[發明專利]一種旱地木槿種子無菌萌發與快速繁殖方法

有效

• 申請號: 201711191986.5
• 申請日: 2017-11-24
• 公開（公告）號: CN107896990B
• 公開（公告）日: 2020-04-21
• 發明（設計）人: 羅桂芬;陳高;孫衛邦
• 申請（專利權）人: 中國科學院昆明植物研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01C1/00;A01C1/08;A01G24/15;A01G24/12;A01G17/00
• 代理公司: 昆明協立知識產權代理事務所(普通合伙) 53108
• 代理人: 旃習涵

1.一種旱地木槿種子無菌萌發與快速繁殖的方法，其特征在于該方法包括外植體選擇與消毒、種子無菌萌發培養、增殖與繼代培養、壯苗與生根培養、瓶苗移栽步驟；

所述外植體選擇與消毒是取旱地木槿略泛黃的飽滿果實，用1％肥皂水浸泡10分鐘，經流水沖洗干凈后進行組培常規外植體消毒；

所述種子無菌萌發培養是：在種子無菌萌發培養基中暗培養7天后進行光照，光照強度為1000LUX，溫度為23～30℃，種子無菌萌發培養基為改良的MS培養基，將NH₄NO₃由1650mg/L減少為400mg/L，KNO₃由1900mg/L減少為450mg/L，不加其他有機物，其余元素不變，20天后，種子開始萌發；

所述的增殖與繼代培養是在增殖與繼代培養基中培養，增殖與繼代培養基為MS培養基+0.5mg/L 6-BA+0.5mg/L IAA+蔗糖30g/L+瓊脂5g/L，pH5.8，培養周期為30天；

所述的壯苗與生根培養是在壯苗與生根培養基中培養，壯苗與生根培養基為MS培養基+0.3mg/L NAA+0.3mg/L IAA+蔗糖30g/L+瓊脂5g/L，pH5.8，培養周期20天；

所述的瓶苗移栽是：將生根瓶苗提前一周置放于大棚煉苗，準備基質，基質為體積比的珍珠巖∶腐殖土∶生紅土＝1∶2∶3，用800倍多菌靈進行噴施拌土，用塑料膜密封消毒7天，調節pH至5.8，開瓶取苗，洗凈基部培養基，移栽，及時噴水并覆蓋塑料膜保濕，大棚溫度為20～30℃，空氣濕度50～60％，基質濕度75～85％。

2.根據權利要求1所述的旱地木槿種子無菌萌發與快速繁殖方法，其特征在于所述外植體選擇與消毒是取旱地木槿略泛黃的飽滿果實為外植體，用1％肥皂水浸泡10min，經流水沖洗干凈后，拿到超凈臺上，用75％的酒精消毒15min，無菌水沖洗3遍后，去掉果皮，取出種子，用0.1％升汞溶液進行表面消毒5min，無菌水清洗3～5次，接種于準備好的旱地木槿種子萌發培養基中，每瓶5粒。

3.根據權利要求1所述的旱地木槿種子無菌萌發與快速繁殖方法，其特征在于所述種子無菌萌發為全黑暗培養7天后進行人工輔助光誘導，光強度為1000LUX，溫度為23～30℃；增殖與繼代、壯苗與生根培養的光照條件為人工輔光1500LUX，溫度為23～30℃。

4.根據權利要求1所述旱地木槿種子無菌萌發與快速繁殖的方法，其特征在于生根瓶苗移栽前置于大棚煉苗適應一周后移栽在準備好的基質中。

5.根據權利要求1所述旱地木槿種子無菌萌發與快速繁殖的方法，其特征在于移栽基質為：體積比的珍珠巖∶腐殖土∶生紅土＝1∶2∶3，用800倍多菌靈進行噴施拌土，用塑料膜密封消毒7天，調節pH至5.8，開瓶取苗，洗凈基部培養基，移栽，及時噴水并覆蓋塑料膜，大棚溫度為20～30℃，遮光率75～85％，空氣濕度50～60％，基質濕度75～85％，30天后成活率95％以上。