[發(fā)明專利]一種低成本大量培養(yǎng)固氮藍(lán)藻的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710755178.0
• 申請(qǐng)日: 2017-08-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107384832B
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-06-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 彭成榮;張金麗;張?jiān)?/a>;黃順;宋學(xué)寧;李敦海
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院水生生物研究所
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;C12N1/36;C12R1/01
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務(wù)所 42001
• 代理人: 江麗麗;王敏鋒

1.一種低成本大量培養(yǎng)固氮藍(lán)藻的方法，其步驟是：

1)畜禽養(yǎng)殖廢棄物收集與預(yù)處理：從養(yǎng)殖場(chǎng)收集畜禽養(yǎng)殖廢棄物，將固體糞便與液體糞污混合并進(jìn)行固液分離，獲得畜禽養(yǎng)殖廢棄物分離液；

2)畜禽養(yǎng)殖廢棄物分離液營(yíng)養(yǎng)參數(shù)測(cè)定：測(cè)定畜禽養(yǎng)殖廢棄物分離液中的總氮和總磷含量，獲得總氮含量C1mg/L和總磷含量C2mg/L；

3)畜禽養(yǎng)殖廢棄物分離液稀釋：分別以總氮含量C1和總磷含量C2計(jì)算畜禽養(yǎng)殖廢棄物分離液稀釋比例，計(jì)算公式如下：

基于總氮的畜禽養(yǎng)殖廢棄物分離液稀釋倍數(shù)：

基于總磷的畜禽養(yǎng)殖廢棄物分離液稀釋倍數(shù)：

比較D1與D2的大小，如果D1D2，則按照D2的數(shù)值對(duì)畜禽養(yǎng)殖廢棄物分離液進(jìn)行稀釋，反之則按照D1的數(shù)值對(duì)畜禽養(yǎng)殖廢棄物分離液進(jìn)行稀釋，獲得畜禽養(yǎng)殖廢棄物分離稀釋液；

4)固氮藍(lán)藻馴化培養(yǎng)與藻種收集：將固氮藍(lán)藻用液體BG11培養(yǎng)基通氣培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，自然沉降去除上清后獲得藻漿，將畜禽養(yǎng)殖廢棄物分離稀釋液再次稀釋100倍，并加入藻漿中，使藻液的體積與去除上清液之前一致，通氣培養(yǎng)36-48小時(shí)后自然沉降去除上清液獲得馴化藻漿；

5)簡(jiǎn)易型固氮藍(lán)藻培養(yǎng)基JYM配置：以鈣鎂磷肥為基礎(chǔ)，添加微量元素配置成簡(jiǎn)易型低成本固氮藍(lán)藻培養(yǎng)基，其配方為：市售鈣鎂磷肥1.12g·L^-1、1.43mg·L^-1硼酸、0.93mg·L^-1四水氯化錳、0.195mg·L^-1二水鉬酸鈉、0.11mg·L^-1七水硫酸鋅、0.04mg·L^-1五水硫酸銅、0.025mg·L^-1六水硝酸鈷；

6)低成本固氮藍(lán)藻培養(yǎng)基配置：將步驟3)所述的畜禽養(yǎng)殖廢棄物分離稀釋液與簡(jiǎn)易型固氮藍(lán)藻培養(yǎng)基JYM按照體積比為1:1.5～9:1的比例進(jìn)行混合，配置成低成本固氮藍(lán)藻培養(yǎng)基；

7)馴化后固氮藍(lán)藻的接種與培養(yǎng)：馴化后的固氮藍(lán)藻藻漿以O(shè)D₆₈₀＝0.1～0.3接種入低成本固氮藍(lán)藻培養(yǎng)基中進(jìn)行自然培養(yǎng)，即采用自然光照進(jìn)行開(kāi)放式培養(yǎng)，培養(yǎng)過(guò)程中每隔16至24小時(shí)進(jìn)行一次攪拌；

所述的固氮藍(lán)藻為藍(lán)藻門(mén)念珠藻屬、單歧藻屬或魚(yú)腥藻屬中的任意一種。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的低成本大量培養(yǎng)固氮藍(lán)藻的方法，其特征在于，選取魚(yú)腥藻屬中的任意一種進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)，步驟6)所述的低成本固氮藍(lán)藻培養(yǎng)基按照畜禽養(yǎng)殖廢棄物分離稀釋液與簡(jiǎn)易型固氮藍(lán)藻培養(yǎng)基JYM體積比為1:1.5的比例進(jìn)行混合。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的低成本大量培養(yǎng)固氮藍(lán)藻的方法，其特征在于，選取單歧藻屬中的任意一種進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)，步驟6)所述的低成本固氮藍(lán)藻培養(yǎng)基按照畜禽養(yǎng)殖廢棄物分離稀釋液與簡(jiǎn)易型固氮藍(lán)藻培養(yǎng)基JYM體積比為1:1的比例進(jìn)行混合。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的低成本大量培養(yǎng)固氮藍(lán)藻的方法，其特征在于，選取念珠藻屬中的任意一種進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)，步驟6)所述的低成本固氮藍(lán)藻培養(yǎng)基按照畜禽養(yǎng)殖廢棄物分離稀釋液與簡(jiǎn)易型固氮藍(lán)藻培養(yǎng)基JYM體積比為9:1的比例進(jìn)行混合。