[發(fā)明專利]植物轉(zhuǎn)基因鑒別裝置及方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711099077.9
• 申請日: 2017-11-09
• 公開（公告）號(hào): CN107904157A
• 公開（公告）日: 2018-04-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 樊璠
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇嘉特朗達(dá)環(huán)?？萍加邢薰?/a>
• 主分類號(hào): C12M1/34
• 分類號(hào): C12M1/34;C12M1/00;C12Q1/6816
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.植物轉(zhuǎn)基因鑒別裝置，其特征在于：包括發(fā)泡載板，所述發(fā)泡載板上表面和下表面均設(shè)置有指槽，所述發(fā)泡載板上表面設(shè)置有嵌入槽，所述嵌入槽內(nèi)設(shè)置有正電荷薄膜，所述嵌入槽的槽壁上鑲嵌有連接鏈母鏈，所述正電荷薄膜的邊沿上均設(shè)置有翻邊形成槽狀，所述翻邊上均設(shè)置有與連接鏈母鏈相配對的連接鏈子鏈，所述正電荷薄膜上設(shè)置有儲(chǔ)物槽，所述儲(chǔ)物槽呈矩形陣列分布，所述儲(chǔ)物槽內(nèi)設(shè)置有外源基因探針，所述發(fā)泡載板上設(shè)置有用于蓋住嵌入槽的護(hù)罩，所述護(hù)罩為透明設(shè)置，所述護(hù)罩上設(shè)置有插入部，所述發(fā)泡載板上設(shè)置有與插入部相契合的插入孔，所述插入孔為通孔，所述插入部插入插入孔內(nèi)，所述發(fā)泡載板和護(hù)罩通過插入部和插入孔可拆卸連接，所述發(fā)泡載板由按重量份數(shù)配比的綠碳化硅15-17份、碳纖維絲44-48份、玻璃纖維絲57-75份、空心玻璃微珠5-11份、銅纖維15-20份、萜烯樹脂18-28份、松香90-133份、柯巴樹脂44-53份、硬脂酸鈉1-4份、酒石酸1-3份、氣相白炭黑13-15份、阿拉伯膠19-23份和碳酸氫鈉6-9份組成,所述連接鏈母鏈和連接鏈子鏈分別為PE雙牙密封鏈母鏈和PE雙牙密封鏈子鏈,所述外源基因探針為35S啟動(dòng)子或FMV35S啟動(dòng)子或Nos終止子或NPTII基因或CryI(AC)基因或Cry9c基因或改造的CP4-EPSPS基因或35s-CTP2或CP4-EPSPS基因或GOX基因或Bar基因或Barnase基因或Barstar基因或CryIA(a)基因中的一種或多種。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的植物轉(zhuǎn)基因鑒別裝置，其特征在于：所述插入孔的孔壁上設(shè)置有橡膠墊，所述橡膠墊與插入孔的孔壁粘合，所述橡膠墊設(shè)置有一個(gè)以上，所述橡膠墊呈環(huán)形陣列分布。

3.植物轉(zhuǎn)基因鑒方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)將35S啟動(dòng)子、FMV35S啟動(dòng)子、Nos終止子、NPTII基因、CryI(AC)基因、Cry9c基因、改造的CP4-EPSPS基因、35s-CTP2、CP4-EPSPS基因、GOX基因、Bar基因、Barnase基因、Barstar基因、CryIA(a)基因進(jìn)行點(diǎn)制處理，點(diǎn)入儲(chǔ)物槽內(nèi)，制得外源基因探針。

2)將5μg聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增產(chǎn)物用于100℃的純水煮5min進(jìn)行變性后，直接放入冰上冷卻3-5min，制得預(yù)雜交液以備外源基因探針雜交用；將外源基因探針用0.25M的磷酸緩沖液進(jìn)行潤濕后，往外源基因探針加入預(yù)雜交液在60℃進(jìn)行預(yù)雜交10-12小時(shí)，用洗膜液洗滌2次，每次20min；然后進(jìn)行染色5-10min；用TE緩沖液漂洗5-10min，重復(fù)2次；在254nm紫外光下或熒光顯微鏡下進(jìn)行信號(hào)檢測，得出結(jié)果。