[發明專利]一種快速預凍凍干試劑的方法

有效

• 申請號: 201711129854.X
• 申請日: 2017-11-15
• 公開（公告）號: CN107630078B
• 公開（公告）日: 2021-08-03
• 發明（設計）人: 肖李亞;高利飛;魯清月;胡偉鋒;李進福;高歌;秦明明;李振紅;付光宇;吳學煒;苗擁軍
• 申請（專利權）人: 鄭州安圖生物工程股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/686
• 分類號: C12Q1/686
• 代理公司: 鄭州異開專利事務所(普通合伙) 41114
• 代理人: 王霞

本發明公開了一種快速預凍凍干試劑的方法，首先準備預凍板，在預凍板上表面均布多個底部呈半球形結構的凹坑；在凹坑的內表面涂有疏水材料層；預凍時首先將配制好的液態試劑依次加入預凍板的各凹坑內，由于凹坑內表面疏水材料層的作用，液體試劑呈現出球形液滴；然后將預凍板浸入液氮中，保持液氮液面不能沒過預凍板上表面，冷凍保存2~5分鐘后，直接將凝固的球形預凍試劑收集起來放入凍干機中進行真空冷凍干燥。本發明方法簡單實用，試劑預凍速度快、時間短；預凍時試劑與液氮不接觸，保證了試劑的潔凈度；預凍試劑呈球形，大大增加了凍干試劑升華表面積，縮短了后續凍干過程；預凍試劑可以收集后批量進行凍干，極大的增加了凍干試劑的產量。

技術領域

本發明涉及分子生物學試驗用試劑，尤其是涉及一種快速預凍凍干試劑的方法。

背景技術

凍干型試劑指的是使用凍干方法制備的試劑，一般用于含有不耐高溫的活性物質的試劑。凍干試劑一般采用冷凍干燥技術進行制備，就是將含有大量水分的物質（包括蛋白質、核苷酸、微生物等多種成分）預先進行降溫預凍成固體，然后在真空條件下使固態水直接升華出來，而物質本身則剩留在凍結時的冰架中，因此干燥后試劑的體積不變；由于整個干燥過程都是在較低的溫度下進行，所以對許多熱敏性的物質特別適用。試劑凍干后排出95%的水分，而蛋白質、核苷酸、微生物之類不會發生變性或者失去生物活性，干燥后的產品能夠常溫保存而不致變質，因此冷凍干躁技術在醫藥和醫療診斷上得到廣泛應用。

試劑在凍干過程中，預凍是必須的步驟，而預凍的時間對試劑中活性材料的活性保存是非常關鍵的，所以盡量縮短預凍時間，實現快速預凍對凍干產品活性材料的活性保存至關重要；另外增大凍干過程中凍干試劑的升華表面積，縮短凍干過程時間，對凍干產品的質量至關重要。

中國發明專利申請一種《PCR擴增凍干預存試劑及其制備方法》（CN 107177685A）就公開了一種PCR擴增凍干預存試劑制備方法，凍干試劑制備方法包括含凍干保護劑的PCR體系預混，在冷凍干燥機種預凍3-5小時，然后進行冷凍干燥程序。顯然，這種凍干預存試劑預凍的時間較長，得到的凍干試劑的質量并不盡如人意。

發明內容

本發明的目的在于提供一種快速預凍凍干試劑的方法，以進一步縮短凍干時間，滿足試劑中活性材料的活性保存。

為實現上述目的，本發明可采取下述技術方案：

本發明所述的快速預凍凍干試劑的方法，首先需要準備預凍板，在所述預凍板上表面均布有多個底部呈半球形結構的凹坑，所述凹坑的容積為10~200ul；在所述凹坑的內表面涂有疏水材料層；其預凍步驟包括：

第一步，將配制好的液態試劑依次加入預凍板的各凹坑內，由于凹坑內表面疏水材料層的作用，液體試劑呈現出球形液滴；

第二步，將預凍板浸入液氮中，保持液氮液面不能沒過預凍板上表面，冷凍保存2~5分鐘后，直接將凝固的球形預凍試劑收集起來放入凍干機中進行真空冷凍干燥。

本發明的優點在于方法簡單實用，試劑預凍速度快、時間短；預凍時試劑與液氮不接觸，保證了試劑的潔凈度；預凍試劑呈球形，大大增加了凍干試劑升華表面積，縮短了后續凍干過程；預凍試劑可以收集后批量進行凍干，極大的增加了凍干試劑的產量。

附圖說明

圖1是本發明所用的預凍板結構示意圖。

圖2是圖1的剖視圖。

圖3是預凍后試劑收集盒。

圖4是凍干后的PCR試劑。

圖5是對凍干后的PCR試劑37℃加速穩定性驗證。

圖6是對液態PCR試劑37℃加速穩定性驗證。

具體實施方式