[發(fā)明專利]一種膀胱輸尿管反流注射治療用填充劑及其制備方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710702758.3
• 申請(qǐng)日: 2017-08-16
• 公開（公告）號(hào): CN107376032A
• 公開（公告）日: 2017-11-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 汪長(zhǎng)春;吳攀;龍?chǎng)A;徐虹;陳宏
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 復(fù)旦大學(xué)
• 主分類號(hào): A61L31/04
• 分類號(hào): A61L31/04;A61L31/14;A61L31/18
• 代理公司: 上海正旦專利代理有限公司31200
• 代理人: 陸飛,陸尤

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于功能材料和生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種膀胱輸尿管反流注射治療用填充劑及其制備方法。

背景技術(shù)

膀胱輸尿管反流(Vesicoureteral reflux, VUR)是最常見(jiàn)的先天性腎臟和尿路畸形之一。VUR患兒具有泌尿系統(tǒng)感染的高風(fēng)險(xiǎn), 可引起腎盂腎炎和腎疤痕的形成（Pediatrics, 1999, 103(4): 843）, 腎疤痕及其后的慢性腎損傷即反流型腎病（reflux nephropathy, RN）可導(dǎo)致成人期高血壓、蛋白尿和進(jìn)行性腎功能衰竭。研究表示，有5%~10%VUR患兒最終因RN進(jìn)展為終末期腎病（The Journal of urology, 2003, 169(1):309；Pediatric Nephrology. 2012, 27(4):551）。因此，對(duì)兒童VUR，早發(fā)現(xiàn)、正確診斷以及進(jìn)行規(guī)范治療一直是醫(yī)學(xué)界關(guān)注研究的熱點(diǎn)。

內(nèi)窺鏡下注射治療VU，R因其操作簡(jiǎn)單快速，幾無(wú)術(shù)后疼痛，微創(chuàng)美觀，僅在門診手術(shù)條件下即能完成，副作用小，而被廣泛研究，其原理是利用內(nèi)鏡將各類填充劑注射于輸尿管膀胱壁間段的黏膜下層，填充劑能抬高輸尿管末端及開口位置，可以達(dá)到抗反流的目的。

目前報(bào)道過(guò)的填充材料有：Teflon（聚四氟乙烯）（Br Med J (Clin Res Ed). 1984, 289(6436):7）, 動(dòng)物蛋白（J. Urology. 2000, 55(5):759）, 聚二甲硅烷顆粒（Urology. 2002, 60(5):894）, 自體軟骨細(xì)胞（The Journal of urology. 1999, 162(3):1185），聚丙烯酸酯-多元醇共聚物（Journal of pediatric urology. 2011,7(6):654）等。但是由于具有遷移到其他臟器的可能性，不能生物降解，有致敏可能性，會(huì)被人體吸收，不能長(zhǎng)時(shí)間穩(wěn)定地存在在患處等缺點(diǎn)，上述材料在應(yīng)用上受到了一定的限制。

目前國(guó)內(nèi)尚未正式批準(zhǔn)任何治療VUR內(nèi)窺鏡下注射用填充藥物。本發(fā)明通過(guò)簡(jiǎn)單方法制備瓊脂糖微球/透明質(zhì)酸水凝膠，制得可注射的VUR凝膠填充劑。本發(fā)明致力于制備國(guó)內(nèi)首個(gè)批準(zhǔn)的VUR內(nèi)窺鏡下注射用填充劑，這將填補(bǔ)國(guó)內(nèi)目前的空白，為國(guó)內(nèi)VUR患兒帶來(lái)福音。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提出一種制備方便、熱穩(wěn)定性好、機(jī)械強(qiáng)度高的膀胱輸尿管反流注射治療用熒光填充劑及其制備方法。帶有熒光基團(tuán)的交聯(lián)瓊脂糖微球/明質(zhì)酸凝膠填充劑的制備方法及其在膀胱輸尿管反流等疾病注射治療的應(yīng)用。

本發(fā)明提出的膀胱輸尿管反流注射治療用熒光填充劑，是一種通過(guò)反相懸浮法制備的瓊脂糖微球與透明質(zhì)酸交聯(lián)形成的凝膠，或者是一種通過(guò)反相懸浮法制備的帶有熒光基團(tuán)的瓊脂糖微球與透明質(zhì)酸交聯(lián)形成的凝膠。后者可使后期動(dòng)物實(shí)驗(yàn)即可進(jìn)行方便高效且無(wú)創(chuàng)的活體成像觀察凝膠填充劑在體內(nèi)的保持情況。

本發(fā)明提出的交聯(lián)瓊脂糖微球/透明質(zhì)酸凝膠的制備方法，具體步驟為：

（1）以瓊脂糖粉末和去離子水為原料配制成瓊脂糖水溶液；

（2）利用反相懸浮法將步驟（1）的瓊脂糖水溶液制備成瓊脂糖微球；

（3）在步驟（2）制備的體系中加入交聯(lián)劑和堿，進(jìn)行交聯(lián)反應(yīng)，形成交聯(lián)瓊脂糖微球；

（4）將步驟（3）制備的體系通過(guò)多次分離洗滌，得到具有一定粒徑分布的交聯(lián)瓊脂糖微球；

（5）步驟（4）得到的交聯(lián)瓊脂糖微球與透明質(zhì)酸配制成凝膠，作為注射用填充劑；或者將步驟（4）得到的交聯(lián)瓊脂糖微球接枝熒光分子，然后再與透明質(zhì)酸配制成凝膠，作為注射用填充劑，以滿足后期活體成像觀察體內(nèi)保留情況的需要。

本發(fā)明步驟（1）中，瓊脂糖水溶液的濃度為1-10%（w/w）。

本發(fā)明步驟（2）中，所述反相懸浮法，采用正辛烷為液相，使用Span-80作為乳化劑，在高速機(jī)械攪拌、50-85℃溫度下，加入瓊脂糖水溶液，經(jīng)反應(yīng)得到瓊脂糖微球。

本發(fā)明步驟（3）中，所述交聯(lián)反應(yīng)在150-1000rpm的攪拌速度下進(jìn)行，交聯(lián)反應(yīng)溫度為35-80℃，反應(yīng)時(shí)間為0.5-6h。所述交聯(lián)劑選自環(huán)氧氯丙烷、1,3-二溴-2-丙醇等，所述堿選自氫氧化鈉、氫氧化鉀、氨水、碳酸氫鈉、碳酸鈉中的一種，或者多種。