[發(fā)明專利]一種用于腸外營養(yǎng)相關(guān)性肝病藥物的制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710638211.1
• 申請日: 2017-07-31
• 公開（公告）號: CN107446952B
• 公開（公告）日: 2020-04-28
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 朱雪萍;汪健;朱曉黎;崔寧迅;崔銘玲;李潔;陳小倩;黃鳳霞;李之珩
• 申請（專利權(quán)）人: 蘇州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院
• 主分類號: C12N15/867
• 分類號: C12N15/867;C12N5/10;C12N15/113;A61K31/7105;A61K48/00;A61P1/16
• 代理公司: 蘇州創(chuàng)元專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 32103
• 代理人: 孫周強

本發(fā)明公開了一種用于腸外營養(yǎng)相關(guān)性肝病藥物的制備方法，將慢病毒包裝質(zhì)粒、包膜表達(dá)質(zhì)粒與干擾表達(dá)載體質(zhì)粒組合成三質(zhì)粒慢病毒表達(dá)系統(tǒng)，然后共轉(zhuǎn)染至包裝細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)后裂解得到腸外營養(yǎng)相關(guān)性肝病藥物；本發(fā)明設(shè)計特異性干擾IRE1α基因的shRNA包裝成慢病毒，從而高效導(dǎo)入BRL細(xì)胞，可實現(xiàn)IRE1α基因穩(wěn)定的干擾效果，實現(xiàn)腸外營養(yǎng)相關(guān)性肝病的緩解、治療。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種用于腸外營養(yǎng)相關(guān)性肝病藥物的制備方法。

背景技術(shù)

腸外營養(yǎng)(parenteral nutrition, PN)給不能通過正常腸道方式來滿足生長的新生兒帶來了革命性關(guān)愛。但長時間(＞2周)持續(xù)應(yīng)用PN也存在許多相關(guān)問題，腸外營養(yǎng)相關(guān)性肝病(total parenteral nutrition-associated liver disease, PNALD) 是其中一種最常見的并發(fā)癥。隨著長時間PN的應(yīng)用，PNALD發(fā)生率增加，PNALD具有不同程度的脂肪肝、黃疸，嚴(yán)重者可進(jìn)展為肝硬化，最終發(fā)生肝功能衰竭危及生命。PN應(yīng)用2周后可看到PNAC組織學(xué)證據(jù)，6周后可觀察到不同程度的纖維化。然而，臨床上因肝臟病理檢查具有創(chuàng)傷性，不為人們接受，PNALD診斷多依賴生化結(jié)果：直接膽紅素≥2mg/dL而無引起肝功能紊亂的其他原因。

多年來國內(nèi)外學(xué)者對PNALD的病因、發(fā)病機(jī)制研究很多，但確切病因及發(fā)病機(jī)制仍尚不明確。人們對PN營養(yǎng)液中脂肪乳成分關(guān)注較多，最近研究表明，靜脈營養(yǎng)液中的脂肪乳劑會導(dǎo)致肝臟脂肪變性、脂肪性肝炎、肝細(xì)胞損傷和膽汁淤積等，嚴(yán)重時可引起肝硬化導(dǎo)致肝衰竭。目前針對新生兒PNALD臨床上主要治療措施包括限制腸外營養(yǎng)液中的豆油脂肪乳、魚油脂肪乳取代豆油脂肪乳和使用豆油脂肪乳和魚油脂肪乳混合來源的脂肪乳劑等。

雖PNALD已被認(rèn)識30年以上，但至今仍只有少數(shù)被認(rèn)可的治療方案。現(xiàn)就近年來臨床上有效防治PNALD的一些方法綜述如下：

一、預(yù)防方案：

1、減少腸外營養(yǎng)的使用時間，盡早開始經(jīng)口喂養(yǎng)。

盡早開始腸內(nèi)營養(yǎng)，可恢復(fù)粘膜的完整性，最大限度地促進(jìn)膽汁引流。無法經(jīng)口喂養(yǎng)的短腸綜合征患者，可以嘗試縮短PN的持續(xù)時間。如果可耐受間斷的腸外營養(yǎng)，則可以減少肝臟毒性，而且間斷的腸外營養(yǎng)支持更優(yōu)于持續(xù)靜脈營養(yǎng)，不僅可以提高肝細(xì)胞養(yǎng)分的氧化，同時也可以保護(hù)肝細(xì)胞免受腸道內(nèi)毒素的侵襲。然而，在最近的一項研究并不支持此結(jié)論，該研究發(fā)現(xiàn)極低出生體重兒早期預(yù)防性間斷應(yīng)用PN，并沒有降低膽汁淤積的發(fā)生率。

2、避免高熱量碳水化合物、蛋白質(zhì)和脂類的過度攝入。

ASPEN 指南推薦減少大豆乳化劑量為1g/kg/d。但降低肝酶的同時，也需要體重增加的減輕和缺少脂質(zhì)引起腦發(fā)育的限制的負(fù)面影響。最近研究表明：長期限減少脂肪乳劑治療的嬰兒，在2–5歲時的評分在正常范圍內(nèi)。

3、熊去氧膽酸（ursodeoxycholic acid UDCA）

UDCA已被證明可以通過提高親水性膽汁酸等機(jī)制改善和預(yù)防肝損傷，同時可減少膽囊膽管增厚及擴(kuò)張。同時還有直接保護(hù)細(xì)胞的作用和調(diào)節(jié)免疫的功能。熊去氧膽酸也可通過抑制外周血單個核細(xì)胞中細(xì)胞因子的釋放，如IL-2，IL-4和IFN-γ等，從而抑制細(xì)胞免疫反應(yīng)。目前已有可靠證據(jù)表明接長期腸外營養(yǎng)的嬰兒口服UDCA對于阻止膽汁淤積是有效的。最近的一項實驗發(fā)現(xiàn)口服UDCA的實驗組比對照組發(fā)生膽汁淤積更晚，但并無證據(jù)表明UDCA對于新生兒膽汁淤積癥有積極的作用。總之，目前UDCA對于PNALD的預(yù)防作用不可確定。

4、導(dǎo)管相關(guān)性敗血癥的預(yù)防