[發明專利]正骨水指紋圖譜的構建方法及檢測方法

有效

• 申請號: 201710835098.6
• 申請日: 2017-09-15
• 公開（公告）號: CN107607663B
• 公開（公告）日: 2019-08-16
• 發明（設計）人: 范衛鋒;胡琴;何寶;朱荃;鄭兆廣;段婷婷;鄧麗芳;葉志文;李琴;王汝上;高俊飛;黃艷霞;程慧荃;范麗霞
• 申請（專利權）人: 廣西玉林制藥集團有限責任公司;廣州康臣藥物研究有限公司
• 主分類號: G01N30/86
• 分類號: G01N30/86;G01N30/02;G01N30/34
• 代理公司: 廣州華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 萬志香

本發明公開了正骨水的指紋圖譜構建方法及其指紋圖譜，該構建方法包括如下步驟：(1)供試品的制備：精密取正骨水，用乙醇水溶液稀釋并定容，搖勻，過濾，取續濾液，即得供試品溶液；(2)精密吸取供試品溶液，注入高效液相色譜儀，得正骨水的指紋圖譜。本發明經發明人的大量實驗和研究，確定了制備供試品溶液的方法及高效液相色譜儀的色譜條件的最優參數，由此構建出正骨水的指紋圖譜，并將其應用到正骨水的質量控制當中，從而保證了不同操作者、不同實驗室多重復做出的指紋圖譜都在允許的誤差范圍內，體現了所述指紋圖譜的通用性、穩定性和實用性，能夠全面、有效地對正骨水進行質量控制。

技術領域

本發明屬于中藥分析領域，涉及一種中藥指紋的構建方法，特別是涉及一種正骨水指紋的構建方法及檢測方法。

背景技術

基于中醫藥理論的中成藥，藥味組成比較繁多，一般是指將兩味以上中藥進行配伍組合并應用于疾病治療的制劑。在制備過程中，不同成分之間可能相互發生反應，導致其成分更加復雜，所以準確檢測其各有效成分的難度很大，如僅定性或定量的檢測其中某個或某幾個成分，由于信息量有限，難以體現中藥組合物作為整體的化學特征。

正骨水是廣西玉林制藥集團有限責任公司自主研發的中成藥，主要用于治療跌打扭傷、骨折脫位及體育運動前后疲勞。該藥由草烏、徐長卿、兩面針、虎杖、碎骨木等26味中藥組成，具有活血祛瘀、舒經活絡、消腫止痛之功效。目前對正骨水的質量控制方法中，主要包括：(1)以降香對照藥材、丹皮酚對照品、兩面針對照藥材進行薄層色譜鑒別；(2)以樟腦對照品、薄荷腦對照品進行氣相色譜法鑒別；(3)以丹皮酚為對照品進行高效液相色譜法測定，其中每1ml正骨水含徐長卿按丹皮酚(C₉H₁₀O₃)計算，不得少于0.1mg。

正骨水的特定原料藥以及制劑成分復雜多樣，上述方法僅針對部分藥材或成分進行表征與控制，具有一定的片面性，均不能全面的反應正骨水中有效化學成分，不足以對其進行有效的質量控制。

發明內容

基于此，針對上述問題，本發明提供了一種正骨水指紋圖譜的構建方法，從而實現對正骨水主要化學成分的整體分析與有效表征，建立具備系統性、特征性、穩定性的正骨水質量控制方法。

為實現上述目的，本發明提供了如下技術方案：

一種正骨水的指紋圖譜的構建方法，該構建方法包括以下步驟：

(1)供試品的制備：精密取正骨水，以乙醇水溶液稀釋并定容，搖勻，過濾，取續濾液，即得供試品溶液；

(2)高效液相色譜測定：精密吸取供試品溶液，注入高效液相色譜儀測定，得到具有共有特征峰的正骨水指紋圖譜。

在其中一個實施例中，步驟(2)中，高效液相色譜測定的色譜條件為：采用C₁₈鍵合硅膠色譜柱，柱溫20℃～35℃，以乙腈為流動相A，0.1％-0.4％的甲酸水溶液為流動相B，梯度洗脫，流動相的流速為0.5-1.5mL/min，檢測波長為270nm-290nm。

在其中一個實施例中，梯度洗脫中的，流動相A、B的變化設置如下：

0～15min，所述流動相A的體積百分比由5％變化至20％，所述流動相B的體積百分比由95％變化至80％；

15～45min，所述流動相A的體積百分比由20％變化至30％，所述流動相B的體積百分比由80％變化至70％；

45～75min，所述流動相A的體積百分比由30％變化至50％，所述流動相B的體積百分比由70％變化至50％；

75～90min，所述流動相A的體積百分比由50％變化至80％，所述流動相B的體積百分比由50％變化至20％；