[發(fā)明專利]一種自組裝葉酸靶向納米藥物載體及其制備方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710645139.5
• 申請日: 2017-08-01
• 公開（公告）號(hào): CN107362369A
• 公開（公告）日: 2017-11-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王英颯;何靜;雷建都
• 申請（專利權(quán)）人: 北京林業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): A61K47/69
• 分類號(hào): A61K47/69;A61K47/60;A61K47/54;A61K31/56;A61P35/00
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技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種自組裝葉酸靶向納米藥物載體的制備方法。

背景技術(shù)

癌癥已成為危害人類健康的主要疾病，治療癌癥的重要手段之一是化學(xué)藥物治療，抗癌藥物在挽救生命、維護(hù)人類健康發(fā)揮著重要作用。但是藥物在發(fā)揮抗腫瘤活性的同時(shí)，往往對人體正常細(xì)胞帶來一定損傷，產(chǎn)生較大的毒副作用。有些藥物水溶性較差，在實(shí)際應(yīng)用中受到限制，需要加入增加水溶性的輔助物質(zhì)，這些增溶后的藥物常會(huì)引起較強(qiáng)的過敏反應(yīng)，影響藥物的使用和治療效果。目前，世界各國研究者正致力于尋求解決途徑。

齊墩果酸是一種五環(huán)三萜類化合物，以游離或結(jié)合成苷的形式廣泛分布存在于中草藥中。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，有超過190種植物中含有齊墩果酸，如白花蛇舌草、連翹、丁香、女貞子、大棗等。齊墩果酸具有抗HIV、抗菌、抗癌、抗?jié)儭⒅委煿琴|(zhì)疏松癥等廣泛的藥理作用和生物活性。然而，由于齊墩果酸抗炎和抗腫瘤的活性較弱，并存在著藥代動(dòng)力學(xué)指標(biāo)未達(dá)到臨床標(biāo)準(zhǔn)，水溶性差等缺陷，影響了其在臨床上的應(yīng)用。

通過采用親水性的聚乙二醇來修飾難溶性的藥物能極大的提高藥物的溶解性及穩(wěn)定性。藥物的聚乙二醇修飾即聚乙二醇化，通常是將活化的聚乙二醇通過化學(xué)方法偶聯(lián)到蛋白質(zhì)、多肽、小分子藥物和脂質(zhì)體上。聚乙二醇(PEG)是一種分子量較低的水溶性聚醚，是迄今為止已知高分子中蛋白和細(xì)胞吸收水平最低的高分子，由于無毒及良好的生物相容性，PEG已被FDA批準(zhǔn)為體內(nèi)注射用高分子。聚乙二醇修飾的藥物與未修飾的藥物相比，具有以下突出的優(yōu)點(diǎn)：(l) 溶解性提高；(2)對腫瘤有更強(qiáng)的被動(dòng)靶向作用；(3)半衰期延長；(4)最大血藥濃度降低；(5)血藥濃度波動(dòng)較小；(6)酶降解作用減少；(7)免疫原性及抗原性減小；(8)毒性降低；(9) 生物活性增強(qiáng)；(10)用藥頻率減少。

為提高藥物對腫瘤細(xì)胞的選擇性，減少對正常組織細(xì)胞的毒副作用，通過配體-受體介導(dǎo)的主動(dòng)靶向藥物傳遞系統(tǒng)已經(jīng)成為癌癥治療研究的熱點(diǎn)。葉酸即維生素B9，由蝶呤啶、對氨基苯甲酸與谷氨酸結(jié)合而成。葉酸具有分子量較小、價(jià)格便宜、易于修飾，既溶于水，又溶于有機(jī)溶劑等特點(diǎn)。在生理?xiàng)l件下，葉酸常以還原型存在，是真核細(xì)胞碳代謝和核苷合成所必須的維生素。它既參與核酸合成中嘌呤和嘧啶的合成，又構(gòu)成含鐵血紅蛋白的成分。由于動(dòng)物細(xì)胞缺乏葉酸生物合成的關(guān)鍵酶,故必須攝取和運(yùn)用外源性的葉酸。

本發(fā)明的目的是建立一種葉酸靶向納米藥物載體粒子的方法，首先通過八臂聚乙二醇與齊墩果酸進(jìn)行酯化反應(yīng)，得到八臂聚乙二醇-齊墩果酸的結(jié)合物增大藥物的溶解性、穩(wěn)定性以及半衰期；進(jìn)一步靶向分子葉酸修飾，提高對腫瘤細(xì)胞的選擇性，減少對正常組織細(xì)胞的毒副作用；最后通過自組裝形成葉酸靶向納米藥物載體粒子。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是建立一種葉酸靶向納米藥物載體的制備方法，該藥物載體粒子具有以下優(yōu)點(diǎn)：載藥量高；穩(wěn)定性好；可實(shí)現(xiàn)藥物對癌細(xì)胞的靶向傳遞及癌細(xì)胞內(nèi)pH敏感性釋放。

葉酸-聚乙二醇-齊墩果酸結(jié)合物通過自組裝形成的靶向納米藥物載體粒子具有雙層結(jié)構(gòu)，外層為親水性的八臂羧基聚乙二醇，進(jìn)一步通過靶向分子葉酸修飾；內(nèi)層為疏水的小分子藥物齊墩果酸。

所述的葉酸-聚乙二醇-齊墩果酸結(jié)合物為以下結(jié)構(gòu)，見附圖1。

其中：聚乙二醇為八臂羧基聚乙二醇；

本發(fā)明的技術(shù)方案：

1)八臂聚乙二醇修飾齊墩果酸，見附圖2；

2)葉酸修飾八臂聚乙二醇-齊墩果酸結(jié)合物，見附圖3；

3)納米粒子的制備

用沉淀法自組裝制備納米粒子。具體方法：將合成的葉酸-聚乙二醇-齊墩果酸聚結(jié)合物溶于DMSO中，逐滴加入到輕微攪拌水溶液中，純水透析3h；過濾后，冷凍干燥得到靶向納米藥物粒子。

本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)：

1)通過聚乙二醇的改性可以對齊墩果酸提供保護(hù)，提高了其水溶性，降低毒性；

2)延長了齊墩果酸在生物體內(nèi)的半衰期，保證了藥物的緩釋；

3)工藝簡單，易于操作。

具體實(shí)施方式：

下面給出的實(shí)例對本發(fā)明進(jìn)行具體描述，但不限制本發(fā)明，本發(fā)明的范圍由權(quán)利要求限定。

實(shí)施例1：