[發明專利]黃精實體小分子肽的提取工藝

在審

• 申請號: 201711139537.6
• 申請日: 2017-11-16
• 公開（公告）號: CN108034682A
• 公開（公告）日: 2018-05-15
• 發明（設計）人: 周艷初
• 申請（專利權）人: 金華市艾力生物科技有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/34
• 代理公司: 北京華仲龍騰專利代理事務所(普通合伙) 11548
• 代理人: 李靜

本發明公開了黃精實體小分子肽的提取工藝,包括：脫脂、初次酶解、二次酶解、純化，將黃精實體粉碎后以超臨界CO2萃取脫脂，將脫脂粉先后經復合堿性蛋白酶、胃蛋白酶酶解，最后經超濾后得黃精實體小分子肽。有益效果為：雙頻率復合超聲與微波輻射交替間隔輔助酶解不僅可以為酶解體系提供能量，而且有助于打散團聚的分子團，同時為酶與蛋白提供更多的碰撞幾率，提高酶解效率，降低酶解時間，節約時間成本；在酶解反應中程添加的（S）?1?氨基?2?羥甲基二氫吲哚的聚合產物可以與胃蛋白酶產生親電作用，防止胃蛋白酶蛋白質結構發生變化，從而防止其活性的減低。

技術領域

本發明涉及小肽提取領域，尤其是涉及黃精實體小分子肽的提取工藝。

技術背景

黃精（學名：Polygonatum sibiricum），又名：雞頭黃精、黃雞菜、筆管菜、爪子參、老虎姜、雞爪參。為黃精屬植物，根莖橫走，圓柱狀，結節膨大。葉輪生，無柄。藥用植物，具有補脾，潤肺生津的作用。根狀莖圓柱狀，由于結節膨大，因此“節間”一頭粗、一頭細，在粗的一頭有短分枝（中藥志稱這種根狀莖類型所制成的藥材為雞頭黃精），直徑1-2厘米。莖高50-90厘米，或可達1米以上，有時呈攀援狀。葉輪生，每輪4-6枚，條狀披針形，長8-15厘米，寬6-16毫米，先端拳卷或彎曲成鉤。

一般春、秋兩季采收，以秋季采收質量好，栽培3-4年秋季地上部枯萎后采收，挖取根莖，除去地上部分及須根，洗去泥土，置蒸籠內蒸至呈現油潤時，取出曬干或烘干，或置水中煮沸后，撈出曬干或烘干。黃精根莖實體臨床上具有治療肺結核、癬菌病的功效，同時還具有抗病源微生物、抗疲勞、降血糖、抗氧化、延緩衰老、止血、抗病毒等功效，食藥同源，具有較高的醫療價值。

關于黃精實體小分子肽的制備技術有很多方法，現有技術如申請公布號為

CN 105821105 A的中國發明專利，公開了黃精實體小分子肽的提取工藝，該發明方法首選將黃精細粉加水高溫保溫預處理，然后先后經過堿性蛋白酶、中性蛋白酶、酸性蛋白酶酶解，最后將酶解液經過濾濃縮干燥后得黃精實體小分子肽，具有酶解效果好、純度高的優點，但是該發明方法未經脫脂即行酶解，不僅浪費了黃精實體中的油脂資源，而且增加了小分子肽的提純難度，同時該發明方法中酶解時間太長，增加了時間成本。

發明內容

本發明的目的在于提供黃精實體小分子肽的提取工藝，本提取工藝操作簡單、耗時較短，可以分離出油脂，實現了黃精實體的全效利用。

本發明針對背景技術中提到的問題，采取的技術方案為：黃精實體小分子肽的提取工藝，包括：脫脂、初次酶解、二次酶解、純化，具體包括以下步驟：

脫脂：取無變質、無病蟲、干凈健康的黃精實體，清洗干凈后烘干，粉碎后過100-120目篩，將黃精粉置于超臨界CO2萃取釜中，在萃取溫度為45-47℃、萃取壓力為33-35MPa、CO2流量為22-24L/h的條件下萃取2.5-3.0小時，萃取結束后從釜中出粕，經粉碎、篩分、干燥，即獲得黃精脫脂粉；萃取過程中可以回收黃精油脂，實現黃精的完全綜合利用，提升了產業的科技含量，增加了經濟效益；

初次酶解：按照料液比1:15-16將黃精脫脂粉溶于蒸餾水中，調節溫度為38-40℃、pH為8.0-8.2，加入2500-3000U/g復合堿性蛋白酶，水解30-45分鐘后水浴滅酶；以復合堿性蛋白酶酶解將黃精中的大蛋白酶解為蛋白片段，露出更多的活性位點，為進一步的徹底酶解做好準備；