[發明專利]一種苦丁茶老葉中熊果酸的提取工藝

在審

• 申請號: 201711010407.2
• 申請日: 2017-10-26
• 公開（公告）號: CN107698650A
• 公開（公告）日: 2018-02-16
• 發明（設計）人: 柳賢德;劉國民;李秋宛;趙建國
• 申請（專利權）人: 海南大學
• 主分類號: C07J63/00
• 分類號: C07J63/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于藥用植物提取技術領域，具體涉及一種大葉冬青苦丁茶老葉中熊果酸的提取工藝。

背景技術

由于熊果酸結構復雜，人工合成困難，大都是從天然植物中提取分離得到，如女貞、連翹、山楂等都是熊果酸的主要原料。熊果酸的提取分離大都使用有機溶劑法和硅膠柱層析法。有機溶劑法具有過程繁瑣、含量低等特點；硅膠柱層析法在工業操作帶來一定的困難。

苦丁茶，是冬青科冬青屬苦丁茶種常綠喬木，是我國一種傳統的純天然保健飲料佳品，具有清熱消暑、潤喉止咳、抑癌防癌、抗衰老、活血絡等各種功效。苦丁茶中含有苦丁皂甙、氨基酸、維生素C、多酚類、黃酮類、咖啡堿等兩百多種成分。苦丁茶樹開始生長后約25天內，其幼芽嫩葉尚可作為制作嫩茶的原料，但其采摘時間短促、數量少、制作成本高。待到25天后幼葉迅速長足，葉質變硬，成為老葉，老葉采摘時間長、數量多、資源豐富，但只能用其制作老葉茶。老葉茶與嫩茶相比，口感差、不耐沖泡，品質相差甚遠。因此，老葉作為苦丁茶副產物，經常當成垃圾扔掉，造成資源的浪費。

大葉冬青苦丁茶老葉資源豐富，其中熊果酸的含量為1%以上，是目前發現的為數不多的熊果酸含量在1%以上的天然植物，是一種不可多得的用于提取熊果酸的優質原料。目前尚未見有從大葉冬青苦丁茶老葉中提取熊果酸的相關報道。因此，研究和建立從苦丁茶老葉中提取熊果酸的方法有助于深入開發利用苦丁茶資源和降低熊果酸的生產成本。

發明內容

本發明的目的在于提供一種以大葉冬青苦丁茶老葉的提取工藝，該方法提取工藝簡單，可較好地降低成本，提高提取效率。

本發明采用以下技術方案：

一種苦丁茶老葉中熊果酸的提取工藝，包括以下步驟：

（1）將苦丁茶老葉用水煮兩次，每次1h，濾渣用水洗三次后過濾，最后濾渣烘干至恒重后粉碎，此步的目的在于除去糖和皂類物質；

（2）將茶粉與無水乙醇進行提取，可使用回流提取或者超聲提取；

（3）初提完的乙醇溶液通過離心除去殘渣，將提取液減壓濃縮，濃縮液用硫酸調到pH=4左右，加水充分沉淀，過濾，烘干沉淀物；

（4）對濃縮液進一步濃縮成膏狀，向膏狀物中加入石油醚，洗滌三次，此步旨在除去脂類物質；

（5）將膏狀物進行冷凍干燥，得到無水苦丁茶熊果酸提取物粉末。

優選的，所述步驟（2）中苦丁茶老葉茶粉與無水乙醇固液比為1:15；回流提取時間為12h，提取溫度85℃或者超聲提取時間為12h，提取溫度50℃。

優選的，所述步驟（3）中離心可選擇相對離心力為10000Xg，運動時間為15 min或者相對離心力為8000Xg，運動時間30min；沉淀選擇靜置20小時。

優選的，所述步驟（4）中加入浸膏體積4倍的石油醚洗滌。

本發明的有益技術效果為，選擇資源豐富且目前處于廢棄不用狀態的大葉冬青苦丁茶老葉作為原料；所用的試劑對環境污染小，過程中主要使用乙醇溶液，可少量使用石油醚溶液除去脂類物質；經過多次回流提取或超聲提取可將苦丁茶老葉中的有效成分提取更為完全；通過高速離心的方法能減少提取液中的雜質，使得純度高，可提高產品品質；減壓濃縮的乙醇得以回收可重復利用，減少乙醇溶劑的浪費，降低成本。

附圖說明

圖1為熊果酸標準品的高效液相色譜(HPLC)圖譜。

圖2為制得的熊果酸晶體的高效液相色譜(HPLC)圖譜。

圖3為制得的熊果酸晶體對人肝癌細胞HepG2的MTT測試結果。

具體實施方式

下面結合具體實施例對本發明進一步說明。

實施例1

一種苦丁茶老葉中熊果酸的提取工藝，包括以下步驟：

（1）將苦丁茶老葉洗凈后用水煮兩次，茶葉用水洗三次后烘干至恒重后粉碎；

（2）使用100g茶粉和4L無水乙醇以進行提取，100g:1L超聲3h，將提取液倒出后，加入新的1L乙醇再超聲，重復3次；

（3）初提完乙醇溶液通過相對離心力為10000Xg，運動時間為15min，離心除去殘渣，將提取液減壓濃縮，將浸膏用少量的乙醇溶解后，用濃硫酸調到pH=4左右，加水靜置12h后，減壓濃縮；

（4）對旋蒸瓶中浸膏加入40ml石油醚，洗滌三次，此步旨在除去脂類物質；

（5）將膏狀物進行冷凍干燥，得到無水苦丁茶熊果酸提取物粉末7.49 g，其中熊果酸含量為1.0062 g。