[發明專利]一種茜草藥材茜草總蒽醌含量測定的建立方法及純化方法

在審

• 申請號: 201710827009.3
• 申請日: 2017-09-14
• 公開（公告）號: CN107807100A
• 公開（公告）日: 2018-03-16
• 發明（設計）人: 嚴萍;潘杰;詹若挺;李媛媛;鐘李婷;王艷
• 申請（專利權）人: 廣州中醫藥大學
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31
• 代理公司: 廣州新諾專利商標事務所有限公司44100
• 代理人: 張玲春

1.一種茜草藥材茜草總蒽醌含量測定的建立方法，其特征在于，包括如下步驟：

1)供試品溶液的制備

取茜草粉末過篩，精密稱取1g，并置于錐形瓶內；精密移取70％的甲醇50mL，稱定重量，加熱回流處理60min，放冷至室溫，稱定重量，用70％的甲醇補回失去的重量；濾過，收集續濾液；

精密移取續濾液10mL，置于干燥錐形瓶中，水浴蒸干后，加入20％鹽酸水溶液、5mL水，30mL氯仿，進行加熱回流30min；放冷至室溫后，振蕩提取，取氯仿層，再加入20mL氯仿振蕩提取，取氯仿層，合并氯仿層，50℃水浴蒸干；

殘渣加適量甲醇溶解，轉移至25mL棕色容量瓶內，用甲醇定容至刻度線，即得茜草總蒽醌供試品；

2)標準曲線的制備

取1,8-二羥基蒽醌置于容量瓶中，用醋酸鎂-甲醇溶液定容至刻度線，即得標準溶液一，濃度為0.3877mg/mL；

另分別精密移取上述標準溶液一的7個不同體積至容量瓶內，分別用甲醇和1％醋酸鎂-甲醇溶液定容至刻度線；在510nm處依法測定各上述標準溶液，記錄吸光度值，并作差值；以濃度(mg/ml)為坐標軸x值，以吸光度的差值為坐標軸y值，作標準曲線。

2.根據權利要求1所述的茜草藥材茜草總蒽醌含量測定的建立方法，其特征在于：步驟1)中，還包括步驟：

精密移取2mL供試品溶液至5mL棕色容量瓶內，分別用甲醇和1％醋酸鎂-甲醇溶液定容至刻度，混勻，在510nm處依法測定；取兩者差值從標準曲線上讀出供試品溶液中總蒽醌的含量，計算，即得，按干燥品計算所得的總蒽醌含量(視不同樣品的吸光度調整稀釋倍數)。

3.根據權利要求1所述的茜草藥材茜草總蒽醌含量測定的建立方法，其特征在于：步驟2)中，取1,8-二羥基蒽醌9.94g，置于25ml容量瓶中，用醋酸鎂-甲醇溶液定容至刻度線，即得標準溶液一，濃度為0.3877mg/mL；另分別精密移取上述標準溶液一0.4mL、0.5mL、0.6mL、0.7mL、0.8mL、0.9mL、1.0mL至20mL容量瓶內，選取6個點，作標準曲線。

4.一種茜草藥材茜草總蒽醌含量的純化方法，其特征在于，包括如下步驟：

2.1)上柱液的制備

稱取茜草藥材約用75％乙醇加熱回流提取后，過濾，收集濾液，濾渣再次倒回圓底燒瓶，繼續加熱回流提取；提取后過濾，收集濾液，合并兩次濾液，減壓濃縮至無醇味；分裝入50mL的離心管內，冷藏備用；

上柱藥液則需要以1：3的比例用純水進行稀釋，即上柱藥液的藥液相當于生藥量25g/L；

2.2)純化工藝

取經預處理的D101型濕樹脂濕法裝柱，取上柱液另加水,濕法拌樣，使D101型樹脂充分吸收藥液，不間斷搖勻；

放置12小時，待吸附12小時后，濕法裝柱；收集液體，以便計算柱體積；

再用純水進行洗脫；純水洗脫后，使用75％乙醇進行洗脫，收集75％乙醇洗脫液，即得。

5.根據權利要求4所述的茜草藥材茜草總蒽醌含量測定的純化方法，其特征在于：步驟1)中，稱取茜草藥材約100g，用30倍量的75％乙醇加熱回流提取；減壓濃縮至無醇味且體積為1000mL，即得相當于生藥量100g/L的茜草藥液。

6.根據權利要求4所述的茜草藥材茜草總蒽醌含量測定的純化方法，其特征在于：步驟2)中，取經預處理的D101型濕樹脂10mL，濕法裝柱，取上柱液40mL，另加水60mL濕法拌樣，使D101型樹脂充分吸收藥液，不間斷搖勻。

7.根據權利要求4所述的茜草藥材茜草總蒽醌含量測定的純化方法，其特征在于：步驟2)中，用6BV的純水進行洗脫；純水洗脫后，使用15BV的75％乙醇進行洗脫。