[發明專利]一種反式葉酸的制備方法及其應用

有效

• 申請號: 201710701166.X
• 申請日: 2017-08-16
• 公開（公告）號: CN107365311B
• 公開（公告）日: 2020-04-21
• 發明（設計）人: 龐正查;陳敏;張仲景;劉露;許文韜;陳優富;王程鵬;陳蒙
• 申請（專利權）人: 浙江圣達生物藥業股份有限公司
• 主分類號: C07D475/04
• 分類號: C07D475/04
• 代理公司: 藍天知識產權代理(浙江)有限公司 33229
• 代理人: 苑新民

1.一種反式葉酸的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)反式葉酸粗品的合成

將對氨基苯甲酰谷氨酸、三氨基嘧啶硫酸鹽、三氯丙酮溶于水中，其中基于質量比計，對氨基苯甲酰谷氨酸∶三氨基嘧啶硫酸鹽∶三氯丙酮∶水＝1∶1～1.5∶1.5～3∶100～150，控制反應pH為2～7，反應溫度30～80℃，保溫2～10小時，過濾，濾餅用氨水溶解，過濾，濾液調節pH為1～3，過濾，得到粗品，純度5～15％；

(2)反式葉酸的提純

粗品用氨水溶解，過濾，濾液進半制備色譜分離，每次10ml，收集流出液，合并后減壓濃縮，加純化水稀釋1～5倍，泵入半制備色譜，用質量分數為5～20％甲醇洗出，收集流出液，減壓濃縮，濃縮液調pH至1～5，離心沉降，去除上層液，沉淀物經真空冷凍干燥，得到反式葉酸，其純度95～97％；

采用LC3000高效液相色譜儀進行制備，柱子型號C1810μm 100a；半制備檢測器波長為280nm，流速為20ml/min；半制備進樣量每次10ml；

步驟(2)中，半制備流動相配制方法為三水合磷酸氫二鉀55g，磷酸氫二鉀75g，用8000ml純化水溶解，另加900ml無水甲醇；

步驟(2)中，所述濃縮為真空濃縮，濃縮溫度45℃、真空度≤-0.09MPa；所述濃縮液用純化水稀釋1～4倍后，甲醇的質量分數為10～20％；

步驟(2)中，流出液減壓濃縮，濃縮液調pH至1.5～3，離心沉降，去除上層液，沉淀物經真空冷凍干燥。

2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)中，基于質量比計，對氨基苯甲酰谷氨酸∶三氨基嘧啶硫酸鹽∶三氯丙酮∶水＝1∶1.2∶2∶120。

3.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)中，控制反應pH為3～5，反應溫度50～70℃，保溫5～8小時，過濾，濾餅用氨水溶解，過濾，濾液調節pH為1.5～2.5，過濾，得到粗品。

4.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(2)中，所述干燥為冷凍干燥，所述冷凍干燥為溫度≤-30℃，真空度≤-10Pa，時間為12h。