[發明專利]細胞培養裝置

在審

• 申請號: 201711224441.X
• 申請日: 2013-04-16
• 公開（公告）號: CN107841461A
• 公開（公告）日: 2018-03-27
• 發明（設計）人: D.J.布朗;S.卡拉科茲安;陳曉偉
• 申請（專利權）人: 快速微型生物系統公司
• 主分類號: C12M3/04
• 分類號: C12M3/04
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司72001
• 代理人: 羅文鋒

本申請為分案申請，原申請的申請日為2013年4月16日，申請號為201380031394.0(PCT/US2013/036816)，發明名稱為“細胞培養裝置”。

相關申請的交叉引用

本申請要求提交于2012年4月16日的美國臨時申請號61/624,643的權益，該臨時申請通過引用并入此處。

發明背景

本發明涉及細胞培養和檢測領域。

在許多產業中，尤其在食品、飲料、醫療保健、電子和制藥產業中，快速地分析樣品被諸如細菌、酵母或霉菌等微生物污染的程度是必需的。

一種微生物培養技術，被稱為微生物計數或菌落計數，定量在樣品中的微生物細胞的數量。基于原位微生物復制的微生物計數方法通常針對樣品中的每個微生物細胞生成一個視覺上可測量的“菌落”。因此，計數可見的菌落允許微生物學家準確地確定在樣品中的微生物細胞的數量。為進行微生物計數，可將細菌細胞散布于皮氏培養皿（“瓊脂平板”）中的營養瓊脂表面并在允許原位細菌復制的條件下孵育。微生物計數是簡單的、極靈敏的、便宜的且定量的，但也可能是慢的。

存在對用于快速微生物計數的另外的培養裝置和方法的需求。

發明概要

本發明提供了用于捕獲和培養微生物（例如，存在于環境樣品中的）的裝置和試劑盒。在一個方面中，本發明提供了細胞培養裝置，其包括：包含微生物營養培養基的基底；覆蓋營養培養基的多孔膜；以及與基底配合以遮蓋所述膜和營養培養基的蓋子。營養培養基具有在基底上凸起的平面生長區域和從平面生長區域的邊緣向基底傾斜的周向區域，并且該營養培養基能夠維持在生長區域中的微生物的生長。在某些實施方案中，基底包含聚苯乙烯。基底也可包括周向凹槽，橫跨所述周向凹槽封接所述膜。所述膜包括，例如，混合纖維素酯膜。膜可以是基本上無發射光和基本上無反射的和/或黑色的。

在其它的實施方案中，生長區域在樣品采集前具有100-450 μm的平整度或在樣品采集后具有300-500 μm的平整度。營養培養基可以維持或不維持在周向區域中的微生物的生長。膜可以通過封接至基底的薄膜附接于基底。備選地，裝置可進一步包括應用于基底和周向區域的薄膜，其中該薄膜將膜粘附于基底。

在另一方面中，本發明提供了這樣的細胞培養裝置，其包括：包含微生物營養培養基的基底，其中該營養培養基具有在基底上凸起的平面生長區域（例如，約100-450微米的平整度），其中該營養培養基能夠維持在生長區域中的微生物的生長；覆蓋營養培養基的薄膜，其中該薄膜和該營養培養基具有從平面生長區域的邊緣向基底傾斜的周向區域，并且該薄膜具有開口以暴露出平面生長區域的一部分；和與基底配合以遮蓋營養培養基的蓋子。在另一個實施方案中，該裝置還包括與暴露的生長區域接觸的多孔膜。

在另一方面中，本發明提供了用于細胞培養的包括細胞培養裝置的試劑盒，該裝置包括包含微生物營養培養基的基底，其中該營養培養基具有在基底上凸起的平面生長區域（例如，約100-450微米的平整度），其中該營養培養基能夠維持在生長區域中的微生物的生長；和覆蓋營養培養基的薄膜（例如，無孔薄膜），其中該薄膜和該營養培養基具有從平面生長區域的邊緣向基底傾斜的周向區域，并且該薄膜具有開口以暴露出平面生長區域的一部分；配置用于放置在平面生長區域的暴露部分上的多孔膜；和與基底配合以遮蓋膜和營養培養基的蓋子。在另一個實施方案中，薄膜具有用于將膜放置到生長區域上的基準標志。在一個實施方案中，試劑盒也包括過濾裝置，例如WO 2007/038478中的裝置，WO 2007/038478通過引用并入此處。