[發明專利]一種從微藻中提取生物表面活性劑的方法

有效

• 申請號: 201711182101.5
• 申請日: 2017-11-23
• 公開（公告）號: CN108034679B
• 公開（公告）日: 2021-08-10
• 發明（設計）人: 陳慶國;李晶晶;鮑博;劉梅;穆軍
• 申請（專利權）人: 浙江海洋大學
• 主分類號: C12P1/00
• 分類號: C12P1/00;C12R1/89
• 代理公司: 杭州浙科專利事務所(普通合伙) 33213
• 代理人: 吳秉中

本發明公開了一種從微藻中提取生物表面活性劑的方法，包括：濃縮液制備、發酵、酶液制備、配制，選取溢油現場采集篩選出的小球藻經培養后濃縮，將擴大培養后的小球藻進行發酵，以超聲破碎儀破壁后提取酶液，將小球藻濃縮液與小球藻酶液混合后添加穩定劑即為生物表面活性劑。有益效果為：制備方法簡單易行，成本低廉，安全環保，不添加新的污染物質；從微藻中提取的生物表面活性劑，其表面張力、乳化活力、黏度等乳化指標較為穩定，同時生物表面活性劑具有低毒、環保、作用條件溫和、污染物降解徹底等優點，對石油的降解能力較強，其降解指數可以達到73.68?91.56%，是一種安全高效的生物表面活性劑。

技術領域

本發明涉及環境工程領域，尤其是涉及一種從微藻中提取生物表面活性劑的方法。

技術背景

目前市面上多應用于溢油的產品有溢油分散劑、化油劑、消油劑等，其主要成分有：陰離子表面活性劑為主的醚型、非離子的酯型、原料來自農副產品、微毒的濃縮型。較之目前的化學表面活性劑合成產品，生物表面活性劑體現出諸多更益于研究發展的優點。生物表面活性劑作為天然表面活性劑的一種，其分子結構具有嚴格的親水和疏水基團。它們不僅具備乳化分散油污及降低表面張力的功能，更有低毒、環保、作用條件溫和、污染物降解徹底、生產工藝簡單等優勢。

目前主要的生物表面活性劑為糖脂類，具體有：鼠李糖脂，槐糖脂，脂肽、脂蛋白，脂肽，短桿菌肽，多粘菌素，脂肪酸，中性脂肪和磷脂，磷脂質，多聚生物表面活性劑，多糖乳化劑，生物分散劑，甲殼素，聚酯肽鏈，其來源主要為細菌。

發明內容

本發明的目的在于提供一種從微藻中提取生物表面活性劑的方法，提取方法工藝簡單，安全環保，生物表面活性劑具有低毒、環保、作用條件溫和、污染物降解徹底的優點。

本發明針對背景技術中提到的問題，采取的技術方案為：一種從微藻中提取生物表面活性劑的方法，包括：濃縮液制備、發酵、酶液制備、配制，具體包括以下步驟：

濃縮液制備：取培養后的小球藻藻液1L，在0-4℃、3500-5000r/min條件下離心10-15分鐘，去掉所得上清液，留沉淀；將沉淀用緩沖液重懸浮，再于之前離心條件進行離心，重復3-4次；將藻液離心出的所有藻液進行合并，并用緩沖液稀釋，終體積為200-220mL，于0-4℃溫度下儲存備用；選取溢油現場采集篩選出的小球藻進行培養，經濃縮后其活性、生物降粘、石油烴降解等性能均得到大幅度提高；

發酵：發酵培養基組成及其含量為：葡萄糖38-40g/L、玉米漿粉6-8g/L、蛋白胨4-5g/L、NaCl 12.5-15.0g/L、(NH₄)₂SO₄ 1.65-1.70g/L、MgSO₄·7H₂O 2.2-2.5g/L、KCl 0.5-0.6g/L、KH₂PO₄ 0.5-0.6g/L、CaCl₂ 0.1-0.12g/L，121-122℃條件下進行高壓蒸汽滅菌15-30分鐘，按照3.5-5.0%接種經培養后的小球藻，在溫度為30-33℃、pH為6.9-7.2、攪拌速度為320-340r/min、通氣量0.65-0.85vvm條件下發酵培養時間為72-96小時得發酵液；小球藻在充足的氮源、碳源、微量元素等必須物質條件下，小球藻能夠迅速地恢復至活力巔峰的階段，從而其脫氫酶、氧化酶、過氧化酶、石油降解酶、石化酶等有機降解相關酶加速分泌，為提取酶液、降解石油烴做準備；