[發(fā)明專利]一種鑒別泰國多鱗鱚隱存種與多鱗鱚的分子標記、引物及方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201711024496.6 | 申請日： | 2017-10-26 |
| 公開（公告）號： | CN107604079A | 公開（公告）日： | 2018-01-19 |
| 發(fā)明（設計）人： | 高天翔;肖家光;楊天燕;陳治;張秀梅 | 申請（專利權）人： | 浙江海洋大學 |
| 主分類號： | C12Q1/6888 | 分類號： | C12Q1/6888;C12N15/11 |
| 代理公司： | 杭州浙科專利事務所(普通合伙)33213 | 代理人： | 吳秉中 |
| 地址： | 316000 浙江省舟山市普陀海*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 鑒別 泰國 多鱗鱚隱存種 多鱗鱚 分子 標記 引物 方法 | ||
1.一種鑒別泰國多鱗鱚隱存種與多鱗鱚的分子標記，其特征在于：所述標記序列為：
泰國多鱗鱚隱存種的分子標記序列為：
CCCATGCAGGTGCTTCCGTTGACCTCACTATCTTCTCCCTGCACTTAGCAGGGATTTCATCAATTCTAGGGGCAATCAACTTCATCACGACAATCATTAACATGAAACCTCCTGCAACTTCCCAATACCAAACCCCACTGTTTGTATGGTCCGTCTTAATTACGGCTGTTCTCCTCCTCCTTTCACTCCCCGTACTCGCAGCCGGAATCACCATGCTTCTCACAGATCGAAACCTGAACACCACC；
多鱗鱚的分子標記序列為：
CCCATGCAGGAGCTTCCGTTGACCTTACTATCTTCTCCCTGCACTTAGCAGGGATTTCATCAATTTTAGGAGCAATCAACTTTATCACAACAATCATTAACATGAAACCTCCTGCAACTTCCCAGTACCAAACCCCACTGTTTGTATGGTCCGTCTTAATTACAGCTGTTCTCCTCCTCCTTTCACTGCCTGTACTCGCAGCCGGAATCACCATGCTTCTCACAGATCGAAATCTGAACACCACC。
2.一種鑒別泰國多鱗鱚隱存種與多鱗鱚的分子標記引物，其特征在于：所述引物序列為：
L6312：5’-TCCTCTAGCAGGCAACTTAG-3’；
H6558：5’-CCTCCTGCAGGGTCAAAGAA-3’。
3.一種鑒別泰國多鱗鱚隱存種與多鱗鱚的分子標記方法，其特征在于：所述鑒別方法的具體步驟為：提取泰國多鱗鱚隱存種與多鱗鱚的DNA，以兩種魚的DNA為模板，以引物進行PCR擴增，對擴增結果進行純化、測序，比對測序結果。
4.根據(jù)權利要求3所述的一種鑒別泰國多鱗鱚隱存種與多鱗鱚的分子標記方法，其特征在于：所述PCR擴增的反應體系組成為：超純水17.5ul、10×buffer 2.5ul、dNTPs 2ul、rTaq 0.15ul、模板1ul、Primer各1ul。
5.根據(jù)權利要求3所述的一種鑒別泰國多鱗鱚隱存種與多鱗鱚的分子標記方法，其特征在于：所述PCR擴增程序為：94℃預變性5min，然后94℃變性45s，50℃退火45s，72℃延伸45s，共進行35個循環(huán)，72℃最后延伸10min，4℃保存∞。
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