[發明專利]一種藏紅花球莖玻璃化液氮低溫保存方法

在審

• 申請號: 201711113358.5
• 申請日: 2017-11-11
• 公開（公告）號: CN109769800A
• 公開（公告）日: 2019-05-21
• 發明（設計）人: 唐文明
• 申請（專利權）人: 四川海盛杰低溫科技有限公司
• 主分類號: A01N3/00
• 分類號: A01N3/00
• 代理公司: 成都弘毅天承知識產權代理有限公司 51230
• 代理人: 李小金;王正楠

1.一種藏紅花球莖玻璃化液氮低溫保存方法，其特征在于，包括如下步驟：

[1]種源準備：選出生長良好的球莖，將選出的球莖用清水洗凈，殺菌，在陰暗通風處攤開晾干；

[2]預培養：將經過步驟[1]處理的球莖接種到預培養基中，培養10天，培養溫度為26-30℃；

[3]裝載：在室溫下用50％的玻璃化溶液處理經步驟[2]培養后的球莖2-2.5小時；

[4]脫水及凍存：將經過步驟[3]處理的球莖脫水處理后，在0℃下用50％玻璃化溶液處理10分鐘，然后更換玻璃化溶液，放入液氮中保存。

2.按照權利要求1所述的一種藏紅花球莖玻璃化液氮低溫保存方法，其特征在于：步驟[1]選用的球莖為利用植物組織培養生產的無損傷的藏紅花球莖，所述球莖的重量≥5g。

3.按照權利要求1所述的一種藏紅花球莖玻璃化液氮低溫保存方法，其特征在于：步驟[1]所述殺菌過程為用配制好的質量百分比濃度為0.08％的高錳酸鉀殺菌溶液浸沒球莖25分鐘，然后清水洗去表面殘留殺菌液。

4.按照權利要求1所述的一種藏紅花球莖玻璃化液氮低溫保存方法，其特征在于：步驟[2]所述培養基為改良MS培養基中添加2，4-二氯苯氧乙酸2.5mg/L、6-糠氨基嘌呤1.5mg/L、萘乙酸2.5mg/L、植物凝膠2.5g/L、蔗糖65g/L。

5.按照權利要求1至4任一項所述的一種藏紅花球莖玻璃化液氮低溫保存方法，其特征在于：步驟[3]及步驟[4]所述玻璃化溶液為含有500g/L丙三醇，100g/L乙二醇，250g/L二甲基亞砜，0.6mol/L蔗糖和0.5g/L石墨烯量子點的MS培養液。