[發明專利]非?FRET肉毒梭菌測定法

在審

• 申請號: 201710697371.3
• 申請日: 2012-05-31
• 公開（公告）號: CN107475293A
• 公開（公告）日: 2017-12-15
• 發明（設計）人: D.阿塔帕圖;W.塔克
• 申請（專利權）人: 拜奧麥迪遜公司
• 主分類號: C12N15/85
• 分類號: C12N15/85;G01N33/569;G01N33/58;C07K19/00;C12N5/10
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司72001
• 代理人: 羅文鋒

1.人工構建體，其包含：

編碼雜合蛋白的核酸序列，所述雜合蛋白包含與(b)切割位點偶聯的(a)含報道物的部分，所述切割位點以從所述雜合蛋白的剩余部分切割含報道物的部分的方式與肉毒梭菌毒素相互作用，以及(c)對照熒光團，其以使得肉毒梭菌毒素的濃度增加并不導致對照熒光團的熒光發射同步增加的方式經選擇和安置在所述雜合蛋白內。

2.權利要求1的人工構建體，其中所述含報道物的部分包含選自下列的至少一個熒光團：黃色熒光蛋白(YFP)、Citrine、Venus和YPet蛋白。

3.權利要求1的人工構建體，其中所述切割位點包含選自SNAP-25、小突觸泡蛋白和突觸融合蛋白的基序的至少一部分。

4.權利要求1的人工構建體，其中所述對照熒光團包含選自CFP、mStrawberry和mCherry的至少一個熒光團。

5.雜合蛋白，其包含：

與(b)切割位點偶聯的(a)含報道物的部分，所述切割位點以從所述雜合蛋白的剩余部分切割含報道物的部分的方式與肉毒梭菌毒素相互作用，以及(c)對照熒光團，其以使得肉毒梭菌毒素的濃度增加并不導致對照熒光團的熒光發射同步增加的方式經選擇和安置在所述雜合蛋白內。

6.權利要求5的雜合蛋白，其中所述含報道物的部分包含選自下列的至少一個熒光團：黃色熒光蛋白(YFP)、Citrine、Venus和YPet蛋白。

7.權利要求5的雜合蛋白，其中所述切割位點包含選自SNAP-25、小突觸泡蛋白和突觸融合蛋白的基序的至少一部分。

8.權利要求5的雜合蛋白，其中所述對照熒光團包含選自CFP、mStrawberry和mCherry的至少一個熒光團。

9.經修飾的細胞，其包含：

雜合蛋白，所述雜合蛋白包含與(b)切割位點偶聯的(a)含報道物的部分，所述切割位點以從所述雜合蛋白的剩余部分切割含報道物的部分的方式與肉毒梭菌毒素相互作用，以及(c)對照熒光團，其以使得肉毒梭菌毒素的濃度增加并不導致對照熒光團的熒光發射同步增加的方式經選擇和安置在所述雜合蛋白內。

10.權利要求9的經修飾的細胞，其中所述細胞來源于選自下列的細胞系：神經元細胞、神經內分泌腫瘤細胞、雜合細胞和干細胞。

11.權利要求9的經修飾的細胞，其中所述含報道物的部分包含選自下列的至少一個熒光團：黃色熒光蛋白(YFP)、Citrine、Venus和YPet蛋白。

12.權利要求9的經修飾的細胞，其中所述切割位點包含選自SNAP-25、小突觸泡蛋白和突觸融合蛋白的基序的至少一部分。

13.權利要求9的經修飾的細胞，其中所述對照熒光團包含選自CFP、mStrawberry和mCherry的至少一個熒光團。

14.試劑盒，其包含：

經修飾的細胞，所述經修飾的細胞包含雜合蛋白，所述雜合蛋白包含與(b)切割位點偶聯的(a)含報道物的部分，所述切割位點以從所述雜合蛋白的剩余部分切割含報道物的部分的方式與肉毒梭菌毒素相互作用，以及(c)對照熒光團，其以使得肉毒梭菌毒素的濃度增加并不導致對照熒光團的熒光發射同步增加的方式經選擇和安置在所述雜合蛋白內；和

在表征肉毒梭菌毒素中使用遺傳修飾的細胞的說明書。

15.權利要求14的試劑盒，其中所述經修飾的細胞來源于選自下列的細胞系：神經元細胞、神經內分泌腫瘤細胞、雜合細胞和干細胞。

16.權利要求14的試劑盒，其還包含細胞培養基。