功能降解菌按6:1～10:1(V:V)和1:3～1:5(V:V)的比例制成混合菌液A和混合菌液B，混合菌液分別經碳化稻殼固定化，即得混合菌劑A和混合菌劑B。

6.按權利要求4或5所述的適于中溫好氧生物堆系統中深度修復石油烴污染土壤的混合菌劑的制備，其特征在于：所述碳化稻殼固定化為將碳化稻殼與混合菌劑按7:1～9:1(w/w，g/g)的比例混合，放置12～16h后離心收集固定化菌劑。

7.一種權利要求1所述的適于中溫好氧生物堆系統中深度修復石油烴污染土壤的混合菌劑的應用，其特征在于：所述混合菌劑在中溫好氧生物堆系統中對石油烴污染土壤進行深度修復中的應用。

8.按權利要求7所述的適于中溫好氧生物堆系統中深度修復石油烴污染土壤的混合菌劑的應用，其特征在于：所述混合菌劑A施加于初始生物堆修復系統中，細菌微生物數量達5～9×108CFU·g-1；當石油烴降解效率下降時，混合菌劑B補充施加于中溫好氧生物堆體內，并維持堆體內細菌總數達初始含量的80％～100％。

9.按權利要求8所述的適于中溫好氧生物堆系統中深度修復石油烴污染土壤的混合菌劑的應用，其特征在于：所述石油烴降解效率下降，為某時段內石油烴降解效率下降為初始時段降解效率的50％以下。