[發(fā)明專利]一種固定脂肪酶的方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201710705934.9
• 申請日: 2017-08-17
• 公開（公告）號: CN109402103A
• 公開（公告）日: 2019-03-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周萬芳
• 申請（專利權(quán)）人: 周萬芳
• 主分類號: C12N11/08
• 分類號: C12N11/08;C12N9/20
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明公開了一種固定脂肪酶的方法，包括以下步驟：(1)二乙烯苯、丙烯酸酯和過氧化苯甲酰加入有機(jī)溶劑混合，加熱攪拌交聯(lián)；(2)將交聯(lián)后的物質(zhì)沉淀，過濾；(3)將過濾后的物質(zhì)與脂肪酶混合，攪拌，過濾，得成品。本發(fā)明方法能夠高效地固定脂肪酶，并且酶活力高。可大規(guī)模的生產(chǎn)固定化脂肪酶。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及酶固定方法，特別涉及一種固定脂肪酶的方法。

背景技術(shù)

脂肪酶(Lipase，甘油酯水解酶)隸屬于羧基酯水解酶類，能夠逐步的將甘油三酯水解成甘油和脂肪酸。脂肪酶存在于含有脂肪的動(dòng)、植物和微生物(如霉菌、細(xì)菌等)組織中。包括磷酸酯酶、固醇酶和羧酸酯酶。脂肪酸廣泛的應(yīng)用于食品、藥品、皮革、日用化工等方面。

脂肪酶是重要的工業(yè)酶制劑品種之一，可以催化解脂、酯交換、酯合成等反應(yīng)，廣泛應(yīng)用于油脂加工、食品、醫(yī)藥、日化等工業(yè)。不同來源的脂肪酶具有不同的催化特點(diǎn)和催化活力。其中用于有機(jī)相合成的具有轉(zhuǎn)酯化或酯化功能的脂肪酶的規(guī)模化生產(chǎn)對于酶催化合成精細(xì)化學(xué)品和手性化合物有重要意義。

固定化脂肪酶是將脂肪酶通過物理或化學(xué)的方法與某種物體結(jié)合制備成為不溶于水的，但仍具有催化活性的復(fù)合體，這一過程是將單體的游離脂肪酶轉(zhuǎn)變成了被某種物體束縛的復(fù)合脂肪酶催化劑。

發(fā)明內(nèi)容

發(fā)明目的：本發(fā)明提供一種固定脂肪酶的方法，可以高效固定脂肪酶，并且保留脂肪酶的活性。

技術(shù)方案：本發(fā)明所述一種固定脂肪酶的方法，包括以下步驟：(1)二乙烯苯、丙烯酸酯和過氧化苯甲酰加入有機(jī)溶劑混合，加熱攪拌交聯(lián)；(2)將交聯(lián)后的物質(zhì)沉淀，過濾；(3)將過濾后的物質(zhì)與脂肪酶混合，攪拌，過濾，得成品。

步驟(1)中，所述二乙烯苯、丙烯酸酯和過氧化苯甲酰質(zhì)量比為1:1-2:1-4。

步驟(1)中，所述有機(jī)溶劑為二甲苯、N,N-二甲基甲酰胺或丙酮中的一種。

步驟(1)中，所述加熱為溫度在50-60℃。

步驟(3)中，所述交聯(lián)后物質(zhì)與脂肪酶質(zhì)量比為1-2:1。

有益效果：本發(fā)明方法能夠高效地固定脂肪酶，并且酶活力高。可大規(guī)模的生產(chǎn)固定化脂肪酶。

具體實(shí)施方式

一、原料來源

1、脂肪酶為柱狀假絲酵母脂肪酶，購自Sigma公司。

2、二乙烯苯、丙烯酸酯和過氧化苯甲酰市購所得。

3、其余試劑均為分析純。

二、檢測方法

1、脂肪酶活力測定方法

參照橄欖油水解法測定，37℃下，每分鐘水解底物產(chǎn)生1μmol脂肪酸為1個(gè)活力單位。

2、蛋白含量的測定方法為Bradford的方法進(jìn)行。

三、樣品制備

1、制備方法

將二乙烯苯、丙烯酸酯和過氧化苯甲酰按照質(zhì)量比為1:1:1混合，加入有機(jī)溶劑，50-60℃攪拌交聯(lián)，將交聯(lián)后的物質(zhì)沉淀，過濾；按質(zhì)量比為1:1將過濾后的物質(zhì)與脂肪酶混合，攪拌，過濾，得成品。

2、樣品制備

實(shí)施例1：將二乙烯苯、丙烯酸酯和過氧化苯甲酰按照質(zhì)量比為1:2:4混合，加入二甲苯，60℃攪拌交聯(lián)，將交聯(lián)后的物質(zhì)沉淀，過濾；按質(zhì)量比為2:1將過濾后的物質(zhì)與脂肪酶混合，攪拌，過濾，得成品。