[發(fā)明專利]環(huán)糊精在治療和/預(yù)防膿毒癥中的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710841491.6
• 申請(qǐng)日: 2017-09-18
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107496441B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-10-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 崔慧斐;高雪
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山東大學(xué)
• 主分類號(hào): A61K31/724
• 分類號(hào): A61K31/724;A61K45/06;A61P31/04
• 代理公司: 濟(jì)南圣達(dá)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37221
• 代理人: 王志坤

本發(fā)明公開(kāi)了環(huán)糊精在治療和/預(yù)防膿毒癥中的應(yīng)用。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)通常作為藥用輔料應(yīng)用的CDs的新藥理作用，即具有預(yù)防和/治療膿毒癥的作用。本發(fā)明利用激光共聚焦熒光顯微鏡及MTT法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，CDs可以阻止LPS與小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的結(jié)合，且未見(jiàn)明顯的細(xì)胞毒性；高濃度下五種CDs均未有治療膿毒癥的效果，但γ?CD和HP?β?CD在低濃度下卻具有良好的治療膿毒癥的效果；γ?CD和HP?β?CD與抗生素聯(lián)合用藥對(duì)膿毒癥小鼠有明顯的治療作用，可有效降低其死亡率，對(duì)于膿毒癥的防治具有重要的意義。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于醫(yī)藥生物技術(shù)領(lǐng)域，涉及環(huán)糊精在預(yù)防和/治療細(xì)菌感染所致膿毒癥中的應(yīng)用，尤其涉及γ-CD或HP-β-CD在治療和/預(yù)防膿毒癥中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

膿毒癥是指由感染引起的全身炎癥反應(yīng)綜合征(systemic inflammatoryresponse syndrome，SIRS)，膿毒癥是一種嚴(yán)重危及生命的疾病，是重癥監(jiān)護(hù)室(IntensiveCare Unit，ICU)病人死亡的重要原因。膿毒癥主要由感染性因素引起，如革蘭氏陽(yáng)性(G⁺)菌、革蘭氏陰性(G^-)菌、真菌、病毒等致病微生物侵入所致，它的臨床表現(xiàn)包括原發(fā)感染病灶、全身炎癥反應(yīng)、呼吸系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、肝臟等臟器功能以及代謝改變。膿毒癥有高達(dá)30％～70％的死亡率，全世界每天約有14000人死于膿毒癥，是目前ICU所面臨的最嚴(yán)峻的問(wèn)題之一，已有研究表明，G^-菌釋放的內(nèi)毒素是造成膿毒癥的臨床和實(shí)驗(yàn)室表現(xiàn)的主要原因。

內(nèi)毒素是G^-菌細(xì)胞壁外膜的脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)成分，是一種分子量為70萬(wàn)的類脂多糖體。LPS分子由菌體特異性多糖、非特異性核心多糖和脂質(zhì)A三部分構(gòu)成，脂質(zhì)A(LipidA)是內(nèi)毒素的主要毒性組分。LPS在G^-死亡溶潰后釋放入血，進(jìn)入血液循環(huán)，進(jìn)而引發(fā)膿毒癥。進(jìn)入血液的LPS,通過(guò)脂質(zhì)A與血液中內(nèi)毒素結(jié)合蛋白(Lipopolysaccharide-Binding Protein,LBP)相結(jié)合，形成LPS-LBP復(fù)合物，繼而被單核巨噬細(xì)胞表面的CD14分子受體識(shí)別，形成LBP-LPS-CD14三元復(fù)合物，再與巨噬細(xì)胞表面的跨膜受體TLR4(Toll like receptor 4，TLR4)結(jié)合，將刺激信號(hào)傳入細(xì)胞內(nèi)從而導(dǎo)致單核/巨噬細(xì)胞的活化，釋放TNF-α、IL-1、IL-6等細(xì)胞因子。受LPS刺激單核/巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子，迅速活化不同組織器官的細(xì)胞，導(dǎo)致神經(jīng)內(nèi)分泌、機(jī)體代謝和激素水平的改變，進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞功能的異常和不同組織器官的進(jìn)行性衰竭，最終導(dǎo)致膿毒癥的產(chǎn)生。此外，體內(nèi)LPS水平與膿毒癥預(yù)后也密切相關(guān)。因此,關(guān)于LPS的研究一直是膿毒癥生理病理和防治研究的熱點(diǎn)課題。

膿毒癥一直是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)面臨的一個(gè)復(fù)雜的難題，多年來(lái)，人們一直希望找到一種方法治療細(xì)菌感染所導(dǎo)致的膿毒癥。膿毒癥的治療包括抗感染、調(diào)節(jié)宿主反應(yīng)性以及血液動(dòng)力學(xué)復(fù)蘇即改善器官功能障礙等，而抗生素治療是當(dāng)前治療細(xì)菌感染的主要策略。但是大量研究表明，抗生素在治療G^-感染時(shí)，雖然能有效的殺滅細(xì)菌，卻同時(shí)導(dǎo)致存在于G^-細(xì)胞外膜上的LPS釋放，勢(shì)必會(huì)加重膿毒癥的程度，因此，抗生素治療膿毒癥存在一定的局限性。

CDs是由環(huán)糊精葡萄糖轉(zhuǎn)移酶作用于淀粉所產(chǎn)生的一組環(huán)狀低聚糖，廣泛應(yīng)用于分離有機(jī)化合物及用于有機(jī)合成，也用作醫(yī)藥輔料、食品添加劑等。CDs可以與一些不具備生物相容性的藥物分子制備成包合物，不但增加了藥物的生物相容性，還可以起到緩釋作用。有研究利用聚陰離子化的環(huán)糊精或DMA7-β-CyD來(lái)治療膿毒癥，但其對(duì)于膿毒癥的治療研究仍極為有限。CDs結(jié)構(gòu)最顯著的特征就是具有一個(gè)環(huán)外親水、環(huán)內(nèi)疏水且有一定尺寸的立體手性空腔，而LPS是具有親水區(qū)陰離子(磷酸基團(tuán))和疏水區(qū)(5-7個(gè)親脂鏈)的兩親性物質(zhì)，在自然狀態(tài)下，LPS具有自組裝的特性，形成分子量較大的分子，基于此性質(zhì)，開(kāi)發(fā)CDs的體內(nèi)治療作用，利用CDs的疏水性空腔可以包和類脂A的疏水鏈的作用從而阻斷LPS作為膿毒癥時(shí)炎癥風(fēng)暴始動(dòng)因素的作用，進(jìn)行抗生素聯(lián)合CDs治療膿毒癥的方式未有報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容