[發明專利]一種GP73 C端抗原的制備及其應用

有效

• 申請號: 201710757834.0
• 申請日: 2017-10-19
• 公開（公告）號: CN107746430B
• 公開（公告）日: 2021-03-23
• 發明（設計）人: 馬茂森;孟超;關素梅;張旭;李保芬;毛茹倩;杜曉丹;周晶金
• 申請（專利權）人: 天津金虹生物科技開發有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C12N15/70;C07K16/18;C12N5/20;G01N33/577
• 代理公司: 天津濱海科緯知識產權代理有限公司 12211
• 代理人: 孫曉鳳

本發明提供一種GP73 C端蛋白，由此制備抗GP73 C端的單克隆抗體，為了解決目前臨床上缺乏GP73定量檢測試劑盒作為肝硬化早期診斷檢測手段的不足，本發明的另一目的在于提供了一種操作簡便、準確靈敏、質量穩定、可大規模生產的檢測試劑盒及其測定方法，以便從蛋白水平上觀察GP73表達含量，能盡早采取有效的綜合治療方案，有效預防肝硬化的進一步惡變。

技術領域

本發明涉及生物醫藥工程技術領域，具體涉及GP73 C端抗原的制備及其應用。

背景技術

肝硬化是各種慢性肝病發展的晚期階段，由一種或多種病因長期或反復作用形成的彌漫性肝損害。在我國大多數為肝炎后肝硬化，少部分為酒精性肝硬化和血吸蟲性肝硬化。病理組織學上有廣泛的肝細胞壞死、殘存肝細胞結節性再生、結締組織增生與纖維隔形成，導致肝小葉結構破壞和假小葉形成，肝臟逐漸變形、變硬而發展為肝硬化。早期由于肝臟代償功能較強可無明顯癥狀，后期則以肝功能損害和門脈高壓為主要表現，并有多系統受累，晚期常出現上消化道出血、肝性腦病、繼發感染、脾功能亢進、腹水以及癌變等并發癥。

引起肝硬化的病因很多，可分為病毒性肝硬化、酒精性肝硬化、代謝性肝硬化、膽汁淤積性肝硬化、肝靜脈回流受阻性肝硬化、自身免疫性肝硬化、毒物和藥物性肝硬化、營養不良性肝硬化及隱源性肝硬化等。

Child－Pugh分級標準是一種臨床上常用的對肝硬化患者的肝臟儲備功能進行量化評估的分級標準，該標準最早由Child于1964年提出，當時Child將患者5個指標(包括一般狀況、腹水、血清膽紅素、血清白蛋白濃度及凝血酶原時間)的不同狀態分為三個層次，分別記以1分，2分和3分，并將5個指標計分進行相加，總和最低分為5分，最高分為15分，從而根據該總和的多少將肝臟儲備功能分為A、B、C三級，預示著三種不同嚴重程度的肝臟損害(分數越高，肝臟儲備功能越差)。但由于患者的一般狀況項常常不易計分，隨后Pugh提出用肝性腦病的有無及其程度代替一般狀況，即如今臨床常用的Child－Pugh改良分級法。

肝硬化又可分為代償期和失代償期肝硬化。代償期肝硬化相當于Child－Pugh標準中的A級，失代償期相當于B和C級。

肝硬化疾病呈現一個慢性過程。在Child－Pugh的任一級，或代償期和失代償期，其病理組織學上均有廣泛的肝細胞壞死、殘存肝細胞結節性再生、結締組織增生與纖維隔形成，導致肝小葉結構破壞和假小葉形成，肝臟逐漸變形、變硬而發展為肝硬化。

肝纖維化是疾病演變中一個連續進展的過程，也是慢性肝病演變為肝硬化的中間必經階段。

臨床上較難將肝纖維化和肝硬化兩者截然區別，但是二者有本質的區別。肝纖維化不是一種獨立的疾病，僅是一種伴隨多種慢性肝病的肝臟病變，肝纖維化是由肝臟內彌漫性細胞外基質(特別是膠原)過度沉積而引起的，肝硬化則是過度纖維化使肝臟萎縮變硬而引起的。

肝纖維化是肝硬化的前期病變，其早期是可逆的，而肝硬化是肝纖維化進一步發展的結果，是多種肝臟疾病的終末期表現，通常較難逆轉。

肝纖維化的病理特點為匯管區和肝小葉內有大量纖維組織增生和沉積，但尚未形成小葉內間隔，肝硬化則有假小葉形成，中心靜脈區和匯管區出現間隔，肝臟的正常結構遭到破壞，肝纖維化進一步發展即為肝硬化。

總之，肝硬化是一種慢性進行性肝病。早期診斷有助于在肝纖維化階段進行有效的治療，使肝臟疾病成為可逆，否者發展成為肝硬化預后較差。

目前診斷肝硬化的輔助檢測方法主要包括：影像學檢查、肝活檢和實驗室的血清學檢測。影像學檢查結果可靠，但是只有肝臟組織結構發生明顯變化時才能發現，因而不利于肝硬化的早期診斷。肝臟活檢可以建立肝硬化的明確診斷，但是由于其創傷性，較難為患者接受。而目前實驗室的血清學檢測均為肝纖維化檢測，很難給出肝硬化的明確診斷。以肝纖維化階段的四項檢查(Ⅲ型前膠原，Ⅳ型膠原，層粘連蛋白和透明質酸酶)為例，肝纖維化四項檢查因為受到肝臟的炎癥影響較大，因此其特異性和靈敏度均不高。