[發(fā)明專利]檢測(cè)溶液中多巴胺濃度的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710765619.5
• 申請(qǐng)日: 2017-08-30
• 公開（公告）號(hào): CN107525837B
• 公開（公告）日: 2019-04-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 肖琦;黃珊;李家文
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣西師范學(xué)院
• 主分類號(hào): G01N27/327
• 分類號(hào): G01N27/327;G01N27/48
• 代理公司: 北京遠(yuǎn)大卓悅知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11369
• 代理人: 靳浩

1.一種檢測(cè)溶液中多巴胺濃度的方法，其特征在于，其包括以下步驟：

步驟一、以蔗糖為主要原料制備濃度為5mg/mL的碳點(diǎn)溶液，4℃保存?zhèn)溆茫?/p>

其中，所述碳點(diǎn)溶液的制備方法具體為：稱取1g蔗糖放在燒杯中，向燒杯中依次加入2mL去離子水和2mL濃磷酸，將燒杯超聲5min使蔗糖完全溶解；然后將燒杯放入80℃下的水浴中加熱，50min后取出燒杯自然冷卻，待燒杯冷卻至室溫后在冰水浴條件下加入6mL的乙二胺，攪拌均勻后成糊狀；然后加水溶解，將所得溶液用剪切分子量為500的透析袋透析72h，得第一物料，將所述第一物料經(jīng)過冷凍真空干燥法得固體的第二物料，取所述第一物料加入去離子水制得濃度為5mg/mL的溶液，即得碳點(diǎn)溶液；

步驟二、用濃度為3mg/mL氨基化還原氧化石墨烯和步驟一得到的所述碳點(diǎn)溶液，對(duì)玻碳電極進(jìn)行修飾，玻碳電極進(jìn)行修飾的具體方法為：

步驟a、依次用0.5μm，0.3μm和0.05μm的α-A12O3粉末對(duì)玻碳電極表面進(jìn)行打磨成鏡面，用超純水將玻碳電極表面沖洗干凈，然后將玻碳電極依次置于三重蒸餾水和乙醇中超聲處理，每次超聲處理時(shí)間為10min，將超聲處理完成后的玻碳電極用超純水清洗，然后置于室溫下晾干，得預(yù)處理的玻碳電極；

步驟b、取1mL濃度為3mg/mL的氨基化還原氧化石墨烯超聲處理5min，然后用移液槍移取5μL超聲處理后的氨基還原氧化石墨烯，滴加在步驟a中得到的預(yù)處理的玻碳電極的表面，然后置于GJ-1A型紅外線快速干燥箱下干燥20min后取出，冷卻至室溫，得第一修飾玻碳電極；

步驟c、用移液槍移取5μL所述碳點(diǎn)溶液滴在第一修飾玻碳電極表面，然后置于GJ-1A型紅外線快速干燥箱下干燥20min后取出，得第二修飾玻碳電極，冷卻至室溫，得修飾的玻碳電極；

步驟d、在已用所述碳點(diǎn)溶液修飾的玻碳電極表面，修飾改性殼聚糖膜，具體操作為：

i、將殼聚糖溶于0.01mol/L硝酸溶液中，得到溶液A，溶液A中殼聚糖的質(zhì)量百分比濃度為5％；向所述溶液A中加入依次加入硝酸銅、對(duì)苯醌和稀土鑭，得到溶液B，所述溶液B中二價(jià)銅、對(duì)苯醌和稀土鑭的質(zhì)量百分比濃度分別為0.05％、0.2％和0.005％；

ii、向所述溶液B中加入葡萄糖氧化酶，超聲30min，得到溶液C，葡萄糖氧化酶在溶液C中的質(zhì)量百分比濃度為0.01％，將步驟c中的已用所述碳點(diǎn)溶液修飾的玻碳電極浸泡入所述溶液C中，施加-0.4V恒電位100s，然后置于GJ-1A型紅外線快速干燥箱下干燥20min后取出，冷卻至室溫，即得所述修飾的玻碳電極；

步驟三、制備多種含有不同濃度的多巴胺的PBS緩沖溶液，將所述修飾的玻碳電極作為工作電極組成三電極體系，通過循環(huán)伏安法利用所述三電極體系依次對(duì)以上多種緩沖溶液進(jìn)行檢測(cè)，記錄多種緩沖溶液對(duì)應(yīng)的氧化峰電流值，建立多巴胺濃度與氧化峰電流值的關(guān)系方程式；

步驟四、將待測(cè)未知濃度的多巴胺加入至PBS緩沖溶液中制得待測(cè)緩沖溶液，采用步驟三中的所述三電極體系對(duì)待測(cè)緩沖溶液進(jìn)行檢測(cè)，記錄所述待測(cè)緩沖溶液對(duì)應(yīng)的氧化峰電流值，并將該氧化峰電流值帶入步驟三中的關(guān)系方程式中，解出未知濃度的多巴胺的濃度。

2.如權(quán)利要求1所述的檢測(cè)溶液中多巴胺濃度的方法，其特征在于，步驟三中不同濃度的多巴胺的PBS緩沖溶液中多巴胺的濃度分別為1×10^-5mol/L、2×10^-5mol/L、3×10^-5mol/L、5×10^-5mol/L、7×10^-5mol/L、1×10^-4mol/L、2×10^-4mol/L和3×10^-4mol/L。

3.如權(quán)利要求2所述的檢測(cè)溶液中多巴胺濃度的方法，其特征在于，步驟三中制備不同濃度對(duì)的多巴胺的PBS緩沖溶液時(shí)，選用的PBS的濃度均為0.1mol/L，pH值為6.0。

4.如權(quán)利要求3所述的檢測(cè)溶液中多巴胺濃度的方法，其特征在于，步驟三中采用循環(huán)伏安法掃描時(shí)的各項(xiàng)參數(shù)為：初始電位-0.4V、最高電位1V、最低點(diǎn)位-0.4V、最終電位-0.4V、掃描速率0.05V/s、掃描次數(shù)2次、靈敏度10^-4A/V、等待時(shí)間為2s。