[發明專利]一種納米級膠原蛋白的提純方法

有效

• 申請號: 201710916698.5
• 申請日: 2017-09-30
• 公開（公告）號: CN107574217B
• 公開（公告）日: 2020-12-01
• 發明（設計）人: 田娟
• 申請（專利權）人: 上海新肌生物科技有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K14/78;C07K1/14
• 代理公司: 北京科家知識產權代理事務所(普通合伙) 11427
• 代理人: 陳娟

本發明公開了一種納米級膠原蛋白的提純方法，包括以下步驟：(1)將新鮮魚皮剪碎，加入氯化鈉水溶液中浸漬，離心取離心后的沉淀，將沉淀用水沖洗干凈并晾干，得到預處理的魚皮；(2)將步驟(1)預處理的魚皮用丙酮脫脂；(3)脫脂后的魚皮加入到乙酸水溶液中，再加入胃蛋白酶酶解，然后過濾、保留濾液；(4)向步驟(3)所得濾液中加入氯化鈉后離心，將離心所得沉淀加入到乙酸水溶液中攪拌均勻，得到膠原蛋白粗提取液；(5)將膠原蛋白粗提取液經過進一步提純、冷凍干燥后得到膠原蛋白。本發明納米級膠原蛋白的提純方法，通過酶解法將膠原蛋白水解為納米級活性寡肽膠原，再結合反膠團法提純膠原蛋白，生產成本低、操作簡單，膠原蛋白純度高、產率高，對人體無毒副作用、無過敏現象，適合應用于生物醫藥、化妝品、食品等領域。

技術領域

本發明涉及一種膠原蛋白的提純方法。

背景技術

膠原蛋白是生物高分子，動物結締組織、毛皮中的主要成分，也是哺乳動物體內含量最多、分布最廣的功能性蛋白，占蛋白質總量的25％～30％。膠原蛋白因具有良好的生物相容性、可生物降解性以及生物活性，因此在食品、醫藥、組織工程、化妝品等領域獲得廣泛的應用。在生物、醫學領域，膠原力學性能高、促進細胞生長、止血、生物相容性和生物降解性。在化妝品領域，由于膠原及其水解物與人皮膚膠原的結構相似，相容性好，存在著離子鍵、氫鍵等相互作用，由其制備的材料，可以擴散到皮膚的深層，對人的皮膚有很好的營養作用，同時由于其分子中含有大量的羥基，因此它有著相當好的保濕作用；其分子中的氨基和羧基又賦予它一定的表面活性，這使它與其它材料的相容性很好，且對皮膚無刺激性。在食品方面，食品是人類賴以生存的最基本的生活材料，人們飲食結構的改變最能直接反映生活水平的提高，現在人們在飲食上不僅要求色、香、味俱佳，而且還要求食品具有保健、美容等功能，人們食用含膠原豐富的食品，可使皮膚增加彈性、延緩衰老，同時還可強筋健骨，增強體質的作用。

膠原是通過復雜的化學鍵交聯在一起的超大分子有機物，因此是很難直接溶于水的。在含有蛋白酶的醋酸溶液中，由于部分鍵被破壞，少部分膠原分子的基本組成單位γ鏈被溶解出來，同時γ鏈還有可能被繼續降解成二聚體形式的β鏈和單體形式的α鏈，從而變成可以被提取的膠原蛋白。制備膠原蛋白的原料主要有牛肌腿、豬皮、魚皮和動物骨等。相比豬皮、雞皮，在膠原蛋白領域，魚皮是高品質原料，是提取膠原和膠原蛋白的好材料。

膠原的提取方法通常有酸法、堿法和酶法。酶法條件溫和，效率高，適合于大批量生產，本發明的納米級膠原蛋白，通過酶解法將膠原蛋白水解為納米級活性寡肽膠原，納米級活性寡肽膠原是構成膠原蛋白的小分子片斷，是由二肽、三肽直至七肽組成的具有生物活性的納米小分子混合寡肽，納米級膠原蛋白的生物活性、吸收利用率、效用時間遠優于大型膠原蛋白。

酶法提取的膠原蛋白需要進一步提純，才能得到純度較高的、適合于工業應用的膠原蛋白。本發明將酶法提取膠原蛋白和反膠團法提純膠原蛋白相結合，提純得到的納米級膠原蛋白產率高、純度高，適合應用于生物醫藥、食品、化妝品等領域。

發明內容

本發明提供了一種納米級膠原蛋白的提純方法。本發明采用如下技術方案：

一種納米級膠原蛋白的提純方法，包括以下步驟，所述份均為重量份：

(1)將新鮮魚皮剪碎后加入到質量為魚皮質量10-30倍、質量分數為8-12％的氯化鈉水溶液中，浸漬8-24小時，浸漬溫度為30-40℃，然后離心，取離心后的沉淀，用質量為沉淀質量5-15倍的水沖洗表面，自然晾干，得到預處理的魚皮；

(2)將步驟(1)預處理的魚皮15-30份、20-40份水加入到127.5-293份丙酮中，在溫度為3-5℃、以20-100轉/分鐘的轉速攪拌24-48小時，然后傾去上清液，用60-120份水沖洗魚皮表面，自然晾干；