[發(fā)明專利]一種重塑骨髓微環(huán)境的方法

在審

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• 申請日: 2017-10-16
• 公開（公告）號: CN107714726A
• 公開（公告）日: 2018-02-23
• 發(fā)明（設計）人: 王金勇;夏成祥;董勇;王童潔;劉曉飛;杜鵑;耿陽;劉麗娟;吳紅玲
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學院廣州生物醫(yī)藥與健康研究院
• 主分類號: A61K35/28
• 分類號: A61K35/28;A61P35/02;A61P35/00;A61P7/00
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司11332
• 代理人: 鞏克棟

技術(shù)領域

本發(fā)明涉及骨髓微環(huán)境重塑領域，具體而言，涉及一種重塑骨髓微環(huán)境的方法及其在治療癌癥特別是白血病中的應用。

背景技術(shù)

慢性粒-單核細胞白血病(CMML)和幼年型粒-單核細胞白血病(JMML)是無性系血液惡性腫瘤，具有骨髓增生異常(MDS)和骨髓增殖性疾病(MPN)的特征。CMML和JMML與參與RAS/MAPK信號轉(zhuǎn)導的基因的致癌點突變有關，25％至40％的CMML/JMML患者攜帶NRAS的體細胞突變。有報道顯示，攜帶Nras等位基因的內(nèi)源突變的小鼠發(fā)生CMML樣疾病，其具有長的潛伏期。還有報道顯示了在CMML/JMML的人類患者以及動物模型中，MDS/MPN疾病和骨髓(BM)微環(huán)境功能紊亂之間的頻繁關聯(lián)。再生障礙性貧血(Aplastic anemia，AA)簡稱再障，是由多種原因引起的骨髓造血干細胞缺陷、造血微環(huán)境損傷以及免疫機制改變，導致骨髓造血功能衰竭，出現(xiàn)以全血細胞減少為主要表現(xiàn)的疾病。骨髓微環(huán)境是一個具有多重功能的復雜網(wǎng)絡結(jié)構(gòu)，由數(shù)種細胞類型組成，包括間充質(zhì)基質(zhì)細胞(MSC)、骨內(nèi)膜成骨細胞(OB)、內(nèi)皮細胞和其他稀有的細胞類型。MSC可以分離并在體外進行增殖。MSC是骨髓基質(zhì)細胞的前體細胞，占骨髓單個核細胞的0.01％至0.001％，相當于HSC數(shù)量的1％，在不同的誘導條件下可以向成骨細胞、軟骨細胞、脂肪細胞、肌細胞、周細胞、網(wǎng)狀成纖維細胞及神經(jīng)細胞等分化。

目前，MSC普遍用于治療全身性移植物抗宿主病(GVHD)，改善傷口愈合并促進肺損傷、腎損傷和心肌損傷的恢復。然而，對于MSC的響應并不總是成功的，例如，已知其受到患者的炎性狀態(tài)的影響。此外，MSC是多能細胞，它們在注射進受體宿主后可分化成脂肪細胞、成骨細胞、軟骨細胞、成肌細胞和/或神經(jīng)元樣細胞。因此，難以預測在將MSC注射入BM微環(huán)境后的準確結(jié)果，如MSC注射在HSC池的正常化、正常造血功能的恢復以及疾病進展抑制等方面的作用。

目前，惡性血液腫瘤的治療方法主要包括化療、放療以及聯(lián)合造血干細胞移植。然而，上述治療方法除了腫瘤容易復發(fā)外，還伴隨不同程度的副作用，包括對非腫瘤健康細胞特別是生殖細胞的嚴重損害、移植物抗宿主病(GVHD)等，嚴重降低患者生活質(zhì)量。急需一種對患者副作用小甚至無副作用的、能有效治療血液腫瘤的治療方法。惡性血液腫瘤患者的骨髓微環(huán)境通常會遭到腫瘤的破壞，繼而出現(xiàn)骨髓正常造血減弱甚至衰竭的現(xiàn)象。反過來，骨髓間質(zhì)微環(huán)境的功能異常/耗竭在白血病等血液腫瘤以及再生障礙性貧血的病理惡化進程中起著促進作用。迄今為止，尚沒有一種有效的途徑能解決病理骨髓微環(huán)境的重塑問題。因此，提供一種能有效地重塑骨髓微環(huán)境的方法對于病理狀態(tài)下重塑骨髓微環(huán)境，緩解及治療惡性血液腫瘤具有十分重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容

針對現(xiàn)有技術(shù)中存在的缺陷，本發(fā)明旨在提供一種重塑骨髓微環(huán)境的方法及其應用。本發(fā)明的方法首次實現(xiàn)了病理骨髓微環(huán)境的重塑，有效逆轉(zhuǎn)骨髓微環(huán)境由于遭受腫瘤等破壞出現(xiàn)的骨髓間質(zhì)細胞功能耗竭、骨內(nèi)膜成骨細胞消失等問題引起的骨髓造血減弱及衰竭現(xiàn)象，成功恢復骨髓微環(huán)境正常造血，顯著延長受試者的生存期。此外，本發(fā)明的方法可用于治療血液腫瘤以及再生障礙性貧血(Aplastic anemia，AA)；優(yōu)選地，所述血液腫瘤為白血病；進一步優(yōu)選地，所述血液腫瘤為幼年型粒單核細胞白血病(Juvenile Myelomonocytic Leukemia)和慢粒單核細胞白血病(Chronic myelomonocytic leukemia)；具有安全、有效、無副作用的特點。

一方面，本發(fā)明提供了一種在骨髓微環(huán)境受損的受試者中重塑骨髓微環(huán)境的方法，其包括：將包含分離的間充質(zhì)基質(zhì)細胞(MSC)的組合物植入所述受試者的骨髓腔。

在具體的優(yōu)選實施方案中，所述間充質(zhì)基質(zhì)細胞從健康受試者的骨內(nèi)膜和/或骨髓有核細胞獲得。

優(yōu)選地，所述受試者為哺乳動物。

進一步優(yōu)選地，所述受試者為小鼠；當所述受試者為小鼠時，所述間充質(zhì)基質(zhì)細胞具有以下表型：TER119^-CD45^-CD31^-Sca1⁺CD51⁺CD146⁺。