[發明專利]一種測定雪膽中3種活性成分的HPLC方法

有效

• 申請號: 201711056888.0
• 申請日: 2017-10-27
• 公開（公告）號: CN107807190B
• 公開（公告）日: 2021-02-23
• 發明（設計）人: 張利;楊程;姜媛媛;吳一超;胡青青;朱柏雨;周永紅;王曉麗;楊瑞武;丁春邦;茍麗瓊;佘啟惠;吳忠旺
• 申請（專利權）人: 四川農業大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 成都高遠知識產權代理事務所(普通合伙) 51222
• 代理人: 張娟;劉華玲

本發明提供了一種測定雪膽中3種活性成分的HPLC方法，所述活性成分為雪膽甲素、雪膽乙素和齊墩果酸，包括如下操作步驟：a、取待檢雪膽粉末，以乙醇提取，過濾，制備供試品溶液；b、取雪膽甲素、雪膽乙素、齊墩果酸對照品，混合，加乙醇溶解，制備對照品溶液；c、分別將供試品溶液、對照品溶液注入高效液相色譜儀檢測；d、根據檢測結果計算得到雪膽中的3種成分含量。本發明方法可以同時測定雪膽乙素、雪膽甲素和齊墩果酸這3種成分，方法高效準確且重現性良好，為雪膽的系統評價和質量控制提供依據，可更全面地保障雪膽藥材的質量。

技術領域

本發明屬于化學分析技術領域，具體涉及一種測定雪膽中3種活性成分的HPLC方法。

背景技術

雪膽屬(Hemsleya)植物為葫蘆科(Cucurbitaceae)多年生攀援草本植物，《中國植物志》記載該屬植物共31種10變種，主要分布于我國西南至中南部地區，其中云南、貴州、四川三省份擁有全屬植物的92％。該屬多種植物的干燥塊根可供藥用，是我國西南地區各民族常用的中草藥、民族藥，具有清熱解毒、抗菌消炎的功效，廣泛用于治療菌痢、潰瘍病、肺炎、支氣管炎、腸炎及其他多種感染，具有用量少、效果明顯、無依賴性等優點，也被初步判斷為可替代抗生素的藥品。

雪膽屬植物因產地、物種等因素的差異，致使其所含的化學成分和含量也不盡相同，不同的標準中所收載的雪膽屬植物不盡相同，導致藥材來源混亂，質量參差不齊。《新華本草綱要》收載的雪膽屬植物有曲蓮(H.amabilis)、雪膽(H.chinensis)和羅鍋底(H.macrosperma)。《四川省中藥材標準》收載的雪膽屬植物有長果雪膽(H.dolichocarpa)、峨眉雪膽(H.omeiensis) 和巨花雪膽(H.gigantha)。《貴州省中藥材、民族藥材質量標準》(2003 年版)中收載的雪膽屬植物有蛇蓮(H.sphaerocarpa)和中華雪膽(H. chinensis)。目前主要從水分、總灰分和浸出物等方面評價雪膽藥材的品質，該方法不能全面真實地體現被控藥材的品質。

現代研究表明，雪膽屬植物的主要活性成分為雪膽乙素、雪膽甲素和齊墩果酸等，然而，目前關于雪膽質量控制的報道多測定其中1類成分。例如何效平等，高效液相色譜法測定雪膽中雪膽甲素的含量，川北醫學院學報， 2007，264-266，用HPLC方法只測定了雪膽塊根中雪膽甲素的含量。

秦小東等,高效液相色譜-蒸發光散射法測定不同產地雪膽中齊墩果酸的含量，中國臨床藥理學雜志，2017,33,1582-1584，用HPLC方法只只測定了雪膽中齊墩果酸的含量。尚未見用高效液相色譜法同時測定雪膽中3種活性成分的報道。

發明內容

針對上述問題，本發明的目的是同時提供一種同時測定雪膽中三種活性成分的HPLC方法，以進一步完善雪膽的質量控制標準。

本發明提供了一種測定雪膽中3種活性成分的HPLC方法，所述活性成分為雪膽甲素、雪膽乙素和齊墩果酸，包括如下操作步驟：

a、取待檢雪膽粉末，以乙醇提取，過濾，制備供試品溶液；

b、取雪膽甲素、雪膽乙素、齊墩果酸對照品，混合，加乙醇溶解，制備對照品溶液；

c、分別將供試品溶液、對照品溶液注入高效液相色譜儀檢測，色譜條件如下：

色譜柱：C₁₈色譜柱；

流動相：流動相A為體積分數為0.1％的磷酸水溶液，B為乙腈，梯度洗脫程序為：

0～20min，5％～20％B；

20～60min，20％～30％B；

60～95min，30％～90％B；

95～100min，90％B；

檢測波長：203nm；