[發明專利]一種人臍帶間充質干細胞的儲存液

有效

• 申請號: 201710746062.0
• 申請日: 2017-08-26
• 公開（公告）號: CN107410288B
• 公開（公告）日: 2020-07-31
• 發明（設計）人: 劉劼;朱益輝;孫毅;胡敏;曾赤佳;陸軍;薛婷;陳彩琴;廖方圓;黃明輝
• 申請（專利權）人: 劉劼;朱益輝;孫毅;胡敏;曾赤佳;陸軍;薛婷;陳彩琴;廖方圓;黃明輝
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明提供一種人臍帶間充質干細胞的儲存液，屬于干細胞生物學領域，是適合臨床應用的干細胞儲存液的組合物。采用多種活性成分對儲存條件進行優化，是含有氯化鈉、白蛋白、腺苷、血管緊張素?II、氯化鋰、黃酮類化合物、肝素以及人臍帶間充質干細胞來源的外泌體、短肽和多肽類化合物的混合水溶液。在上述儲存液中，人臍帶間充質干細胞在4℃條件下在3天內的細胞活性保持在90%以上，且細胞表型穩定；在?20℃條件下在7天內的細胞活性仍能保持在90%以上，細胞表型同樣穩定。這種儲存液保證了干細胞的質量穩定，能夠實現干細胞的遠距離運送，為臨床干細胞的廣泛應用奠定了基礎。

技術領域

本發明涉及干細胞生物學領域，具體涉及一種人臍帶間充質干細胞儲存液。

背景技術

人臍帶間充質干細胞作為一種廣泛應用的干細胞，其取材方便，易于分離，免疫原性低，具有多向分化潛能等優點，可應用于臨床疾病治療，同時也可應用于機體的抗衰老。隨著干細胞技術在生物治療領域的規范化應用，尤其是在治療高血壓、冠狀動脈粥樣硬化等慢性疾病方面的優勢，能從整體上提高機體功能和生活質量，已被人們廣泛關注并越來越多的應用到臨床。

人臍帶間充質干細胞的儲存壞境與細胞的長期活性有密切關系，儲存液的微環境對人臍帶間充質干細胞有著重要影響，當儲存環境出現變化的時候可直接影響干細胞的形態、增殖、分化、凋亡和衰老，并且細胞的生物學特性和遺傳穩定性都可能發生變化，因此優化干細胞的儲存條件將為干細胞技術的規范化應用起到積極意義。

目前人臍帶間充質干細胞在臨床上已經廣泛應用，但也存在受儲存條件限制而不能大規模應用的問題。人臍帶間充質干細胞在目前常用的儲存液條件下，常溫下很快衰老，限制了人臍帶間充質干細胞在臨床應用上的規模化生產和遠距離供應。另外，在臨床應用中，人臍帶間充質干細胞制劑需要完成無菌、活性等質量檢驗后才能注射到人體，這些檢驗需要較長的時間才能獲得可靠結果。而現在常用的低溫凍存對細胞損傷較大且解凍后不能直接注射到人體，因此在干細胞制劑的質量檢驗期間，合適的儲存液是臨床應用的基礎。

在臨床應用過程中，人臍帶間充質干細胞常常做為種子細胞在損傷部位聚集、增殖、分化，以及分泌多種修復營養因子，而目前的儲存液缺乏必要的生存條件及營養成分，使人臍帶間充質干細胞在保存過程中活性下降，進而影響實際治療效果。在實際臨床應用中如果將人臍帶間充質干細胞保存在專門配制的儲存液中，將會有效發揮人臍帶間充質干細胞的治療作用。

因此需要一種專門配制的儲存液能實現以下優勢：1）在3天（72小時）內，4℃條件下保存的人臍帶間充質干細胞的活性維持在90%以上，并且儲存液的成分符合醫用標準對人體安全可靠，這樣儲存的人臍帶間充質干細胞制劑復溫以后可直接注射到人體；2）7天（168小時）內，-20℃條件下保存的人臍帶間充質干細胞的活性維持在90%以上，在應用上能夠實現規模化生產和遠距離運送。

發明內容

為了解決人臍帶間充質干細胞在儲存過程中的上述問題，本發明提供了一種人臍帶間充質干細胞儲存液的配比組合方案，該儲存液的各種成分均為經過臨床驗證可直接用于人體的成分或干細胞自身的產物。

本發明的技術方案如下：

一種人臍帶間充質干細胞的儲存方案,其中采用多種活性成分對干細胞儲存條件進行優化，是含有氯化鈉、白蛋白、腺苷、血管緊張素-II、氯化鋰、黃酮類化合物、肝素、人臍帶間充質干細胞來源的外泌體、短肽和多肽類化合物的混合水溶液。各成分的濃度可以為：

氯化鈉，8.5-10g/L；

白蛋白，10-80g/L；

腺苷，0.5-2mmol/L；

血管緊張素-II，50-400ng/mL；

氯化鋰，1-8mmol/L；

黃酮類化合物，40-320umol/L；