[發(fā)明專利]一種從虎杖中提取白藜蘆醇及虎杖甙的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710972231.2
• 申請日: 2017-10-18
• 公開（公告）號: CN107721825B
• 公開（公告）日: 2020-12-22
• 發(fā)明（設計）人: 冉志龍;周寶龍;龔建梅;趙益萌
• 申請（專利權）人: 洋縣秦龍藥業(yè)有限公司
• 主分類號: C07C37/68
• 分類號: C07C37/68;C07C37/72;C07C37/82;C07C37/84;C07C39/21;C07H15/203;C07H1/08
• 代理公司: 西安億諾專利代理有限公司 61220
• 代理人: 華長華

1.一種從虎杖中提取白藜蘆醇及虎杖甙的方法，包括以下步驟：

（1）預處理：將大麥芽粉碎后，按照料液比1g：100mL加入水中，攪拌，然后按照大麥芽和虎杖的質量比為1:10加入虎杖，攪拌，在50-65℃下攪拌加熱1.5h，然后在功率200-300W下超聲處理10-20min；取出虎杖后用水清洗，瀝干水分；然后在70-80℃下烘干2h，再在95-105℃下烘干2h；取出自然冷卻后，用香菇熏蒸2-3h；然后在90-100℃下烘干4-5h，得到預處理過的虎杖；

（2）酶處理：取預處理過的虎杖，粉碎，過30-40目，按照料液比1g：4 mL加入水，然后加入酸性蛋白酶、纖維素酶、α-淀粉酶、氯化鈣，加入pH調節(jié)劑調節(jié)體系的pH為5.0，攪拌，在45-50℃下酶解10h，得到虎杖的酶處理液；

（3）醇提：用乙醇提取，過濾，濾液經過減壓濃縮得到浸膏；

（4）水沉除雜，得到虎杖提取物粗品；

（5）結晶分離：采用質量濃度為95%的乙醇為洗脫液進行硅膠柱分離，然后加入乙醚進行結晶分離；

其中，步驟（1）中香菇熏蒸的具體步驟為：按照香菇和虎杖的質量比為1:10稱取香菇，切塊后加入蒸鍋內，加入水，水保持沸騰狀態(tài)，將虎杖置于蒸籠上；

其中，步驟（5）中加入乙醚進行結晶分離的具體操作為：按照體積比1:1，向二氯甲烷-虎杖提取物溶液中加入乙醚，過濾，按照濾液與乙醚的體積比為1:（3-5），向濾液中加入乙醚，靜置結晶12h，過濾，得到濾渣和乙醚母液，濾渣在80-85℃下干燥3-4h，即得到虎杖甙純品；乙醚母液經減壓分段蒸餾回收二氯甲烷和乙醚，然后按照虎杖提取物粗品與水的料液比1g:4mL加入水，靜置12h，將沉淀過濾，在80-85℃下干燥3-4h，得到白藜蘆醇純品。

2.根據(jù)權利要求1所述一種從虎杖中提取白藜蘆醇及虎杖甙的方法，其特征在于：步驟（2）酶處理中，所述酸性蛋白酶、纖維素酶、α-淀粉酶、氯化鈣的加入量分別為25-30 U/mL、25-30 U/mL、15 -25 U/mL、0.05- 0.15g/100mL。

3.根據(jù)權利要求1所述一種從虎杖中提取白藜蘆醇及虎杖甙的方法，其特征在于：步驟（2）中，所述pH調節(jié)劑為鹽酸、硫酸、乳酸或者乙酸中的至少一種。

4.根據(jù)權利要求1所述一種從虎杖中提取白藜蘆醇及虎杖甙的方法，其特征在于：步驟（3）醇提中，用乙醇提取的具體操作為：在虎杖的酶處理液中加入乙醇，調整乙醇的質量濃度為70%，60℃加熱回流1h，過濾，收集濾液，濾渣按照料液比1g：3 mL，用質量濃度為70%的乙醇提取2次，每次提取都是在60℃加熱回流1h，合并3次濾液，將濾液在溫度60-65℃、真空度-0.075至-0.081MPa下減壓濃縮20-25min，得到浸膏。

5.根據(jù)權利要求1所述一種從虎杖中提取白藜蘆醇及虎杖甙的方法，其特征在于：步驟（4）水沉除雜的具體操作為：將步驟（3）得到的浸膏加入3-5倍質量的水中，攪拌均勻，靜置12h，經抽濾，將得到的沉淀物在55℃-60℃、壓力-0.081至-0.085MPa的條件下真空干燥6-8h，得到粉末狀的虎杖提取物粗品。

6.根據(jù)權利要求1所述一種從虎杖中提取白藜蘆醇及虎杖甙的方法，其特征在于：步驟（5）中硅膠柱分離的具體操作為：按照質量比為1：（2-3），將虎杖提取物粗品與200目的硅膠拌樣上柱，采用95%的乙醇為洗脫液進行洗脫，同時用三氯化鐵-鐵氰化鉀檢識洗脫液中的白藜蘆醇，當檢測到洗脫液中的白藜蘆醇呈陽性時，開始收集洗脫液，直至檢測到洗脫液中的白藜蘆醇呈陰性時，停止收集洗脫液；將收集的洗脫液真空蒸餾，回收乙醇，然后按照虎杖提取物粗品與二氯甲烷的料液比為1g:1mL加入二氯甲烷，溶解得到二氯甲烷-虎杖提取物溶液。