[發明專利]銹色棕櫚象甲特異性引物及快速分子檢測方法

有效

• 申請號: 201711173881.7
• 申請日: 2017-11-22
• 公開（公告）號: CN107904315B
• 公開（公告）日: 2021-01-15
• 發明（設計）人: 宗世祥;陶靜;駱有慶;任利利;閻偉
• 申請（專利權）人: 北京林業大學
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12Q1/686;C12N15/11
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君;陳征

1.銹色棕櫚象甲PCR鑒定用的特異性引物，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1-2，或SEQ ID NO.3-4所示。

2.銹色棕櫚象甲PCR鑒定用的特異性引物組合，其特征在于，含有2對特異性引物對，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1-2和SEQ ID NO.3-4所示。

3.權利要求1所述的特異性引物或權利要求2所述的特異性引物組合在鑒定銹色棕櫚象甲中的應用。

4.一種銹色棕櫚象甲的快速分子檢測方法，該方法以樣品總DNA為模板，利用權利要求1所述的特異性引物進行PCR擴增，擴增產物經瓊脂糖凝膠電泳判定結果，當以SEQ IDNO.1-2所示的引物進行PCR擴增時，若擴增產物為458bp，則待測樣品來自銹色棕櫚象甲；或當以SEQ ID NO.3-4所示的引物進行PCR擴增時，若擴增產物為454bp，則待測樣品來自銹色棕櫚象甲。

5.如權利要求4所述的方法，其特征在于，25μL PCR反應體系為：

6.如權利要求4所述的方法，其特征在于，PCR的反應條件為：94℃預變性2min；再經94℃變性30s，53℃退火45s，72℃延伸2min，30個循環；最后72℃延伸10min。

7.如權利要求4-6任一所述的方法，其特征在于，樣品總DNA來自銹色棕櫚象甲的去頭和鞘翅的成蟲，或者來自幼蟲的腹部組織。

8.一種銹色棕櫚象甲鑒定用試劑盒，其特征在于，含有權利要求1所述的特異性引物。

9.一種銹色棕櫚象甲鑒定用試劑盒，其特征在于，含有權利要求2所述的特異性引物組合。