[發明專利]重構的HDL配制劑

有效

• 申請號: 201711141045.0
• 申請日: 2013-10-31
• 公開（公告）號: CN108057023B
• 公開（公告）日: 2022-02-08
• 發明（設計）人: Y·武契察;G·L·沃倫
• 申請（專利權）人: 杰特有限公司
• 主分類號: A61K9/19
• 分類號: A61K9/19;A61K38/17;A61K47/10;A61K47/18;A61K47/26;A61P3/06;A61P3/10;A61P3/02;A61P9/10
• 代理公司: 中國貿促會專利商標事務所有限公司 11038
• 代理人: 王貴杰

本發明涉及重構的高密度脂蛋白(rHDL)配制劑，其包含載脂蛋白，脂質和凍干穩定劑。所述配制劑具有降低的腎毒性和良好的的長期穩定性，特別是呈凍干形式的配制劑。

本申請是申請號為201380057007.0、申請日為2013年10月31日、發明名稱為“重構的HDL配制劑”的中國專利申請的分案申請。

技術領域

本發明涉及重構的高密度脂蛋白配制劑，尤其涉及具有適宜的穩定性和藥物用途的生物學特性的配制劑。

背景技術

高密度脂蛋白(HDLs)構成一系列存在于普通血清的脂蛋白顆粒。成熟HDL顆粒以含有蛋白質和脂質的球狀結構形式存在。這些顆粒的外層中是更具極性的脂質、磷脂和游離膽固醇，全部具有向外指向含水環境的帶電基團。更疏水的脂質比如酯化的膽固醇和甘油三酯位于顆粒的核心。新形成的或初生的HDL顆粒缺少脂質從而呈盤狀。蛋白質組分包埋在外層中。主要蛋白質組分是具有較少量的Apo A-II，Apo A-IV，Apo CIII，Apo D，Apo E和Apo J的載脂蛋白A-I(Apo A-I)。各種其它蛋白質位于HDL顆粒上，比如卵磷脂-膽固醇乙酰基轉移酶，PAF乙酰基水解酶和對氧磷酶。HDLs的特征是高密度(1.063g/ml)和小尺寸(Stoke直徑＝5至17nm)。

已經努力開發人工HDLs，其能夠輸注入患者血流中以模擬天然HDLs的生物學效果。這些人工顆粒一般稱為重構的HDL(rHDL)，或有時稱為HDL模擬物或合成的HDL顆粒。人工顆粒含有天然顆粒組分，尤其是Apo A-I和脂質。例如，WO 2012/000048描述包含ApoA-I，磷脂酰膽堿(PC)和少量膽酸鈉的rHDL。WO 2012/109162描述包含Apo A-I，鞘磷脂(SM)和磷脂酰甘油(例如1,2-二棕櫚酰基-sn-甘油-3-[磷酸-rac-(l-甘油)](DPPG))的rHDL。

方便的是在使用前凍干(冷凍-干燥)rHDL配制劑。凍干是制備固體蛋白質藥物所通常使用的方法。然而，該過程產生各種冷凍和干燥壓力，比如溶劑化蛋白質的濃度，形成冰晶體，pH變化等。全部這些壓力能夠以不同程度使蛋白質變性。從而，在蛋白質配制劑中常常需要穩定劑來保護在冷凍和干燥過程期間的蛋白質穩定性。為了保持rHDL配制劑在凍干期間的穩定性，已使用穩定劑如糖類和糖醇。例如，US 5,089,602公開血漿衍生的脂蛋白，其用10％蔗糖或10％蔗糖和5％甘露醇的混合物穩定化。WO 2012/000048公開糖和糖醇穩定劑，以約65至85g/L rHDL配制劑(相當于約6.5至8.5％w/w)的濃度使用。WO 2012/109162公開作為穩定劑的蔗糖和甘露醇，分別以4％w/w和2％w/w用于混合物中。Kim等人，Biotechnology and Bioprocess Engineering 16，785-792(2011)調查了rHDL的制備和放置穩定性。其中，Apo A-I:大豆PC比率1:150的rHDL并不能被1或5％蔗糖充分地穩定化，而10％蔗糖被描述為最佳。

這些文獻的rHDL配制劑期望用于輸注療法，但是輸注產品中的高糖濃度可以導致或惡化腎問題。在rHDL的靶標患者群體這是特別的問題，原因在于這些患者常常有腎損傷。

因此本發明的目的是，提供與這些先前的配制劑相比備擇或改善的rHDL配制劑。尤其是，發明人尋求具有降低的腎毒性的穩定的rHDL配制劑。

該問題通過根據權利要求1的配制劑得以解決。進一步優選實施方式定義在從屬權利要求中。

令人驚訝地，已發現權利要求1的rHDL配制劑顯示良好的長期穩定性。通過含有比先前配制劑更少的凍干穩定劑，本申請配制劑也具有更低的腎毒性風險。低凍干穩定劑濃度還可以允許rHDL在rHDL功能的功能測試表現更佳。發明人還已發現氨基酸、特別是脯氨酸是有用的rHDL配制劑凍干穩定劑。

發明概要

本發明提供rHDL配制劑，其包含載脂蛋白、脂質和凍干穩定劑，其中載脂蛋白與脂質的比率是約1:20至約1:120(mol:mol)。