[發明專利]一種粉防己生物堿的制備方法

在審

• 申請號: 201710713252.2
• 申請日: 2017-08-18
• 公開（公告）號: CN107496508A
• 公開（公告）日: 2017-12-22
• 發明（設計）人: 王亞
• 申請（專利權）人: 合肥豐潔生物科技有限公司
• 主分類號: A61K36/59
• 分類號: A61K36/59;C07G5/00;A61P9/12;A61P9/10;A61P9/06;A61P29/00;A61P37/06;A61P35/00
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技術領域

本發明涉及生物技術領域，具體是一種粉防己生物堿的制備方法。

背景技術

粉防己為防己科千金藤屬植物粉防己的塊根，是我國常用中草藥之一，具祛風除濕、利尿消腫、行氣止痛的作用。粉防己的主要活性成分是生物堿，例如粉防己堿、防己諾林堿等。粉防己生物堿，具有抗高血壓、抗心肌缺血及再灌注損傷、抗心律失常、抗炎及免疫抑制、抗腫瘤廣泛的生理活性作用。

雖然近年來在粉防己生物堿提取方面出現研究報告和專利文件，但大多基于色譜柱的方法分離、提純，其間使用到大量的輔助制劑，如高濃度乙醇等，工序較為復雜，提純工序存在諸多干擾因素，制約了粉防己生物堿的制備純度。

發明內容

本發明的目的在于提供一種粉防己生物堿的制備方法，以解決上述背景技術中提出的問題。

為實現上述目的，本發明提供如下技術方案：

一種粉防己生物堿的制備方法，通過以下步驟實現：

S1，取用100重量份的粉防己藥材，通過研磨機研磨，得到粗粉；

S2，向粗粉中加入0.5%H2SO4溶液，充分攪拌，得到酸水滲漉液；

S3，向酸水滲漉液中緩慢加入新鮮石灰乳，調節pH值至9-10，靜置15分鐘后抽濾，去除堿水液得到泥黃色沉淀；

S4，向泥黃色沉淀中加入凈沙，并攪拌至充分混合，放置到80℃烘干箱內烘干，隨后分批引入索氏提取器中用乙醚多次提取至生物堿提盡，回收乙醚，得到乙醚提取物；

S5，用95%、40-60ml乙醇溶液回流熱溶，傾倒入500ml水中，加入30重量份的NaCl溶液進行鹽析，隨后加熱至凝結，靜置直到完全沉淀，進行抽濾，得到含有粉防己甲素和粉防己乙素的白色沉淀；

S6，低壓柱層析分離，具體方法為：

S61，采用減壓干法裝法裝柱，所裝硅膠至少30重量份；

S62，加少量丙酮熱溶，用滴管加到1.5g硅膠上，仔細拌勻，水浴上蒸干，碾細，后加入白色沉淀，并保持其表面平整；

S63，洗脫，滴管順層析柱柱壁仔細加入少量洗脫劑，當液面達到一定高度時，再一次加入其余洗脫劑，共約250ml，調動所需壓力，0.6-1.2kg/cm2，約40分鐘后流出，控制流速1ml/分，每10分鐘左右一管，收12-15份，洗脫全過程約3小時；

S64，各流份分別移入小玻璃蒸發器中，于水浴上濃縮，以漢防已甲素、乙素為標準品對照，合并相同組分，分別獲得甲、乙素粗品，用丙酮重結晶，得到生物堿純品。

作為本發明進一步的方案：步驟S2中，所加0.5%H2SO4溶液的量以能將生藥粉末潤濕為準，并充分拌勻，放置半小時。

作為本發明進一步的方案：步驟S4中，凈沙必須事前洗凈烘干，拌和量優選低于120重量份。

作為本發明進一步的方案：步驟S4中，檢查生物堿是否提盡的方法為：取最后一次乙醚提取液約數滴，揮去乙醚，殘渣加5%HCl 0.5ml溶解后，加改良碘化鉍鉀試劑一滴，無沉淀折出或明顯渾濁時，表明生物堿已提盡，反之，應繼續提取。

作為本發明進一步的方案：所述洗脫劑優選為環已烷-慚酸乙酯-二乙胺按6：2：0.8的比例混合溶液。

與現有技術相比，本發明的有益效果是：本發明通過酸液滲漉的方式對原材進行處理，能夠預先去除較多的非需堿物質，如輪環藤酚堿等，簡化了后續分離的工序，而通過低壓柱層析分離的方法可高效、快速地將粉防已甲素和乙素完全分離分離，互不摻雜，純度很高，品質好。

具體實施方式

下面對本發明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本發明一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本發明中的實施例，本領域普通技術人員在沒有做出創造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發明保護的范圍。

本發明實施例中，一種粉防己生物堿的制備方法，通過以下步驟實現：

S1，取用100重量份的粉防己藥材，通過研磨機研磨，得到粗粉；

S2，向粗粉中加入0.5%H2SO4溶液，充分攪拌，得到酸水滲漉液；

S3，向酸水滲漉液中緩慢加入新鮮石灰乳，調節pH值至9-10，靜置15分鐘后抽濾，去除堿水液得到泥黃色沉淀；

S4，向泥黃色沉淀中加入凈沙，并攪拌至充分混合，放置到80℃烘干箱內烘干，隨后分批引入索氏提取器中用乙醚多次提取至生物堿提盡，回收乙醚，得到乙醚提取物；