[發(fā)明專利]一種基于表面增強(qiáng)拉曼光譜的乙酰膽堿檢測方法

有效

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• 申請日: 2017-11-16
• 公開（公告）號: CN107884386B
• 公開（公告）日: 2020-02-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王著元;李浪;宗慎飛;崔一平
• 申請（專利權(quán)）人: 東南大學(xué)
• 主分類號: G01N21/65
• 分類號: G01N21/65
• 代理公司: 南京蘇高專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙) 32204
• 代理人: 柏尚春

1.一種基于表面增強(qiáng)拉曼光譜的乙酰膽堿檢測方法，其特征在于：該方法包括以下步驟：

1)利用金屬納米材料制備表面增強(qiáng)拉曼散射襯底：利用聚合物分子對玻璃基底或硅基底表面進(jìn)行改性，使玻璃基底或硅基底表面電性與金屬納米材料所帶電荷電性相反，從而利用靜電作用將金屬納米材料吸附在玻璃基底或硅基底表面，形成表面增強(qiáng)拉曼散射襯底；

2)將乙酰膽堿和有機(jī)分子溶液加至表面增強(qiáng)拉曼散射襯底表面進(jìn)行反應(yīng)，且乙酰膽堿與所述有機(jī)分子競爭性吸附于表面增強(qiáng)拉曼散射襯底表面；

3)檢測表面增強(qiáng)拉曼散射襯底表面上有機(jī)分子的拉曼光譜，根據(jù)乙酰膽堿濃度和有機(jī)分子表面增強(qiáng)拉曼光譜之間的校準(zhǔn)曲線，實(shí)現(xiàn)對乙酰膽堿的定量檢測；

其中：步驟1)所述的利用金屬納米材料制備表面增強(qiáng)拉曼散射襯底的具體步驟如下：

①當(dāng)金屬納米材料表面帶負(fù)電荷時，將清洗吹干的玻璃基底或硅基底與0.02wt％以上的聚二烯丙基二甲基氯化銨、3-氨丙基三乙氧基硅烷或3-氨丙基三甲氧基硅烷水溶液反應(yīng)30min以上，清洗殘余的反應(yīng)溶液后將該玻璃基底或硅基底與金屬納米溶液反應(yīng)30分鐘以上，去除殘余金屬納米溶液得到表面增強(qiáng)拉曼散射襯底；

②當(dāng)金屬納米材料表面帶正電荷時，將清洗吹干的玻璃基底或硅基底先與0.02wt％以上的聚二烯丙基二甲基氯化銨、3-氨丙基三乙氧基硅烷或3-氨丙基三甲氧基硅烷水溶液反應(yīng)30min以上，之后再與0.02wt％以上的聚丙烯酸鈉或聚苯乙烯磺酸鈉水溶液反應(yīng)30min以上，清洗殘余的反應(yīng)溶液后將該玻璃基底或硅基底與金屬納米溶液反應(yīng)30min以上，去除殘余金屬納米溶液得到表面增強(qiáng)拉曼散射襯底。

2.如權(quán)利要求1所述的一種基于表面增強(qiáng)拉曼光譜的乙酰膽堿檢測方法，其特征在于：所述的清洗吹干的玻璃基底或硅基底是指經(jīng)過食人魚溶液清洗1h以上并經(jīng)氮?dú)獯蹈傻牟ＡЩ谆蚬杌住?/p>

3.如權(quán)利要求1所述的一種基于表面增強(qiáng)拉曼光譜的乙酰膽堿檢測方法，其特征在于：步驟3)所述的乙酰膽堿濃度和有機(jī)分子表面增強(qiáng)拉曼光譜之間的校準(zhǔn)曲線繪制過程如下：保持有機(jī)分子濃度不變，改變乙酰膽堿濃度，檢測有機(jī)分子的表面增強(qiáng)拉曼光譜強(qiáng)度，根據(jù)檢測到的有機(jī)分子的表面增強(qiáng)拉曼光譜強(qiáng)度和所用的乙酰膽堿濃度之間的對應(yīng)關(guān)系，建立乙酰膽堿濃度和有機(jī)分子表面增強(qiáng)拉曼光譜之間的校準(zhǔn)曲線。

4.如權(quán)利要求1所述的一種基于表面增強(qiáng)拉曼光譜的乙酰膽堿檢測方法，其特征在于：所述的金屬納米材料為金納米材料、銀納米材料。

5.如權(quán)利要求1所述的一種基于表面增強(qiáng)拉曼光譜的乙酰膽堿檢測方法，其特征在于：所述的表面增強(qiáng)拉曼散射襯底具有粗糙金屬表面，能夠吸附乙酰膽堿和與乙酰膽堿具有競爭性吸附作用的有機(jī)分子，并產(chǎn)生表面增強(qiáng)拉曼散射效應(yīng)。

6.如權(quán)利要求1所述的一種基于表面增強(qiáng)拉曼光譜的乙酰膽堿檢測方法，其特征在于：所述的有機(jī)分子為括羅丹明6G、羅丹明B、結(jié)晶紫、尼羅藍(lán)、亞甲基藍(lán)或中性紅中的一種。

7.如權(quán)利要求1所述的一種基于表面增強(qiáng)拉曼光譜的乙酰膽堿檢測方法，其特征在于：所述的有機(jī)分子的濃度為10nM以上。

8.如權(quán)利要求1所述的一種基于表面增強(qiáng)拉曼光譜的乙酰膽堿檢測方法，其特征在于：所述的將乙酰膽堿和有機(jī)分子溶液加至表面增強(qiáng)拉曼散射襯底表面進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)時長為10min～120min。

9.如權(quán)利要求1所述的一種基于表面增強(qiáng)拉曼光譜的乙酰膽堿檢測方法，其特征在于：步驟3)所述的檢測表面增強(qiáng)拉曼散射襯底表面上有機(jī)分子的拉曼光譜，所用儀器為拉曼光譜儀。