[發明專利]一種箭葉淫羊藿與天平山淫羊藿的分子鑒定方法在審
| 申請號: | 201711054789.9 | 申請日: | 2017-11-01 |
| 公開(公告)號: | CN107619876A | 公開(公告)日: | 2018-01-23 |
| 發明(設計)人: | 龐曉慧;郭夢月;任莉;宋經元;陳士林 | 申請(專利權)人: | 中國醫學科學院藥用植物研究所 |
| 主分類號: | C12Q1/6895 | 分類號: | C12Q1/6895 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 100193 北京市海*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 淫羊藿 天平 分子 鑒定 方法 | ||
1.一種用于箭葉淫羊藿與天平山淫羊藿的分子鑒定方法,包括PCR擴增葉綠體psbA-trnH序列。
2.根據權利要求1所述的方法,包括以下步驟:
1)提取樣品DNA;
2)PCR擴增葉綠體psbA-trnH序列的片段;
3)對擴增產物進行拼接,獲得葉綠體psbA-trnH序列;
4)基于K2P模型,構建測序拼接后的psbA-trnH序列的系統發育樹。
3.根據權利要求2所述的方法,其特征在于,所述樣品為箭葉淫羊藿與天平山淫羊藿。
4.根據權利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述PCR擴增的引物為:
正向引物PA:5′-GTTATGCATGAACGTAATGCTC-3′;
反向引物TH:5′-CGCGCATGGTGGATTCACAATCC-3′。
5.根據權利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述PCR擴增的體系為每25μL:2×Taq PCR Mix 12.5μL,2.5μmol/L引物各1μL,DNA模板2μL(約30ng),ddH2O 8.5μL。
6.根據權利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述PCR擴增的條件為94℃變性1min,55℃退火1min,72℃延伸1.5min,30個循環。
7.權利要求1-6任一項所述方法在鑒別箭葉淫羊藿與天平山淫羊藿的應用。
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