[發(fā)明專利]復(fù)合肝素生物抗凝涂層液及制備方法與應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710748820.2
• 申請日: 2017-08-28
• 公開（公告）號: CN107376037A
• 公開（公告）日: 2017-11-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 嚴(yán)拓;歐陽晨曦;劉雅文;劉思詩;劉園
• 申請（專利權(quán)）人: 武漢楊森生物技術(shù)有限公司
• 主分類號: A61L33/12
• 分類號: A61L33/12;A61L33/10;A61L33/04
• 代理公司: 廣州粵高專利商標(biāo)代理有限公司44102
• 代理人: 倪婭,陳衛(wèi)

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種復(fù)合肝素生物抗凝涂層液及制備方法與應(yīng)用，屬于生物醫(yī)用材料技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

隨著人們生活水平的提高，動脈粥樣硬化，血管栓塞以及動脈瘤等心血管疾病對人類的健康造成了極大的威脅。因上述疾病等原因?qū)е氯梭w自身血管無法正常供血時，則需采用人工血管進(jìn)行外科更換手術(shù)。人體內(nèi)血管口徑由2mm至30mm不等，在這其中，小口徑(直徑<6mm)極易發(fā)生內(nèi)膜增生以及血栓形成，進(jìn)而導(dǎo)致小口徑血管遠(yuǎn)期通暢率低。目前，醫(yī)院手術(shù)中使用的人造血管材料多為ePTFE，PU等材料，但這些材料本身不具備良好的抗凝血性能，需在材料表面進(jìn)行抗凝血涂層。

現(xiàn)有常用的抗凝血涂層有肝素涂層，其涂層方法各異，不同的方法所制備的肝素涂層材料性能也有所差異。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種復(fù)合肝素生物抗凝涂層液及制備方法與應(yīng)用。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明所提供的復(fù)合肝素生物抗凝涂層液中包含有交聯(lián)狀態(tài)的聯(lián)氨基姜黃素-肝素。

本發(fā)明的復(fù)合肝素生物抗凝涂層液中起效的部分為交聯(lián)狀態(tài)的聯(lián)氨基姜黃素-肝素。所述聯(lián)氨基姜黃素通過其上的氨基與肝素交聯(lián)。

本發(fā)明還提供了一種上述復(fù)合肝素生物抗凝涂層液的制備方法，步驟如下：

將聯(lián)氨基姜黃素溶解于乙醇溶液中，配置成姜黃素醇溶液，向姜黃素醇溶液中加入MES緩沖液，再加入肝素，然后再加入EDC和NHS交聯(lián)劑，攪拌1～2h，使聯(lián)氨基姜黃素中的氨基與肝素充分反應(yīng)，將反應(yīng)完成的溶液放入透析袋透析24～72h，透析完成后，得到復(fù)合肝素生物抗凝涂層液。

上述方案中，所述聯(lián)氨基姜黃素和肝素的添加重量比為1～10:40。該比例是聯(lián)安姜黃素和肝素的較佳反應(yīng)比值，本發(fā)明中的有效成分為交聯(lián)狀態(tài)的聯(lián)氨基姜黃素-肝素，所以只要能夠生成它的聯(lián)氨基姜黃素和肝素任意配比添加量都是可以使用的。

需要說明的是，上述涂層液在單獨(dú)作為涂層液使用時效果并不理想，它需要和生物活性蛋白聯(lián)用發(fā)揮功效。如膠原蛋白、絲素蛋白、粘連蛋白。在研究過程中，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)在一定的配比下，聯(lián)氨基姜黃素-肝素和絲素蛋白聯(lián)用有較好的效果。

因此，本發(fā)明還提供了一種聯(lián)氨基姜黃素-肝素及絲素蛋白的生物抗凝涂層液，所述生物抗凝涂層液中包含有交聯(lián)狀態(tài)的聯(lián)氨基姜黃素-肝素，還包括絲素蛋白；所述生物抗凝涂層液中所述聯(lián)氨基姜黃素-肝素在的濃度為0.5～5％wt，所述絲素蛋白的濃度為5～15％wt，且聯(lián)氨基姜黃素-肝素與絲素蛋白的濃度比值為1:1～10。

本發(fā)明利用姜黃素具有的抗組織增生、抗炎癥反應(yīng)等特性，將它和肝素結(jié)合在一起，以克服植入性醫(yī)療器械(如人造血管)在植入人體之后易發(fā)生的問題(如凝血作用會導(dǎo)致血小板聚集引起血栓導(dǎo)致血管再次狹窄，而組織過度增生和炎性反應(yīng)也會引起排異反應(yīng)而導(dǎo)致血管狹窄，最終使人造血管等植入器械的生物相容性變差而植入失敗)。

本發(fā)明的有益效果：現(xiàn)代藥理研究表明姜黃素類成分具有抗凝血、抗組織增生、抗炎性反應(yīng)等多種藥理作用，本發(fā)明將姜黃素與肝素兩者連用不僅可以增強(qiáng)肝素涂層的抗凝血功能，還能起到單純用肝素或蛋白等涂層所無法達(dá)到的抗組織增生、抗炎性反應(yīng)等功能，對于人造血管、血管支架、血管補(bǔ)片等植入器械在人體內(nèi)減少血栓形成，降低術(shù)后并發(fā)癥，提高產(chǎn)品的使用壽命至關(guān)重要。

具體實(shí)施方式

以下結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)描述。

需要說明的是，下述例子中使用的人造血管(ePTFE)在涂層之前均經(jīng)過前處理，以提高其對涂層的結(jié)合力，使生物涂層能夠穩(wěn)定且有效的發(fā)揮抗凝血等功能。

人造血管(ePTFE)基材，前處理過程如下：

第一層

將ePTFE人造血管浸沒于異丙醇(IPA)5～10mins，然后用鑷子取出再浸泡于4％聚乙烯亞胺(PEI)和IPA混合液(體積比PEI:IPA＝1:1)15～30mins后，取出浸泡的人造血管，用去離子水浸泡沖洗人造血管。待沖洗完后，將人造血管放置于0.05％戊二醛溶液中15～20mins進(jìn)行交聯(lián)，待反應(yīng)完成后將人造血管再次浸泡在0.5％PEI溶液中15～30mins，用去離子水對構(gòu)造后的人造血管進(jìn)行浸泡沖洗。沖洗完成后，將人造血管浸泡在氰基硼氫化鈉溶液中反應(yīng)15～30mins，反應(yīng)完成后用去離子水浸泡沖洗。

第二層