[發明專利]一種無佐劑單劑量HBsAg納米凝膠疫苗及其制備方法

有效

• 申請號: 201710693401.3
• 申請日: 2017-08-14
• 公開（公告）號: CN107456574B
• 公開（公告）日: 2020-07-24
• 發明（設計）人: 張建;王海剛;韓秋菊;徐東青;趙華俊
• 申請（專利權）人: 山東大學
• 主分類號: A61K39/29
• 分類號: A61K39/29;A61K9/06;A61K47/36;A61K47/34;A61P1/16;A61P31/20
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221
• 代理人: 王志坤

本發明公開了一種無佐劑單劑量HBsAg納米凝膠疫苗及其制備方法，該無佐劑單劑量HBsAg納米凝膠疫苗的制備步驟如下：在恒溫攪拌條件下，逐步混合CS、HBsAg、γ?PGA溶液，即可制備正電荷或者負電荷的無佐劑單劑量HBsAg納米凝膠疫苗。正電荷HBsAg納米凝膠疫苗只需要單劑量注射即可獲得有效的抗體表達，增強細胞免疫，能夠更好提高接種者順從性，保證HBV預防的普遍實施。該疫苗能夠誘導免疫記憶的形成，對接種者進行長久免疫保護。負電荷HBsAg納米凝膠疫苗單劑量注射雖然沒有明顯的抗體產生，但是與正電荷HBsAg納米凝膠疫苗聯合應用，能夠獲得更強的細胞免疫，能夠具有更好的對HBV的長效免疫保護。

技術領域

本發明涉及生物醫藥領域，特別是涉及一種新型的無佐劑單劑量HBsAg納米凝膠疫苗及其制備方法。

背景技術

據最近的統計，全世界大約有20億人曾經感染過乙肝病毒(HBV)。其中，超過3.5億轉變為慢性乙肝病毒(CHB)攜帶者，他們將會有轉化為肝硬化和肝癌的風險。每年因HBV感染造成患者死亡約200萬人左右。中國是慢性HBV感染的重災區，HBV攜帶者的比例高達9.3％。因此，HBV引起的持續性病毒感染仍嚴重危害我國人民健康，影響我國人口素質的提高。

預防性免疫是當前控制HBV感染最好的方法。自1982年起，安全有效的HBV預防性疫苗已上市銷售。這種疫苗是從慢性乙肝患者的血漿中收集乙肝表面抗原(HBsAg)制作，存在一定的安全性問題，而且由于來源困難，難以滿足普遍接種的需要。之后，重組DNA技術的發展使大量生產HBsAg疫苗變為現實。該類疫苗是采用基因工程的重組技術，首先把HBsAg的基因片段插入酵母細胞或哺乳動物細胞基因中，在體外培養增殖過程中組裝或分泌HBsAg，將其收集、提純，輔以磷酸鋁或氫氧化鋁為佐劑制成的乙肝疫苗?，F在重組疫苗己在大部分國家廣泛應用。1999年之后，美國批準HBV疫苗可以在嬰兒和兒童使用。我國衛生部近10多年來不斷加大HBV防控工作力度，采取預防為主的綜合防控措施，取得了顯著成就，目前接種率均在90％以上。在新生兒計劃免疫實施20多年后，我國兒童乙肝發病率、HBV攜帶率有了明顯的下降。

但是，鋁佐劑乙肝疫苗在應用中，越來越多不完善的地方暴露出來。目前，國內外大多使用乙肝免疫流程為WHO推薦使用的0、1、6月進行三次免疫接種，需要耗時六個月。這無論從經濟上還是使用便利上都限制了現行HBV疫苗在發展中國家的廣泛應用。有研究顯示，該方法的免疫接種完成率僅為50％左右，部分接種者無法按該流程進行全程接種，從而導致無(弱)免疫應答，成為乙肝易感人群。而且，盡管鋁化合物作為佐劑通常認為是比較安全的，但是越來越多的潛在副作用被報道。例如，無菌性膿腫、嗜酸性粒細胞增多、肌筋膜炎、肉芽腫形成和阿爾茨海默氏病等。盡管，現有乙肝疫苗可使大約95％的接種人群產生乙肝抗體，但由于鋁佐劑疫苗只能誘導體液免疫，不能激發細胞免疫而降低了乙肝疫苗的免疫效果，仍有少部分人對乙肝疫苗無應答或低應答，不能產生足夠抗體預防HBV感染。更重要的是，繼新生兒乙肝疫苗計劃免疫策略實施20多年來，小年齡組人群乙肝的發病率得到有效的控制，但是成人作為乙肝發病的高危人群并沒有改變。有研究報道，20-49歲的乙肝報告發病率超過100/10萬。成人乙肝發病率較高的原因是，盡管新生兒期接種過乙肝疫苗，但隨著時間的推移，乙肝獲得性免疫減弱，重新成為乙肝易感的高危人群。

綜上，目前制約現有乙肝疫苗應用的主要原因包括：一是鋁佐劑疫苗免疫接種次數多，耗費時間長，限制疫苗接種全面開展；二是鋁佐劑疫苗的免疫記憶時間短，隨著時間推移，乙肝獲得性免疫會減弱；三是鋁佐劑疫苗只能誘導體液免疫，少部分人不能產生足夠抗體預防HBV感染；四是鋁化合物作為佐劑可能導致多種不良反應，影響接種人群用藥安全。因此，開發新型的乙肝疫苗對于乙型肝炎的防治具有十分重要的意義。

發明內容

針對上述現有技術的不足，本發明的目的在于提供一種新型的無佐劑單劑量HBsAg納米凝膠疫苗及其制備方法。本發明的疫苗單次免疫即可獲得良好的免疫效果，而且免疫記憶時間長，延長了疫苗的作用時間。