[發明專利]一種用于診斷原發性肝癌的特異性生物標志物及其篩選方法與應用在審
| 申請號： | 201711047991.9 | 申請日： | 2017-10-31 |
| 公開（公告）號： | CN107663541A | 公開（公告）日： | 2018-02-06 |
| 發明（設計）人： | 申志發;季敬璋;涂可欣;楊麗虹;童慶超;葉相來;閆相楠 | 申請（專利權）人： | 溫州醫科大學 |
| 主分類號： | C12Q1/6886 | 分類號： | C12Q1/6886;C12N15/113 |
| 代理公司： | 溫州金甌專利事務所(普通合伙)33237 | 代理人： | 黃肇平 |
| 地址： | 325000 浙江省溫州市*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 用于 診斷 原發性 肝癌 特異性 生物 標志 及其 篩選 方法 應用 | ||
1.一種用于診斷原發性肝癌的特異性生物標志物，其特征在于，所述的特異性生物標志物為miRNA hsa-let-7a-5p。
2.一種權利要求1所述的用于診斷原發性肝癌的特異性生物標志物的篩選方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)從已建成的細胞模型中分離細胞突出和細胞體；
(2) 從分離的細胞突出和細胞體中分別提取 RNA；
(3)在前期miR-SEQ測序結果內篩選本體表達高且差異倍數大的候選miRNAs；
(4)收集HCC患者組織、血漿樣本及臨床資料，提取miRNA；
(5) 將抽提的 miRNA 逆轉錄為 cDNA；
(6) 進一步用實時熒光定量PCR分析方法對正常人和HCC患者進行逐個驗證篩選，并對篩選出具有監測肝細胞性肝癌轉移性的特異性生物標志物的miRNA并對臨床價值進行評估 。
3.一種檢測原發性肝細胞性肝癌的試劑盒，其特征在于，所述的試劑盒包括有診斷特異性生物標志物hsa-let-7a-5p的試劑。
4.根據權利要求3所述的一種檢測原發性肝癌的試劑盒，其特征在于，所述的診斷生物標志物hsa-let-7a-5p的試劑包含一對特異性引物，引物序列為：
F Primer: CGATTCAGTGAGGTAGTAGGTTGT；
R Primer: TATGGTTTTGACGACTGTGTGAT。
5.一種權利要求1所述的特異性生物標志物hsa-let-7a-5p在作為肝細胞性肝癌檢驗指標上的應用。
6.一種權利要求1所述的特異性生物標志物hsa-let-7a-5p聯用腫瘤生物標志物AFP、CEA在作為肝細胞性肝癌轉移性指標上應用。
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