[發(fā)明專利]一種酶制劑的飼用活性評(píng)估方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710795533.7
• 申請(qǐng)日: 2017-09-06
• 公開（公告）號(hào): CN108330166A
• 公開（公告）日: 2018-07-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王玲玲;魏泓;劉建華;韋秀姣
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 深圳市百澳飛生物技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): C12Q1/68
• 分類號(hào): C12Q1/68;C12Q1/04;G01N33/569;G06F19/10;A23K20/189
• 代理公司: 深圳市隆天聯(lián)鼎知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 44232
• 代理人: 劉抗美;周惠來

本發(fā)明提供了一種酶制劑的飼用活性評(píng)估方法，包括：使用添加有待評(píng)估酶制劑的飼料飼喂動(dòng)物，同時(shí)設(shè)置對(duì)照組；取飼喂動(dòng)物糞便，通過16S rDNA測(cè)序方法分別得出動(dòng)物腸道菌群狀況；對(duì)比對(duì)照組，評(píng)估動(dòng)物腸道菌群狀況是否具備正向調(diào)節(jié)的飼用活性。本發(fā)明還提供了一種酶制劑飼用活性的綜合評(píng)估方法，結(jié)合動(dòng)物腸道菌群狀況以及飼喂動(dòng)物性狀指標(biāo)進(jìn)行綜合的評(píng)估。本發(fā)明提供的評(píng)估方法從動(dòng)物腸道菌群方面出發(fā)，依托宏基因組技術(shù)，建立了一種全新的酶制劑飼用效果評(píng)估方法，填補(bǔ)了目前酶制劑功效評(píng)估方面的空白，并為其他飼料添加劑的評(píng)估方式開拓了新的思路。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及飼料及飼料添加劑領(lǐng)域，具體涉及一種酶制劑的飼用活性評(píng)估方法。

背景技術(shù)

隨著畜牧業(yè)的不斷發(fā)展，飼用酶制劑的應(yīng)用也越發(fā)成熟。不僅單酶品種繁多，各種特色復(fù)合酶也層出不窮。雖然酶制劑的作用效果得到了廣泛認(rèn)可，但我國(guó)對(duì)其相關(guān)活性指標(biāo)卻沒有統(tǒng)一的規(guī)定。

目前，在評(píng)價(jià)酶制劑質(zhì)量的時(shí)候，往往過于依賴檢測(cè)酶制劑酶活的方法，但是用酶活來評(píng)估酶制劑在動(dòng)物生產(chǎn)中的實(shí)際效果是不科學(xué)的，酶活高低并不能用來預(yù)測(cè)產(chǎn)品的相對(duì)性能。因?yàn)椋谝唬瑴y(cè)定酶活的條件和飼料復(fù)合酶在動(dòng)物體內(nèi)發(fā)揮作用的條件不同，高酶活不代表高飼用效果；第二、測(cè)定酶活受底物的種類和供應(yīng)情況影響較大；第三，測(cè)定酶活時(shí)都是測(cè)定單一酶的酶活，不能很好地反映復(fù)合酶的組合效應(yīng)。因此，迫切需要一種更加全面、更加準(zhǔn)確、具有實(shí)際參考意義的酶制劑飼用活性評(píng)估方法。

發(fā)明內(nèi)容

為填補(bǔ)酶制劑的飼用活性評(píng)估方面的空白，本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種酶制劑的飼用活性評(píng)估方法，可準(zhǔn)確、客觀評(píng)估酶制劑在畜牧飼料領(lǐng)域作為添加成分的飼用效果。

本發(fā)明提供的酶制劑的飼用活性評(píng)估方法包括以下步驟：

S1：使用添加有待評(píng)估酶制劑的飼料飼喂動(dòng)物，同時(shí)設(shè)置不含所述酶制劑的飼料飼喂動(dòng)物作為對(duì)照組；

S2：取飼喂動(dòng)物糞便，通過16S rDNA測(cè)序方法分別得出動(dòng)物腸道菌群狀況；以及

S3：對(duì)比對(duì)照組，評(píng)估動(dòng)物腸道菌群狀況是否具備以下特征：有益菌菌群豐度上調(diào)、致病菌菌群豐度下調(diào)或消失；如果具有該特征，則判定所述酶制劑具有腸道菌群正向調(diào)節(jié)的飼用活性，反之，則判定所述酶制劑具有腸道菌群負(fù)向調(diào)節(jié)的飼用活性。

具有腸道菌群正向調(diào)節(jié)活性的酶制劑添加至飼料后可改善動(dòng)物腸道菌群結(jié)構(gòu)和機(jī)體代謝，從而有利于提高飼喂動(dòng)物的生長(zhǎng)性能，由此可反映出酶制劑具備良好的飼用活性。反之，腸道菌群負(fù)向調(diào)節(jié)的飼用活性由于致病菌的增多而有益菌的減少勢(shì)必會(huì)引起飼喂動(dòng)物的腹瀉等腸道疾病，無法達(dá)到改善動(dòng)物生長(zhǎng)性能的目的，由此可說明酶制劑不具備良好的飼用活性，不適合用作飼料添加劑。

本發(fā)明所述的評(píng)估方法中，所述的有益菌可以包含飼喂動(dòng)物腸道菌群中的所有有益菌種類，都可作為反映腸道菌群狀況的指標(biāo)。進(jìn)一步地，可以選用常見的幾種腸道有益菌如擬桿菌、梭菌、雙歧桿菌、乳桿菌、乳酸桿菌等的豐度來反映腸道菌群狀況。

本發(fā)明所述的評(píng)估方法中，所述的致病菌可以包含飼喂動(dòng)物腸道菌群中的所有致病菌種類，都可作為反映腸道菌群狀況的指標(biāo)。進(jìn)一步地，可以選用常見的幾種腸道致病菌如腸球菌、大腸桿菌、沙門氏菌、葡萄球菌等的豐度來反映腸道菌群狀況。

本發(fā)明所述的評(píng)估方法中，所述待評(píng)估酶制劑可以為單一種類的酶制劑，也可以為多種類的復(fù)合酶制劑。

本發(fā)明所述的評(píng)估方法中，所述步驟S2包括：取飼喂動(dòng)物的糞便之后，構(gòu)建所述動(dòng)物源菌群的小鼠模型或離體恒化器模型，對(duì)所述小鼠或所述離體恒化器模型的菌群進(jìn)行16S rDNA測(cè)序從而得出動(dòng)物腸道菌群狀況；或取飼喂動(dòng)物的糞便之后，直接進(jìn)行16S rDNA測(cè)序從而得出動(dòng)物腸道菌群狀況。

本發(fā)明所述的評(píng)估方法中，所述步驟S1中的動(dòng)物的飼喂時(shí)間為8～15天。