[發(fā)明專利]一種分離制備牙髓干細(xì)胞的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710959618.4
• 申請日: 2017-10-16
• 公開（公告）號(hào): CN107502588B
• 公開（公告）日: 2020-04-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊曉光;鮑永利;王雪;李玉新;石曉川;李首一
• 申請（專利權(quán)）人: 吉林省太陽鳥再生醫(yī)學(xué)工程有限責(zé)任公司
• 主分類號(hào): C12N5/0775
• 分類號(hào): C12N5/0775;A01N1/02
• 代理公司: 北京集佳知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11227
• 代理人: 溫可睿;趙青朵

1.氯化兩面針堿在牙髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離制備中的應(yīng)用。

2.一種牙髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)液，其特征在于，由胎牛血清、轉(zhuǎn)鐵蛋白、雙抗、氯化兩面針堿和DMEM/F12培養(yǎng)基組成。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的培養(yǎng)液，其特征在于，由15％V/V胎牛血清、1～150μg/mL轉(zhuǎn)鐵蛋白、1％V/V雙抗、0.5～10μg/mL氯化兩面針堿。

4.一種牙髓組織消毒劑，其特征在于，為含有0.5～10μg/mL氯化兩面針堿的生理鹽水。

5.一種牙齒運(yùn)輸液，其特征在于，為含有雙抗和0.5～10μg/mL氯化兩面針堿的生理鹽水。

6.一種牙髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離制備方法，其特征在于，牙髓組織清洗消毒后進(jìn)行消化，所得細(xì)胞以權(quán)利要求2或3所述的培養(yǎng)液重懸，接種于經(jīng)透明質(zhì)酸和明膠包被的培養(yǎng)器皿中，原代培養(yǎng)；

所述清洗消毒包括5步，依次采用含0.5～10μg/mL氯化兩面針堿的生理鹽水、體積分?jǐn)?shù)為70％～75％的乙醇、生理鹽水、含有雙抗的PBS緩沖液、PBS緩沖液。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的分離制備方法，其特征在于，所述透明質(zhì)酸和明膠的質(zhì)量比為(4～5)：(2～3)。

8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的分離制備方法，其特征在于，所述包被的量為20～30μL/cm²。

9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的分離制備方法，其特征在于，所述牙髓組織來源于智齒，智齒的殺菌和運(yùn)輸采用含有雙抗和0.5～10μg/mL氯化兩面針堿的生理鹽水。

10.根據(jù)權(quán)利要求6～9任一項(xiàng)所述的分離制備方法，其特征在于，所述原代培養(yǎng)后還包括傳代的步驟。