[發明專利]一種用于超聲介導基因遞送的殼聚糖衍生物載體制備方法

在審

• 申請號: 201711221380.1
• 申請日: 2017-11-22
• 公開（公告）號: CN108079323A
• 公開（公告）日: 2018-05-29
• 發明（設計）人: 陳智毅;余金穗;嚴飛;鄭海榮
• 申請（專利權）人: 廣州醫科大學附屬第三醫院
• 主分類號: A61K49/22
• 分類號: A61K49/22;A61K47/36;A61K47/06;A61K48/00
• 代理公司: 廣東世紀專利事務所 44216
• 代理人: 劉卉

1.一種用于超聲介導基因遞送的殼聚糖衍生物載體制備方法，該載體由液態氟碳內核和殼聚糖衍生物外殼構成，所述殼聚糖衍生物外殼的材料為正己酰殼聚糖，其特征在于包括以下步驟：

（1）合成正己酰殼聚糖；

（2）配置正己酰殼聚糖水溶液；

（3）將液態氟碳滴加到正己酰殼聚糖水溶液中，進行超聲乳化處理，使液態氟碳被包裹在正己酰殼聚糖內，即得到由液態氟碳內核和殼聚糖衍生物外殼構成的納米級殼聚糖衍生物載體。

2.根據權利要求1所述用于超聲介導基因遞送的殼聚糖衍生物載體制備方法，其特征在于所述步驟（1）的具體操作方法如下：

（11）稱取500mg低分子殼聚糖，將其溶解于10ml純水后，加入10ml甲醇稀釋攪拌均勻；

（12）在快速磁力攪拌下逐滴加入0.66ml的正己酸酐, 并維持轉速在1000rpm的攪拌條件下反應24 h；

（13）用乙醇水溶液（25% ，v/v）透析12h，再用純水透析36h，冷凍干燥即得到改性后的殼聚糖衍生物——正己酰殼聚糖，并通過氫核磁波譜圖分析鑒定該產物。

3.根據權利要求1所述用于超聲介導基因遞送的殼聚糖衍生物載體制備方法，其特征在于所述步驟（2）的具體操作方法如下：

取正己酰殼聚糖20mg～50mg分散于10ml純水中溶解。

4.根據權利要求1所述用于超聲介導基因遞送的殼聚糖衍生物載體制備方法，其特征在于所述步驟（3）的具體操作方法如下：

（31）取正己酰殼聚糖水溶液，冰浴處理10min后，加入100ul～300ul液態氟碳；

（32）在冰浴條件下，對加入了液態氟碳的正己酰殼聚糖水溶液進行超聲乳化處理，即得到用于超聲介導基因遞送的殼聚糖衍生物載體，并將殼聚糖衍生物載體置于4℃冰箱中備用；所述超聲滿足如下條件：超聲振幅為30~40%，超聲總時間為2min，每次超聲啟動3s ，間歇時間1s。

5.根據權利要求1所述用于超聲介導基因遞送的殼聚糖衍生物載體制備方法，其特征在于：所述液態氟碳內核的材料為全氟戊烷。