[發(fā)明專利]一種牛樟芝菌株及其保藏方法有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201710838836.2 | 申請(qǐng)日： | 2017-09-18 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN107858292B | 公開（公告）日： | 2021-05-14 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 劉伯雅;何立肖 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 劉伯雅;河北大河生物科技有限公司 |
| 主分類號(hào)： | C12N1/14 | 分類號(hào)： | C12N1/14;C12N1/04;A01H15/00;C12R1/645 |
| 代理公司： | 北京東方芊悅知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11591 | 代理人： | 李巖 |
| 地址： | 052360 河北*** | 國省代碼： | 河北;13 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 種牛 菌株 及其 保藏 方法 | ||
1.一種牛樟芝菌株的保藏方法,其特征是包括以下具體步驟：
①按液體培養(yǎng)基中各組分的配比準(zhǔn)確稱取各組分，葡萄糖25g/L，酵母粉10g/L，磷酸氫二鉀1.0g/L，七水合硫酸鎂0.5g/L，氯化鈉0.1g/L，七水合硫酸亞鐵0.25g/L，調(diào)節(jié)pH至6.5，121℃滅菌30分鐘，得到液體培養(yǎng)基；
②按固體培養(yǎng)基中各組分的配比準(zhǔn)確稱取各組分，葡萄糖40g/L，酵母粉20g/L，磷酸氫二鉀1.5g/L，七水合硫酸鎂0.6g/L，瓊脂粉20g/L，調(diào)節(jié)pH至6.5，121℃滅菌30分鐘，得到固體培養(yǎng)基；
③將保藏號(hào)為CGMCC NO.14351的牛樟芝菌株以10％接種量接種到100mL液體培養(yǎng)基中，28℃恒溫，搖床120rpm，培養(yǎng)6天，得到牛樟芝的活化菌液；
④將牛樟芝活化菌液涂布在斜面固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，在溫度28℃，濕度70％的恒溫、恒濕、培養(yǎng)箱內(nèi)，靜止培養(yǎng)15天，待菌絲長出孢子；
⑤以無菌20％甘油倒入斜面試管內(nèi)，用刮鏟刮下孢子，并于甘油溶液均勻混合，置于無菌離心管中，蓋好蓋子后用封口膜密封；
⑥將含有牛樟芝孢子的甘油管放入-18℃冰箱預(yù)冷5小時(shí)，然后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱進(jìn)行保藏。
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