[發明專利]一種分子調控電致化學發光光譜的方法

有效

• 申請號: 201711040890.9
• 申請日: 2017-10-30
• 公開（公告）號: CN107870169B
• 公開（公告）日: 2020-10-30
• 發明（設計）人: 吳婉婉;馬誠;朱俊杰
• 申請（專利權）人: 南京大學
• 主分類號: G01N21/76
• 分類號: G01N21/76;G01N21/64;G01N27/26
• 代理公司: 南京知識律師事務所 32207
• 代理人: 黃嘉棟

本發明公開一種分子調控電致化學發光光譜的方法，它是由ECL發光供體和熒光探針受體兩個部分構成，通過兩者之間的能量轉移，實現對ECL光譜的調控，并且通過加入一種物質破壞熒光探針受體，可以實現光譜移動的可逆變化，用于提供電致化學發光的發光團和具有熒光性能的檢測探針是均勻分散在電解液中。本發明可對三聯吡啶釕的ECL光譜進行調控。

技術領域

本發明涉及一種分子調控電致化學發光光譜的方法，并且這種調控具有可逆性。

背景技術

電致化學發光，又稱電化學發光，英文名稱Electrogeneratedchemiluminescence，或者Electrochemiluminescence，簡寫為ECL。電化學發光是化學發光與電化學相結合的產物，指通過施加一定的電壓引起電化學反應，在電極表面產生某種新物質，電生物質之間或電生物質與其他物質進一步反應，經過高能電子轉移，使電子躍遷至激發態，再返回基態時的發光現象[參見：(a)M.M.Richter，Chem.Rev.2004，104，3003]。早在上世紀二十年代，Harvey小組便發現電解過程時可以產生發光現象[參見：(b)N.Harvey，J.Phys.Chem.1929，33，1456]。但是直到六十年代中期，電化學發光才首次被詳細研究[參見：(c)D.M.Hercules，Science.1964，145，808.(d)R.E.Visco；E.A.Chandross，J.Am.Chem.Soc.1964，86，5350.(e)K.S.V.Santhanam；A.J.Bard，J.Am.Chem.Soc.1965，87，139.]。在隨后的幾十年直至今天，電化學發光已經發展成為一種非常強大的分析技術，廣泛應用于諸如免疫分析、食品安全分析和水污染測試等各種領域。隨著現代科技的飛速發展，分析檢測手段的不斷進步，檢測技術的不斷更新，電化學發光與其他技術比如流動注射分析，高效液相色譜，毛細管電泳，電化學石英微天平和微流控分析等的聯用，能達到良好的檢測效果。

相比于其他的發光檢測技術，電致化學發光具有許多優點，例如無需激發光源，能夠精確控制發光的時間與位置，具有較高的靈敏度。傳統的電致化學發光分析只能測量一種或幾種ECL發光團的強度，但是無法對ECL光譜進行調控，并且也不能實現可逆的調控。

發明內容

為了實現調控ECL光譜，本發明的目的是提供一種分子調控電致化學發光光譜的方法，并且這種調控具有可逆性。

本發明的技術方案如下：

一種分子調控電致化學發光光譜的方法，它是由ECL發光供體和熒光探針受體兩個部分構成，通過兩者之間的能量轉移，實現對ECL光譜的調控，并且通過加入一種物質破壞熒光探針受體，可以實現光譜移動的可逆變化，它包括如下步驟：

步驟1.取一塊ITO玻璃，放入42.5mm×12.5mm×12.5mm的透明電極池中，用鱷魚夾將ITO與電解池的一個側面貼合住，并將ITO導電面朝向光電倍增管；

步驟2.向電解池中加入1.5mL含有100μM三聯吡啶釕、40mM三丙胺和100mM磷酸鹽緩沖液(pH＝7.4)的電解液，將銀/氯化銀參比電極和鉑絲對電極也一同插入電解液中，將電化學工作站的三根引線分別夾到對應的電極上；

步驟3.同時觸發電化學工作站與光譜儀，調用電化學工作站的恒電位方法，設定恒電壓為1.4V，靈敏度為10^-4A，光譜儀的出射狹縫為20nm，掃描速度為1200nm/分鐘，掃描范圍為400nm-800nm，光電倍增管高壓設為700V；

步驟4.按照步驟3的方法，讓光譜儀連續采集30張ECL光譜數據，取第30張作為最終的ECL光譜；

步驟5.向1.5mL含有100μM三聯吡啶釕、40mM三丙胺和100mM磷酸鹽緩沖液(pH＝7.4)的電解液中不斷加入探針部花菁-香豆素雜化染料CouMC，按照步驟4的方法，得到不同濃度CouMC電解液所對應的ECL光譜；