[發明專利]一種透明質酸季銨鹽的制備方法

有效

• 申請號: 201710880823.1
• 申請日: 2017-09-26
• 公開（公告）號: CN107459590B
• 公開（公告）日: 2021-03-23
• 發明（設計）人: 李霞;魏健;耿鳳;石艷麗;郭學平
• 申請（專利權）人: 華熙生物科技股份有限公司;山東華熙海御生物醫藥有限公司
• 主分類號: C08B37/08
• 分類號: C08B37/08
• 代理公司: 濟南泉城專利商標事務所 37218
• 代理人: 李桂存

本發明提供了一種透明質酸季銨鹽的制備方法，步驟如下：將透明質酸金屬鹽在醇溶液中酸化，過濾后濾餅經過醇洗得酸性透明質酸；將酸性透明質酸溶解于水中，然后用季銨堿溶液調節pH至近中性，得透明質酸季銨鹽溶液；將上述溶液凍干得透明質酸季銨鹽干粉，其金屬離子含量為0.1%?1.0%。本發明的制備方法通過固體透明質酸進行離子交換來代替透明質酸為粘稠溶液的狀態下進行離子交換；以醇溶液為介質代替離子交換樹脂為介質進行離子交換；以簡單固液分離代替離心機離心分離。本發明的工藝簡單，占用設備少，生產成本低，離子置換效率高，收率高，適合工業化生產。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，涉及一種透明質酸季銨鹽的制備方法。

背景技術

透明質酸是由葡萄糖醛酸和氨基葡萄糖為雙糖單位組成的直鏈高分子多糖，存在于皮膚、眼玻璃體、軟骨、關節滑液等許多結締組織中，并在其中起到保濕、營養、修復和預防損傷等生理作用，透明質酸一般為其鈉鹽，即透明質酸鈉，溶于水，但不溶于有機溶劑，研究者為了得到改性透明質酸，一般會需要可溶于有機溶劑（如二甲基亞砜﹑二甲基甲酰胺）的透明質酸，一般是透明質酸的季銨鹽，如透明質酸的四丁基銨鹽（HA-TBA）。中國專利（公開號CN 104725529 A）和韓國專利（專利號KR 20100133688 A）其中報道了HA-TBA的制備方法。目前已經報道的HA-TBA的制備方法均是利用離子交換樹脂將鈉離子置換成四丁基銨根離子，但是該技術具有以下特點：該工藝中使用了離子交換樹脂，由于透明質酸為大分子物質，溶于水后溶液會較粘稠，直接在離子交換層析柱內交換，透明質酸溶液很難流出，實際操作性差，消耗的時間也較長；另外如果通過將負載有四丁基銨根離子的離子交換樹脂與透明質酸鈉溶液混合攪拌進行離子交換，然后再分離，也需要混和、分離多次重復操作，才可以將透明質酸鈉的鈉離子幾乎完全轉化為銨根離子，另外，由于透明質酸溶液比較粘稠，靠簡單的靜置分層傾析方法將透明質酸溶液與離子交換樹脂分離簡直是不可能，所以必須通過離心或過濾等方式才能進行固液分離。所以該工藝復雜，比較費時、費力，用到的設備也較多，不適合工業化生產。

發明內容

針對目前離子交換制備透明質酸季銨鹽工藝復雜、不適合工業化生產等問題，本發明提供一種工藝相對簡單、所用設備相對較少、生產成本低、適合工業化生產的透明質酸季銨鹽的制備方法。

為實現上述目的，本發明采用如下技術方案。

一種透明質酸季銨鹽的制備方法，采用以下步驟：

（1）將透明質酸金屬鹽在醇溶液中酸化，過濾后濾餅經過醇洗得酸性透明質酸；

（2）將步驟（1）中酸性透明質酸溶解于水中，然后用季銨堿溶液調節pH至近中性，得透明質酸季銨鹽溶液；

（3）將步驟（2）中的溶液凍干得透明質酸季銨鹽干粉。

可選地，透明質酸金屬鹽的分子量為5×10⁴-3×10⁶ Da。

可選地，透明質酸金屬鹽為透明質酸的堿金屬鹽、堿土金屬鹽或鋅鹽；優選為鈉鹽、鉀鹽或鈣鹽。

可選地，步驟（1）中醇溶液的濃度為50%-100%（v/v）。

可選地，步驟（1）中醇為甲醇、乙醇、丙醇或異丙醇，最優選為乙醇。

可選地，透明質酸金屬鹽與醇溶液的質量體積比為1.0%-15%；優選為3.0%-10%。

可選地，步驟（1）中的酸為鹽酸、硫酸、硝酸或乙酸，最優選為鹽酸；所述鹽酸的濃度為12 mol/L。

可選地，步驟（1）中酸化過程的酸液與醇溶液的體積比為1:10-1:100，優選為1:50-80。

作為優選，步驟（1）中所得酸性透明質酸，其1wt%溶液的pH為2.0-3.0。