[發明專利]一種抗MUC16安全型嵌合抗原受體修飾的免疫細胞及其應用

有效

• 申請號: 201710832357.X
• 申請日: 2017-09-15
• 公開（公告）號: CN107557336B
• 公開（公告）日: 2020-02-14
• 發明（設計）人: 劉明錄;王立新;韓國英;強邦明;張傳鵬;王亮;萬磊;劉敏
• 申請（專利權）人: 山東興瑞生物科技有限公司
• 主分類號: C12N5/10
• 分類號: C12N5/10;A61K35/17;A61P35/00
• 代理公司: 37105 濟南誠智商標專利事務所有限公司
• 代理人: 楊筠

本發明公開了一種抗MUC16安全型嵌合抗原受體修飾的免疫細胞，免疫細胞經抗MUC16安全型嵌合受體修飾得到抗MUC16安全型嵌合抗原受體修飾的免疫細胞，所述抗MUC16安全型嵌合抗原受體包括CD8 leader、MUC16結合區、CD8的鉸鏈區，跨膜?刺激結構域、CD3ζ刺激信號傳導區和化學誘導元件及其應用，減輕了毒性，提高了臨床有效性與安全性。

技術領域

本發明涉及生物基因領域，更具體的說，是一種抗MUC16安全型嵌合抗原受體修飾的免疫細胞及其應用。

背景技術

卵巢癌是造成女性死亡的第五大腫瘤。由于其發病位置的隱蔽性，以及缺乏有效的早期檢測指標，導致卵巢癌致死率居于所有婦科腫瘤之首，對女性生命造成嚴重威脅。最新研究數據表明，90％的卵巢癌為上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer，EOC)，且惡性程度高的卵巢癌病人五年生存率甚至低于30％。MUC16，又名CA125，基因位于人類染色體19p13.2，大小為179000bp，是一種表達于各類上皮細胞表面的高分子量糖蛋白，主要發揮保護和修復上皮的作用。MUC16是早期診斷上皮性卵巢癌的重要腫瘤指標，廣泛應用于臨床。近來研究發現，MUC16可以通過與間皮素結合促進卵巢癌遠處轉移，尤其在卵巢癌的腹腔轉移；可以通過抑制卵巢癌細胞與NK細胞形成免疫突觸幫助卵巢癌細胞實現免疫逃逸；還可以通過在卵巢癌細胞中的過表達來影響腫瘤細胞的上皮間質轉化、增殖、遷移和轉移，促進卵巢癌的發生發展。因此，MUC16可為卵巢癌治療提供潛在特異性分子靶點，也可為卵巢癌免疫治療提供新策略。

嵌合抗原受體(chimeric antigen receptor，CAR)是一種重組的抗原受體，同時具有結合抗原及激活免疫細胞的功能。轉入CAR的T細胞，其主要特點是獲得攜帶識別腫瘤抗原特異性受體并賦予T細胞靶向殺傷活性的個性化療效。因此，以MUC16為靶點嵌合抗原受體為基礎的細胞免疫治療新策略會給卵巢癌患者帶來新的希望。

目前，基于一系列不同腫瘤表面抗原設計的CAR-T細胞在體內外顯示了明顯的抗腫瘤效應，尤其是靶向CD19的CAR-T細胞已經在B細胞惡性腫瘤的臨床患者中取得了良好的療效。然而經這些基因修飾后的T細胞會表現出過度的活性，且難以控制并可能導致嚴重的毒性。

發明內容

為了彌補以上不足，本發明提供了一種抗MUC16安全型嵌合抗原受體修飾的免疫細胞及其應用。

本發明的方案是：

一種抗MUC16安全型嵌合抗原受體修飾的免疫細胞，免疫細胞經抗MUC16安全型嵌合受體修飾得到抗MUC16安全型嵌合抗原受體修飾的免疫細胞，所述抗MUC16安全型嵌合抗原受體包括CD8leader、MUC16結合區、CD8的鉸鏈區，跨膜-刺激結構域、CD3ζ刺激信號傳導區和化學誘導元件。

作為優選的技術方案，所述跨膜-刺激結構域選自CD8、CD27、CD28、CD137/4-1BB、CD134/OX40、ICOS分子的全部或部分片段。

作為優選的技術方案，所述化學誘導元件是基于FK506結合蛋白12-二聚化化學誘導子系統(FK506binding protein 12-chemical inducers of dimerizations，FKBP12-CID)構建的，包括兩個拷貝FKBP12的突變體F36V-FKBP(36位上的Phe被Val替代)，并在中間插入T2A序列。

作為優選的技術方案，所述化學誘導元件位于在重組嵌合抗原受體的跨膜-刺激結構域與CD3ζ刺激信號傳導區之間。

作為優選的技術方案，本發明抗MUC16安全型嵌合抗原受體修飾的免疫細胞選自自體的或轉基因的T細胞、NK細胞、細胞毒性T淋巴細胞或調節T細胞，記憶性T細胞、雙特異性T細胞、CIK細胞。