[發(fā)明專利]短肽ATR001以及由短肽制備具有偏向性調(diào)節(jié)AT1R功能的單克隆抗體和應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710807113.6
• 申請(qǐng)日: 2017-09-08
• 公開（公告）號(hào): CN109467599B
• 公開（公告）日: 2021-06-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳霄
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 武漢華紀(jì)元生物技術(shù)開發(fā)有限公司
• 主分類號(hào): C07K14/72
• 分類號(hào): C07K14/72;C12N5/20;C07K16/28;A61K39/395;A61P9/12;A61P9/10;A61P35/00
• 代理公司: 武漢開元知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 42104
• 代理人: 樊戎;馮超

本發(fā)明公開了一種短肽ATR001以及由短肽制備具有偏向性調(diào)節(jié)AT1R功能的單克隆抗體和應(yīng)用，該短肽ATR001，其氨基酸序列為AFHYESQ，雜交瘤細(xì)胞CQ8?A2D9，其保藏編號(hào)為：CCTCC NO：C2017108。本發(fā)明運(yùn)用單克隆抗體技術(shù)制備針對(duì)AT1R單克隆抗體，且該抗體可以偏向性調(diào)節(jié)AT1R功能，在血管重構(gòu)類疾病，如高血壓、動(dòng)脈粥樣硬化、動(dòng)脈瘤中發(fā)揮治療作用。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及短肽和單克隆抗體，具體地指一種短肽ATR001以及由短肽制備具有偏向性調(diào)節(jié)AT1R功能的單克隆抗體和應(yīng)用。

背景技術(shù)

腎素-血管緊張素系統(tǒng)(RAS)是調(diào)控人體生理功能的重要系統(tǒng)。腎素是由腎臟球旁細(xì)胞產(chǎn)生和分泌的一種蛋白水解酶，可水解血管張素原(AGT)生成血管緊張素Ⅰ(AngⅠ)。心臟、血管、腎、肺等組織中廣泛分布的血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)，可將AngⅠ降解為血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)，此外，AngⅠ也可在組織蛋白酶、彈性蛋白酶、糜酶(chymase)等作用下生成AngⅡ，或由內(nèi)肽酶直接降解為血管緊張素1-7(Ang1-7)等一些列小分子活性物質(zhì)。同時(shí)血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)也可作用于AngⅡ生成血管緊張素1-7(Ang1-7)等活性小分子。

目前研究表明，RAS通過兩種方式發(fā)揮作用：一種是腎球旁細(xì)胞分泌的腎素及肝臟釋放的AGT進(jìn)入血液循環(huán)，通過一系列酶的水解作用生成活性小分子片段發(fā)揮生理作用。另一種是以旁分泌方式在局部生成AngII等活性分子發(fā)揮作用。目前認(rèn)為，AngⅡ是RAS中最主要的生物活性肽，與相應(yīng)受體結(jié)合發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)，其中AT1受體(AT1R)是最關(guān)鍵的一種AngⅡ受體。作為一種G蛋白耦聯(lián)受體(GPCR)，AT1R有典型的七次跨膜α螺旋結(jié)構(gòu)，主要分布在血管、心臟、腎臟、脂肪等組織和器官。AngⅡ和AT1R結(jié)合后發(fā)揮以下作用：

1、縮血管，升血壓；

2、促進(jìn)細(xì)胞增生和肥大；

3、促進(jìn)間質(zhì)纖維化；

4、參與細(xì)胞凋亡；

5、調(diào)節(jié)細(xì)胞代謝；

6、促凝血作用；

7、促進(jìn)醛固酮生成；

8、作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，調(diào)節(jié)水鹽代謝，影響交感神經(jīng)張力。

AT1R在人體血壓調(diào)節(jié)中起重要作用，對(duì)高血壓疾病的發(fā)生發(fā)展發(fā)揮著舉足輕重的作用。有研究表明AngⅡ和AT1R作用，可激活血管內(nèi)皮細(xì)胞膜上的NADH/NADPH氧化酶，誘導(dǎo)產(chǎn)生超氧陰離子(O^2-)，O^2-一方面可直接收縮血管，另一方面可與NO相互作用，抑制NO的舒血管作用，并可促進(jìn)H₂O₂、NO₂、PGF2等縮血管物質(zhì)的產(chǎn)生。此外，AngⅡ還可刺激內(nèi)皮素的釋放，最終導(dǎo)致血管平滑肌增殖和收縮、內(nèi)皮損傷、血管壁重構(gòu)而引起高血壓病的發(fā)生和發(fā)展。

AT1R也參與了動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生與發(fā)展過程。研究發(fā)現(xiàn)，相比Ldlr^-/-小鼠，AT1R與Ldlr基因雙敲的小鼠能明顯減輕高膽固醇血癥誘導(dǎo)的動(dòng)脈粥樣硬化程度。Wassmann等還研究證實(shí)apoE與AT1R基因雙敲小鼠能有效阻斷高膽固醇飲食所致的血管的氧化應(yīng)激、內(nèi)皮功能失調(diào)、動(dòng)脈粥樣硬化病變形成，且獨(dú)立于血壓和血脂水平。進(jìn)一步研究表明，AngⅡ通過AT1R激活血管內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞膜上的NADP/NADPH氧化酶，產(chǎn)生的O^2-，進(jìn)而活化NFκB，啟動(dòng)MCP-1表達(dá)，促使血中單核/巨噬細(xì)胞向血管壁聚集并遷移至內(nèi)皮下，隨后向炎癥表型變化，參與泡沫細(xì)胞的形成等動(dòng)脈粥樣硬化早期病變。