[發(fā)明專利]一種用于組織損傷修復(fù)的水凝膠及制備方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710752030.1
• 申請(qǐng)日: 2017-08-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107496348A
• 公開(kāi)（公告）日: 2017-12-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李宗金;張帥強(qiáng);韓之波
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 天津昂賽細(xì)胞基因工程有限公司
• 主分類號(hào): A61K9/06
• 分類號(hào): A61K9/06;A61K31/5575;A61K47/36;A61K47/42;A61P17/02;A61P29/00
• 代理公司: 天津市北洋有限責(zé)任專利代理事務(wù)所12201
• 代理人: 陸藝

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種用于組織損傷修復(fù)的水凝膠及制備方法。

背景技術(shù)

皮膚損傷(Skin Wound)已經(jīng)成為一種嚴(yán)重的健康問(wèn)題。創(chuàng)傷、燒傷、慢性潰瘍等造成大面積皮膚缺損，常形成難以愈合的創(chuàng)面，不僅給患者造成痛苦，而且降低了生活質(zhì)量。當(dāng)前被證明有效的治療方法(包括干細(xì)胞治療和皮膚移植)存在醫(yī)療成本高等缺陷，其使用受到限制。前列腺素E2(Prostaglandin E2,PGE2)是一種重要的細(xì)胞生長(zhǎng)和調(diào)節(jié)因子，其作用為擴(kuò)張血管，增加器官血流量，同時(shí)具有免疫抑制和抗炎作用。并且有報(bào)道稱間充質(zhì)干細(xì)胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)可以通過(guò)調(diào)控局部炎癥反應(yīng)而發(fā)揮促進(jìn)皮膚愈合的作用。其中的作用機(jī)制可能是，MSCs分泌的PGE2誘導(dǎo)了巨噬細(xì)胞向M2型極化，促進(jìn)了IL-10的分泌，進(jìn)而發(fā)揮抗纖維化和減少膠原蛋白沉積的作用。因此，這使我們想確定在外源性PGE2的刺激下是否能使巨噬細(xì)胞發(fā)生M2型的極化。然而，單純的PGE2半衰期短，與細(xì)胞的接觸時(shí)間比較短，這一特性大大降低了PGE2的單獨(dú)使用價(jià)值。

殼聚糖、膠原、纖維蛋白和透明質(zhì)酸作為一類天然大分子化合物，具有較好的組織相容性、生物可降解性及豐富的生物學(xué)活性。以這些天然大分子化合物為基礎(chǔ)的多種類型支架材料已經(jīng)在再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域顯示出重要的應(yīng)用價(jià)值，因此，利用這類生物材料具有網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的特征，將其形成的水凝膠包被上特定的生物活性分子，從而制成生物活性水凝膠，這種水凝膠能夠緩慢釋放特定生長(zhǎng)因子，釋放的生長(zhǎng)因子與組織細(xì)胞相互作用可以改善局部微環(huán)境，增強(qiáng)細(xì)胞的生物學(xué)作用，并加快組織的修復(fù)和再生。目前，尚未有將含有PGE2水凝膠的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種用于組織損傷修復(fù)的水凝膠。

本發(fā)明的第二個(gè)目的是提供一種用于組織損傷修復(fù)的水凝膠的制備方法。

本發(fā)明的第三個(gè)目的是提供一種用于組織損傷修復(fù)的水凝膠的在制備皮膚損傷修復(fù)制劑中的應(yīng)用。

本發(fā)明的技術(shù)方案概述如下：

一種用于組織損傷修復(fù)的水凝膠的制備方法，包括如下步驟：

(1)使用無(wú)菌蒸餾水溶解水凝膠材料，2-8℃溶脹12-24小時(shí)，獲得水凝膠；

(2)將PGE2粉末溶于磷酸鹽緩沖液中制成濃度為0.1mg/ml-5mg/ml的PGE2溶液，按質(zhì)量比為1:1-4的比例，將所述PGE2溶液滴加到步驟(1)獲得的水凝膠中，在2-8℃條件下，攪拌3-5小時(shí)；2-8℃保存或在-18--22℃凍存，所述PGE2為前列腺素E2的簡(jiǎn)寫(xiě)。

所述水凝膠材料優(yōu)選為殼聚糖、膠原、透明質(zhì)酸和纖維蛋白中至少一種。

所述水凝膠中水凝膠材料的質(zhì)量含量為0.01％-5％。

上述方法制備的用于組織損傷修復(fù)的水凝膠。

上述用于組織損傷修復(fù)的水凝膠在制備皮膚損傷修復(fù)制劑中的應(yīng)用。

本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)：

本發(fā)明的用于組織損傷修復(fù)的水凝膠能夠一定程度的延長(zhǎng)PGE2的釋放時(shí)間。直接用于組織損傷的治療，可以促進(jìn)損傷皮膚組織學(xué)和功能學(xué)的恢復(fù)。可以誘導(dǎo)損傷位點(diǎn)巨噬細(xì)胞向M2型極化抑制炎癥反應(yīng)，加速了損傷的愈合，并在早期促進(jìn)了損傷部位的血管新生。此外，本發(fā)明的水凝膠無(wú)細(xì)胞毒性，可直接涂抹于創(chuàng)傷表面，使用方便，價(jià)格低廉，并具有有效的治療作用。

本發(fā)明的水凝膠，涂抹于皮膚損傷部位可以實(shí)現(xiàn)PGE2的緩慢釋放，延長(zhǎng)PGE2與損傷部位組織細(xì)胞的作用時(shí)間，改善損傷部位的微環(huán)境，從而為皮膚損傷的修復(fù)治療提供新的視角。

本發(fā)明以殼聚糖、膠原、纖維蛋白和透明質(zhì)酸包被的PGE2水凝膠，這類水凝膠具有緩慢釋放PGE2和促進(jìn)巨噬細(xì)胞向M2型極化的特性，還涉及這類PGE2水凝膠在以皮膚損傷為特征的疾病的局部涂抹治療中，能夠抑制了損傷部位炎癥，增強(qiáng)損傷部位血管新生因子表達(dá)，改善損傷皮膚血管新生，促進(jìn)皮膚損傷修復(fù)的作用。

附圖說(shuō)明

圖1表示用于組織損傷修復(fù)的水凝膠的溫度穩(wěn)定性。

圖2用PGE2、PGE2水凝膠處理細(xì)胞檢查不同時(shí)間點(diǎn)培養(yǎng)液PGE2水平。其中A用PGE2處理細(xì)胞檢查不同時(shí)間點(diǎn)培養(yǎng)液PGE2水平，B用PGE2水凝膠處理細(xì)胞檢查不同時(shí)間點(diǎn)培養(yǎng)液PGE2水平

圖3評(píng)估適宜的用于組織損傷修復(fù)的水凝膠濃度。